學齡前原發性腎病綜合征患兒淋巴細胞亞群測定

劉峻峰

周口市中心醫院兒科 周口 466000

原發性腎病綜合征(primary nephrotic syndrome,PNS)是兒童時期常見的腎臟病,復發率高。患兒長期應用激素藥物及后期加用免疫抑制劑，可出現代謝紊亂、免疫力低下、易感染、腎上腺皮質功能不全等副作用[1]，影響患兒的生長發育,特別是3～7歲的學齡前兒童。近年來PNS發生率有增加的趨勢,且復發率較高[2]。作者分析了明確診治的學齡前PNS患兒淋巴細胞亞群的改變，探討學齡前PNS患兒細胞免疫功能的變化與激素治療的敏感性和復發的關系，為及時選擇合適的治療方案提供依據。

1 臨床資料

1.1一般資料選擇2006年1月至2012年11月周口市中心醫院兒科收治的3～7歲PNS患兒86例,均符合中華醫學會兒科分會腎臟病學組的PNS診斷標準[3]。患兒除外繼發性腎病綜合征，且未接受糖皮質激素或免疫調節劑治療，隨訪均超過1 a。其中男54例，女32例，年齡3～7(5.1±1.6)歲。選取同期兒科門診20名正常健康體檢兒童20例為正常對照組，其中男12例，女8例，年齡3～7(4.5±2.1)歲。

1.2觀測指標分別采集對照組及PNS患兒治療前清晨空腹靜脈血2 mL送檢淋巴細胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細胞，NK細胞和B淋巴細胞)。應用Facs Culibur流式細胞儀(美國BD公司) 采用雙色分析系統分析檢測各亞群淋巴細胞的比例。記錄1 a內足量潑尼松治療后尿蛋白轉陰時間及復發情況。

1.3療效判斷及復發標準

1.3.1 療效判斷[4-5]①激素敏感：以潑尼松足量[2 mg/(kg·d)或60 mg/(m2·d)]治療≤4周，尿蛋白轉陰。②激素耐藥：以潑尼松足量治療>4周尿蛋白仍陽性。

1.3.2 復發標準[1]①復發：連續3 d，晨尿蛋白由陰性轉為(+++)或(++++)或24 h尿蛋白定量≥50 mg/kg或尿蛋白/肌酐≥2.0。②頻復發：半年內復發≥2次，或1 a內復發≥3次。

1.4統計學處理應用SPSS 17.0進行分析，2組兒童外周血淋巴細胞亞群比例、PNS患兒激素敏感和激素耐藥組外周血淋巴細胞亞群比例的比較采用兩獨立樣本t檢驗，未復發、復發和頻復發組外周血淋巴細胞亞群比例的比較采用單因素方差分析和SNK-q檢驗，檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1PNS和正常對照組兒童外周血淋巴細胞亞群比例比較見表1。

表1 PNS和正常對照組兒童外周血淋巴細胞亞群比例比較 %

2.2激素敏感與激素耐藥型學齡前PNS患兒外周血淋巴細胞亞群比例比較見表2。

表2 激素敏感與激素耐藥型學齡前PNS患兒外周血淋巴細胞亞群比例比較 %

2.3未復發、復發和頻復發的學齡前PNS患兒外周血淋巴細胞亞群比例比較見表3。

表3 未復發、復發、頻復發學齡前PNS患兒外周血淋巴細胞亞群比例比較 %

*:與未復發組比較，P<0.05；△:與復發組比較，P<0.05。

3 討論

PNS的病因目前尚不清楚, 林廣裕等[6]提出PNS可能與T細胞功能異常, 從而分泌某些循環淋巴因子作為毒性物質損傷腎小球基底膜有關。淋巴細胞各亞群在正常機體內保持著一定的比例, 一旦比例失調, 體內免疫功能則發生紊亂, 將導致感染性或免疫性疾病的發生[7]。

T淋巴細胞各亞群的平衡是構成機體免疫系統的重要因素。體內免疫平衡是通過輔助性CD4+和抑制性CD8+T淋巴細胞形成的細胞網絡來維持，2者的升高與降低均可導致機體免疫功能的異常或紊亂[8]。NK細胞是外周血第三類淋巴細胞，能比較準確地反映機體免疫活性細胞的功能狀態,在機體免疫監視過程中發揮重要功能。機體免疫功能受到明顯抑制時，NK細胞活性下降[9]。劉碧華等[10]報道PNS兒童T淋巴細胞亞群間存在失衡現象，給予激素、環磷酰胺或中藥等治療, 病情控制后, T淋巴細胞亞群之間的失衡明顯改善, 而無效者T細胞亞群失衡也不能恢復。該研究發現學齡前期PNS患兒CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細胞、CD4+/CD8+及NK細胞較正常對照組兒童顯著降低，提示PNS患兒在發病過程中存在T細胞免疫應答能力降低,與陸彪等[11]報道相一致。NK細胞亦明顯出現紊亂，而B淋巴細胞與正常兒童比較無差異，與劉秀云等[12]的報道不一致。

該研究發現學齡前PNS患兒激素耐藥組CD8+T淋巴細胞比例低于激素敏感組，CD4+/CD8+和NK細胞比例高于激素敏感組，提示CD8+T淋巴細胞明顯受抑制的學齡前PNS患兒可能更容易出現激素耐藥，NK細胞受抑制的PNS患兒可能對激素更敏感，這或許可以為臨床中是否行腎穿刺活檢術提供參考。學齡前PNS兒童隨訪1 a，復發與頻復發組CD8+T淋巴細胞比例高于未復發組，而復發組與頻復發組間無顯著差別；NK細胞比例在復發和頻復發組中較低。以上結果是否能說明CD8+T淋巴細胞受抑制明顯的PNS患兒相對不易復發或者可以在PNS復發后首選能明顯抑制CD8+T淋巴細胞、提高NK細胞的藥物治療，有待進一步研究。

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