PAC－1、CD62p和D－Dimer含量與急性腦梗死患者梗死體積的相關(guān)性

黃 濤 王海僑 (廣州中醫(yī)藥大學(xué)附屬佛山中醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，廣東 廣州 528000)

血小板活化和纖溶系統(tǒng)的激活是急性腦梗死(ACI)微血栓形成的核心病理環(huán)節(jié)〔1，2〕，在ACI缺血以及缺血-復(fù)流腦損害的發(fā)生、發(fā)展過程中均起著十分關(guān)鍵的作用〔3〕。纖維蛋白原受體(PAC-1)和P選擇素(CD62p)是目前檢測(cè)早期和晚期血小板活化程度和功能狀態(tài)的特異性標(biāo)志物〔4〕。D-二聚體(D-Dimer)是體內(nèi)纖溶亢進(jìn)和高凝狀態(tài)的交聯(lián)纖維蛋白降解產(chǎn)物，是反映體內(nèi)纖溶亢進(jìn)和高凝狀態(tài)的敏感指標(biāo)〔5〕。本研究擬探討PAC-1、CD62p和D-Dimer表達(dá)水平與ACI患者梗死體積的相關(guān)性。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 選擇2009年1月至2011年1月廣州中醫(yī)藥大學(xué)附屬佛山中醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科收治的ACI患者58例，男30例，女28例，年齡40～84〔平均(67.2±7.24)〕歲。發(fā)病到就診時(shí)間為4 h～6 d，所有患者均符合1995年全國第四屆腦血管病會(huì)議制定的ACI診斷標(biāo)準(zhǔn)，均經(jīng)過頭顱CT或者M(jìn)RI確診，并排除其他存在的凝血性疾病以及血栓。

1.2 PAC-1、CD62p和D-Dimer表達(dá)的檢測(cè) 所有患者于入院后1 d以及治療后14 d清晨空腹采集靜脈血3管，每管各4 ml，其中1、2管為對(duì)照管和實(shí)驗(yàn)管，每管先抽取5 μl全血，剩余全血分別置入FL1及FL2的補(bǔ)償管中。加入異硫氰酸熒光素(FITC)-IgM、巰基抗體(PE)-IgG1及 PerCP-CD61單抗各20 μl。另將剩余的全血中分別加入 FITC-IgM、PerCD62p及 PerCPCD61單抗各20 μl。實(shí)驗(yàn)管分別加入 FITC-PAC1、PE-CD62p及PerCP-CD61單抗各20 μl。剩余的 FL2補(bǔ)償管中加入 FITCPAC1、PE-IgG1 及 PerCP-CD61 單抗各 20 μl。避光 20 min 后1%PFA 250 μl固定 10 min，流式細(xì)胞儀 FACS Calibur(美國B.D公司)檢測(cè)PAC-1和CD62p的陽性表達(dá)率。第3管用于測(cè)定D-Dimer水平(日本SYSMEX全自動(dòng)血栓/止血分析儀)。

1.3 梗死灶體積的計(jì)算 采用Pullicino公式計(jì)算梗死灶體積公式:梗死灶體積=長×寬×CT或MRT掃描陽性層數(shù)/2。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)資料采用s表示，多組間的對(duì)比采用單因素方差分析，兩組對(duì)比采用t檢驗(yàn)，并用直線分析行相關(guān)性分析。

2 結(jié)果

2.1 梗死體積大小與ACI患者PAC-1、CD62p和D-Dimer含量的關(guān)系 PAC-1和CD62p水平與梗死體積大小有明顯的直線關(guān)系，梗死體積越大，PAC-1和CD62p水平越高。而ACI患者血漿D-Dimer水平只有在大面積梗死的ACI患者中才顯著升高。見表1。

表1 梗死體積大小與ACI患者PAC-1、CD62p和D-Dimer含量的關(guān)系(s)

表1 梗死體積大小與ACI患者PAC-1、CD62p和D-Dimer含量的關(guān)系(s)

與小體積梗死組比較:1)P＜0.01;與中體積梗死組比較:2)P＜0.01

組別 n(男/女)年齡(歲)PAC-1(%)CD62p(%)D-Dimer(μg/L)小體積梗死組 32(17/15)66.189 1±17.004 1 0.490 1±0.298 2 3.299 4±1.082 2 331.880 2±169.004 9中體積梗死組 15(6/9)58.444 0±14.300 8 0.959 8±0.375 01) 5.639 1±0.868 41) 298.779 2±282.396 0大體積梗死組 11(7/4)70.122 1±11.826 9 1.649 8±0.611 62) 7.107 2±1.692 42) 579.247 7±217.550 62)

2.2 梗死體積與ACI患者PAC-1和CD62p含量的相關(guān)性分析 經(jīng)直線分析，PAC-1和CD62p水平均與梗死體積存在明顯相關(guān)性，梗死體積越大，ACI患者PAC-1和CD62p水平也越高，血小板活化也越強(qiáng)。見表2。

