鹽續(xù)斷中試工藝的優(yōu)化

摘要：采用L9（34）正交試驗，以續(xù)斷水溶性浸出物和川續(xù)斷（Dipsacus asper Wall. ex Henry）皂苷Ⅵ為測定指標，考察鹽使用量、炒制溫度、炒制時間、炒藥機轉速4個因素對鹽續(xù)斷質量的影響，并采用多指標綜合評分法優(yōu)化鹽續(xù)斷中試炮制工藝。結果表明，鹽續(xù)斷中試最佳炮制工藝為每100 kg續(xù)斷飲片用2 kg食鹽，210 ℃炒12 min，炒藥機轉速40 r/min。綜合評分法優(yōu)選出的鹽續(xù)斷中試炮制工藝穩(wěn)定、可行，能較好地保證產品的質量。

關鍵詞：續(xù)斷；鹽制；中試；工藝優(yōu)化

中圖分類號：S567.2；R943 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2013）18-4481-03

續(xù)斷為川續(xù)斷科（Dipsacaceae）多年生草本植物川續(xù)斷（Dipsacus asper Wall. ex Henry）的干燥根，主產于湖北、四川等地。味苦、辛，微溫，歸肝、腎經(jīng)，具有補肝腎、行血脈、續(xù)折傷的功效，臨床上多用于腰膝酸軟、風濕痹痛、崩漏、胎漏、跌打損傷等癥[1]。研究表明續(xù)斷有抗骨質疏松[2]、促進骨愈合[3]、治療阿爾茨海默病的作用[4]及其他藥理作用，是治療骨科疾病及治療阿爾茨海默病的潛在藥物。酒續(xù)斷自古有之，目前已有較佳的炮制工藝[5]，而鹽續(xù)斷是近些年才發(fā)展起來的，鹽引藥走腎[6]，故鹽續(xù)斷補腎之功增強。目前鮮見關于鹽續(xù)斷炮制工藝的研究。為此采用正交試驗，以續(xù)斷水溶性浸出物和川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量為指標，對加鹽量、炒制時間、炒制溫度和炒藥機轉速4個影響因素進行分析，以期優(yōu)化鹽續(xù)斷的中試炮制工藝。

1 材料與方法

1.1 材料及設備

乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。續(xù)斷購自浙江中醫(yī)藥大學中藥飲片廠（批號091214），經(jīng)浙江中醫(yī)藥大學來平凡教授鑒定為中國藥典規(guī)定的川續(xù)斷的干燥根。續(xù)斷經(jīng)凈制、切制得到薄片。對照品川續(xù)斷皂苷Ⅵ（批號111685-200401）購自中國藥品生物制品檢定所。該工藝研究中每次試驗飲片用量為5 kg，炮制條件與大規(guī)模生產相近，可以指導續(xù)斷大規(guī)模生產的炮制工作。

Agilent 1200高效液相色譜儀（美國安捷倫公司）；CGY（Q）-750Z智能化炒藥機（杭州海善制藥設備有限公司）；KQ-500DB型數(shù)控超聲波清潔器（昆山市超聲儀器有限公司）；AL204電子分析天平（瑞士梅特勒-托利多公司）。

1.2 方法

1.2.1 正交試驗設計 續(xù)斷鹽制工藝正交試驗設計見表1。

1.2.2 水溶性浸出物含量的測定 取供試品約2 g置于100 mL的錐形瓶中，加水定容至50 mL，稱定重量，靜置1 h后連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸1 h。放冷后取下錐形瓶，再稱定重量，用去離子水補足減失的重量，搖勻，干燥濾器濾過，量取濾液2 mL置于干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，水浴上蒸干后于105 ℃干燥3 h，置干燥器中冷卻30 min，迅速精密稱定重量[1]。除另有規(guī)定外，以干燥品計算供試品中水溶性浸出物的含量。

1.2.3 川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量的測定

1）色譜條件。反相色譜柱為Eclipse XDB-C18（4.6 mm×150 mm，5 μm），以乙腈-水（30∶70，V/V）為流動相，檢測波長212 nm，流速1 mL/min[1]。理論板數(shù)按川續(xù)斷皂苷Ⅵ峰計算應不低于3 000。

