香蕉和土壤中戊唑醇和咪鮮胺的HPLC分析

摘要：采用高效液相色譜-紫外檢測器的方法對香蕉全蕉、蕉肉和蕉園土壤中的戊唑醇和咪鮮胺進行檢測。結果表明，該方法檢出限為0.02 mg/kg，平均回收率為81%～115%，相對標準偏差為1.7%～10.0%。

關鍵詞：戊唑醇；咪鮮胺；香蕉；土壤；液相色譜

中圖分類號：O657.7+2 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2013）12-2909-02

Analysis of Tebuconazole and Prochloraz in Banana and Soil by HPLC

LIN JING-ling，HAN Bing-jun，ZHANG Yue

（Analysis and Testing Center， Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences， Haikou 571101， China）

Abstract： The residue of tebuconazole and prochlora in banana and soil was detected by HPLC-UVD. The lowest detection limits of was 0.02 mg/kg. The average recovery was in the range of 81%～115%. The relative standard deviation was 1.7%～10%.

Key words： tebuconazole； prochlora； banana； soil； HPLC

戊唑醇（Tebuconazole）和咪鮮胺（Prochloraz）均為廣譜性殺菌劑，戊唑醇主要抑制甾醇的脫甲基化[1-3]，咪鮮胺主要抑制病原真菌體內麥角甾醇生物合成[4，5]，二者均可防治香蕉葉斑病。該試驗通過乙腈提取，NH2固相萃取小柱凈化，采用高效液相色譜-紫外檢測器法對2種殺菌劑進行定量分析，并通過香蕉和香蕉園土壤的加標分析為客觀評價上述殺菌劑的殘留水平提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

香蕉樣品、土壤樣品均采集自海南省海口市秀英區永莊村綠晨香蕉基地。

咪鮮胺（1 mg/mL，農業部環境保護科研監測所），戊唑醇（1 mg/mL，農業部環境保護科研監測所），使用時稀釋至相應濃度；甲醇（分析純、色譜純），乙腈、二氯甲烷（分析純），氯化鈉（140 ℃烘烤4 h）等，NH2固相萃取小柱（500 mg/6 mL）。

1.2 主要儀器

Waters液相色譜儀（2487紫外檢測器、1525二元梯度泵和717自動進樣器）、電子天平、攪拌機、勻漿機、漩渦混勻器、振蕩器、旋轉蒸發儀等。

1.3 方法

1.3.1 香蕉樣品前處理 稱取20.00±1.00 g樣品置于高型燒杯中，加入40 mL乙腈，2 000 r/min勻漿2 min后用濾紙過濾，濾液收集到裝有5～7 g氯化鈉的100 mL具塞量筒中，收集濾液40 mL左右，蓋塞，劇烈振蕩2 min，室溫靜置30 min，待乙腈相和水相分層，準確吸取上清液10.00 mL于100 mL圓底燒瓶中，減壓濃縮（40 ℃）至干，加5.0 mL丙酮-二氯甲烷（95∶5，V/V，下同）混合液，待凈化。

1.3.2 土壤樣品前處理 稱取20.00±1.00 g樣品于200 mL具塞錐形瓶中，加入40.0 mL乙腈，往復振蕩2 h，濾紙過濾，收集濾液于10 mL過飽和氯化鈉溶液的100 mL具塞量筒中，收集濾液約40 mL，蓋塞，劇烈振蕩2 min，室溫靜置30 min，待乙腈相和水相分層，準確吸取上清液10.00 mL于100 mL圓底燒瓶中，減壓濃縮（40 ℃）至干，加5.0 mL丙酮-二氯甲烷（95∶5）混合液，待凈化。

1.3.3 凈化 NH2固相萃取小柱用5.0 mL丙酮-二氯甲烷（95∶5）預淋洗，當溶劑液面到達柱吸附層表面時，立即倒入上述待凈化溶液，用100 mL圓底燒瓶收集，以5.0 mL丙酮-二氯甲烷（95∶5）沖洗圓底燒瓶殘留物，淋洗NH2小柱，重復3次，收集液減壓濃縮（40 ℃）至干，用2.50 mL乙腈定容，過0.22 μm有機濾膜，待測。

1.3.4 液相色譜條件 色譜柱：Kromasil C18柱（150 mm×4.60 mm，5 μm），柱溫40 ℃，檢測波長220 nm， 進樣量：10 μL，流動相見表1。

2 結果與分析

2.1 檢測波長的選擇

綜合考慮戊唑醇和咪鮮胺在紫外光區的最大吸光度，以及雜質的干擾情況，確定檢測波長為220 nm。戊唑醇和咪鮮胺標準樣品的HPLC譜圖見圖1。

2.2 分析方法的線性相關性

采用外標法峰面積定量。用乙腈配制戊唑醇、咪鮮胺標準貯備液，用乙腈逐級稀釋配制成0.020、0.200、1.000、2.000、4.000 mg/L標準系列濃度，進樣量10 μL。在上述條件下注射標準工作系列溶液，繪制標準曲線，戊唑醇保留時間為8.344 min，回歸方程y= 2.94×104x-1.87×103（r2=0.997 0）；咪鮮胺保留時間為9.680 min，回歸方程y=3.99×104 x-1.89×103（r2=0.997 2），結果表明，在上述濃度范圍內，儀器響應值與進樣量呈良好的線性關系。

2.3 方法學分析

采集未施藥的香蕉和土壤樣品，添加3個水平的戊唑醇和咪鮮胺標準溶液（0.020、0.050、5.000 mg/kg），每個濃度水平設5個平行。測定這兩種殺菌劑在香蕉（全蕉、蕉肉）和土壤中的添加回收率，結果見表2、表3和圖2、圖4。戊唑醇在全蕉中的回收率為95%～106%，相對標準偏差5.6%～9.3%，在蕉肉中的回收率為84%～104%，相對標準偏差6.5%～10%，在土壤中的回收率為97%～114%，相對標準偏差2.9%～5.7%；咪鮮胺在全蕉中的回收率為86%～103%，相對標準偏差3.8%～7.7%，在蕉肉中的回收率為81%～96%，相對標準偏差3.8%～10.0%，在土壤中的回收率為87%～115%，相對標準偏差1.7%～7.1%。結果表明，該方法的準確度和精密度符合農藥殘留試驗準則要求。

3 結論

本試驗通過高效液相色譜法測定了戊唑醇和咪鮮胺在香蕉和土壤中的殘留量，方法回收率和相對標準偏差均符合要求，且線性關系良好，目標物質與樣品中的雜質分離完全。該法準確、快速、靈敏度高，可滿足農藥殘留檢測分析的要求。

參考文獻：

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