表2 梗死體積與ACI患者PAC-1和CD62p含量的相關(guān)性分析

3 討論

PAC-1是反映血小板活化的早期標(biāo)志物〔4〕，血小板膜糖蛋白在血栓形成過程中及受損血管血小板黏附過程中均起著重要的作用〔6〕。對(duì)血小板表面PAC-1表達(dá)的檢測(cè)能夠反映血小板早期活化的情況。CD62p是血小板α顆粒釋放后的標(biāo)志物，血小板在組胺、腫瘤壞死因子、氧自由基、凝血酶等因子刺激時(shí)會(huì)被激活，從而使原來存在于血小板胞質(zhì)內(nèi)的糖蛋白CD62p得以迅速表達(dá)于血小板活化后的內(nèi)皮細(xì)胞上，最終成為晚期血小板活化的特異性指標(biāo)〔6〕。D-Dimer為纖維蛋白降解產(chǎn)物中最小的片段，是體內(nèi)纖溶亢進(jìn)的分子標(biāo)志物以及高凝狀態(tài)的標(biāo)志物，是反映機(jī)體凝血/纖溶系統(tǒng)的敏感指標(biāo)之一〔5〕。近年來研究表明血栓溶解與D-Dimer水平的降低存在直接相關(guān)性〔5〕。當(dāng)機(jī)體處于凝血狀態(tài)時(shí)，凝血酶會(huì)促進(jìn)纖維蛋白轉(zhuǎn)變成為交聯(lián)纖維蛋白，纖溶系統(tǒng)同時(shí)被激活、降解，最終形成D-Dimer的碎片。D-Dimer水平上升表明機(jī)體凝血系統(tǒng)以及纖溶系統(tǒng)被雙重激活，從而反映全身或局部血管內(nèi)凝血和繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)〔5〕。因此，檢測(cè)ACI患者的D-Dimer水平變化對(duì)判定溶栓治療療效及血栓形成均有重要的意義。

李軍等〔7〕研究表明腦梗死急性期患者的PAC-1、CD62p表達(dá)水平，大梗死灶組＞中梗死灶組＞小梗死灶組。顯示PAC-1、CD62p表達(dá)水平與梗死灶的大小呈顯著正相關(guān)。陳軍等〔8〕研究也顯示PAC-1和CD62p的表達(dá)水平與梗死灶面積呈密切相關(guān)性，表明梗死灶面積越大，患者體內(nèi)PAC-1和CD62P的表達(dá)水平就越高，血小板活化的程度也越強(qiáng)。葛京平等〔9〕對(duì)腦梗死患者急性期血小板行透射電鏡掃描顯示，梗死灶面積大的患者α顆粒數(shù)量顯著高于梗死灶面積小的患者，提示血小板活性增強(qiáng)導(dǎo)致線粒體被消耗，從而使α顆粒被激活，α顆粒等活性物質(zhì)釋放會(huì)加重缺血性損害，從而最終導(dǎo)致腦梗死癥狀的進(jìn)一步惡化。

本組研究也顯示，ACI患者的PAC-1和CD62p表達(dá)水平與梗死灶體積呈密切相關(guān)性，梗死灶體積越大，患者的PAC-1和CD62p表達(dá)水平越高，可能因?yàn)檠“寤罨螃令w粒分泌產(chǎn)物能夠通過血腦屏障，造成腦組織損害，導(dǎo)致腦卒中惡化，并能夠促進(jìn)各種炎性物質(zhì)生成，從而加重炎癥、水腫，并擴(kuò)大梗死灶的面積。而本組研究表明D-Dimer的表達(dá)水平與梗死灶體積增大無相關(guān)性，只有在ACI患者中存在大體積梗死者，其血漿DDimer水平才會(huì)存在較為明顯的升高，與許多學(xué)者的報(bào)道不同〔10〕。其原因在于ACI早期中小體積梗死患者的纖溶系統(tǒng)并未完全激活，使D-Dimer水平表達(dá)不明顯;當(dāng)梗死灶體積增大時(shí)，血中纖溶系統(tǒng)被完全激活，從而導(dǎo)致交聯(lián)纖維蛋白降解產(chǎn)物D-Dimer增加。

綜上所述，PAC-1、CD62p和D-Dimer參與了ACI血栓形成和腦缺血后再灌注損傷，三者不僅在ACI發(fā)生發(fā)展過程中起著關(guān)鍵作用，而且與ACI患者梗死體積大小關(guān)系密切。PAC-1和CD62p含量隨著ACI患者梗死體積的增大逐漸增高，呈明顯的正相關(guān)。由于病例數(shù)偏少，本實(shí)驗(yàn)只粗略地評(píng)估了PAC-1、CD62p和D-Dimer含量與ACI患者梗死體積之間的線性關(guān)系，更全面、系統(tǒng)、客觀評(píng)估期待今后更大規(guī)模的實(shí)驗(yàn)研究。

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