2）對照品溶液的制備。精密稱取川續(xù)斷皂苷Ⅵ對照品適量，用甲醇配制成1.5 mg/mL的溶液。精確量取1 mL溶液置于10 mL的容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。

3）供試品溶液的制備。取鹽續(xù)斷細粉約0.5 g置于具塞錐形瓶中，加入甲醇25 mL，稱定重量，超聲波處理（功率100 W，頻率40 kHz）30 min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過。量取續(xù)濾液5 mL置于50 mL容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。

2 結果與分析

2.1 續(xù)斷鹽制正交試驗結果及分析

以續(xù)斷水溶性浸出物和川續(xù)斷皂苷Ⅵ的總量為指標進行綜合加權評價，續(xù)斷水溶性浸出物和川續(xù)斷皂苷Ⅵ的總量權重各占50%，綜合加權得分=（第i個處理水溶性浸出物含量÷水溶性浸出物含量最大值）×50+（第i個處理川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量÷川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量最大值）×50。正交試驗結果見表2。

從表2可以看出，各因素對鹽續(xù)斷質量的影響為A>D>B>C，但影響均不顯著。因各因素都沒有顯著影響，故可以根據(jù)生產實際進行適當選擇。溫度的影響最大，但藥典要求炒至表面稍有焦斑即可，溫度太高會炒焦，故根據(jù)炮制要求及從節(jié)能角度綜合考慮，選擇炒制溫度為210 ℃；加鹽量對質量影響不大，故選擇中藥飲片鹽制時普遍的鹽用量每100 kg飲片用2 kg食鹽；炒制時間影響最小，但由于是飲片加鹽水潤透后再炒，飲片需炒干，根據(jù)本研究12 min可炒干并稍有焦斑；炒藥機轉速影響較大，但與實際有出入，攪拌的目的是使飲片炒得均勻，根據(jù)試驗結果再考慮到節(jié)能，選擇炒藥機轉速為40 r/min。最后炮制條件選擇組合A3B2C1D2，即加鹽量為每100 kg飲片加食鹽2 kg，210 ℃炒制12 min，自動炒藥機轉速為40 r/min。

2.2 驗證試驗

稱取同批次續(xù)斷飲片3份各5 kg，按照優(yōu)選的炮制工藝進行重復性試驗，結果見表3。從表3可以看出，各重復的續(xù)斷水溶性浸出物和川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量穩(wěn)定，重復性良好，工藝穩(wěn)定可行。

2.3 續(xù)斷鹽制前后各項指標含量比較

按照中國藥典規(guī)定的測定方法比較鹽制前后續(xù)斷水溶性浸出物和川續(xù)斷皂苷Ⅵ兩項指標含量的變化，具體見表4。表4結果表明，續(xù)斷飲片鹽制后水溶性浸出物含量明顯升高，可能是鹽和高溫促使某些物質在水中易溶出；川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量略有降低，可能是高溫破壞了部分川續(xù)斷皂苷Ⅵ的結構。

3 小結

通過4因素3水平正交試驗優(yōu)選出續(xù)斷的最佳鹽制中試工藝，即每100 kg續(xù)斷飲片食鹽用量為2 kg，210 ℃炒制12 min，自動炒藥機轉速為40 r/min。驗證試驗結果表明該工藝穩(wěn)定可行，為續(xù)斷炮制的深入研究打下了一定的基礎。續(xù)斷鹽制正交試驗以水溶性浸出物和川續(xù)斷皂苷Ⅵ的含量為指標，這兩項指標各占權重50%，綜合評判鹽續(xù)斷的炮制工藝，使炮制溫度、炮制時間、加鹽量、炒藥機轉速評判客觀化，克服了傳統(tǒng)的單憑經(jīng)驗判斷各個影響因素因人而異的主觀性。該炮制工藝每個處理均用全自動炒藥機炒制5 kg飲片，炮制的條件與大規(guī)模生產相近，可以直接指導續(xù)斷大規(guī)模生產的炮制工作。該研究對飲片炮制前悶潤條件例如鹽水悶潤時間及調鹽水時水的用量等未詳加考察，今后可研究各種悶潤條件對鹽續(xù)斷質量的影響。

參考文獻：

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