千金文武湯對糖尿病腎病大鼠血糖和腎功能的影響

盧煥俊，金元哲，許青松

(延邊大學生理學教研室，吉林延吉133002)

糖尿病腎病(DN)是糖尿病患者的主要死因之一［1］。30% ～50%的1型糖尿病患者及20%的2型糖尿病患者伴隨顯著的腎功能損壞，同時DN也是造成終末期腎病的主要原因之一［2，3］。目前DN的治療只能從某種程度上延緩其發展。最新研究表明，嚴格控制血糖能夠降低DN的發生率，但同時會增加病死率［4］。因此需要尋求更加安全、有效的治療方法。千金文武湯出自《東醫四象新編》朝藥藥方，具有補肺、斂肺元、養胃生津的功效。2014年2～6月，我們采用千金文武湯對DN大鼠進行輔助治療，觀察其對DN引起的糖代謝異常的調節和腎功能的改善作用。

1 材料與方法

1.1 材料 清潔級雄性SD大鼠130只，體質量250 g左右，由吉林大學實驗動物中心提供。千金文武湯(山藥 10 g、葛根 10 g、藳本 10 g、黃芪 10 g、五味子5 g、麥冬5 g、桔梗5 g、白芷5 g、升麻5 g)由延吉市中醫醫院提供，熬制成濃度為10、5、2.5 g/kg的湯劑。鏈脲佐菌素(STZ)購于美國Sigma公司，鹽酸貝那普利購于北京諾華制藥有限公司。血尿素氮、肌酐試劑盒均購于南京建成科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 DN模型的建立 大鼠適應性飼養1周，術前禁食不禁水12 h，其中120只行左腎切除手術［5］，10只作為正常對照組，行假手術，麻醉后暴露左腎，從左背部入口分離左腎，不做任何處理，關閉切口。1周后禁食不禁水12 h，腎切除大鼠腹腔注射STZ 55 mg/kg，以血糖≥16.7 mmol/L、24 h 尿量≥80 mL、肌酐清除率≥1.5 mL/min為造模成功。

1.2.2 分組及給藥方法 從造模成功中的大鼠中隨機挑選50只，分為陽性對照組、模型組、千金文武湯低劑量(2.5 g/kg)組、千金文武湯中劑量(5 g/kg)組、千金文武湯高劑量(10 g/kg)組各10只，千金文武湯組分別灌胃對應劑量湯劑，陽性對照組給予洛丁新10 mg/kg灌胃，正常對照組與模型組給予等量蒸餾水灌胃，1次/d，連續30 d。

1.2.3 觀察指標 灌胃期間觀察各組體毛、呼吸、攝食、飲水、大小便、精神狀態的變化，每日測量體質量。灌胃結束最后1 d測量給藥組24 h尿量。心臟采血后，用Ultra穩豪型血糖儀直接測定空腹血糖，酶聯免疫法測定血尿素氮(BUN)、尿肌酐(Ucr)和血肌酐(Scr)。肌酐清除率(Ccr)的計算公式:Ccr=Ucr/Scr×每分鐘尿量)。

1.2.4 統計學方法 采用SPSS11.5統計軟件，結果以±s表示，數據的比較采用單因素方差分析以及t檢驗。P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組體質量、24 h尿量及一般狀態比較 模型組體質量低于正常組(P＜0.05)，千金文武湯各劑量組體質量與陽性對照組和模型組相比無統計學差異(P均＞0.05);模型組24 h尿量明顯高于千金文武湯各劑量組(P均＜0.05)。見表1。實驗結束后對各組動物進行解剖，肉眼觀察腎、脾、心、胃腸、肝和肺等臟器，未發現明顯異常。

表1 各組體質量和24 h尿量比較(±s)

表1 各組體質量和24 h尿量比較(±s)

注:與模型組比較，*P ＜0.05

組別 n 體質量(g) 24 h尿量(mL)高劑量組 10 200.34 ±30.82 90.35 ±18.30*中劑量組 10 203.30 ±37.60 95.12 ± 7.55*低劑量組 10 191.55 ±45.50 93.53 ±20.73*模型組 10 180.00 ±33.74 120.85 ±25.88陽性對照組 10 191.50 ±22.50 105.50 ±20.50正常對照組 10 320.45 ±23.85* 18.74 ± 5.46*

2.2 各組血生化指標比較 模型組空腹血糖濃度明顯高于千金文武湯各劑量組和陽性對照組(P均＜0.05)，而千金文武湯各劑量組與陽性對照組之間無統計學差異(P均＞0.05)。千金文武湯各劑量組和陽性對照組的BUN、Scr和Ccr均低于模型組(P＜0.05)，千金文武湯各劑量組與陽性對照組比較無統計學差異(P＞0.05)。見表2。

表2 各組血糖、尿素氮、血肌酐濃度和肌酐清除率比較(±s)

表2 各組血糖、尿素氮、血肌酐濃度和肌酐清除率比較(±s)

注:與模型組比較，*P ＜0.05

組別 n 血糖(mmol/L) BUN(mmol/L) Scr(μmol/L) Ccr(mL/min)高劑量組 10 19.44 ±1.28* 8.70 ±0.59* 123.42 ± 8.74* 1.28 ±0.18*中劑量組 10 19.94 ±1.13* 8.57 ±1.26* 120.49 ±11.35* 1.32 ±0.15*低劑量組 10 20.22 ±2.49* 11.33 ±1.34* 130.90 ± 7.15* 1.39 ±0.15*模型組 10 27.24 ±0.86 14.47 ±1.44 154.97 ±11.11 3.01 ±0.56陽性對照組 10 22.56 ±1.22* 10.76 ±0.90* 132.48 ± 5.49* 1.51 ±0.33*正常對照組 10 5.39 ±0.18* 6.72 ±0.32* 69.09 ± 3.66* 0.64 ±0.06*

3 討論

高血糖是糖尿病逐漸惡化為DN的前提，本實驗利用STZ誘導大鼠形成DN，造模成功后測得空腹血糖均高于16.7 mmol/L。這種高血糖是DN發生發展的重要因素。其可能機制包括:機體大部分組織可以通過減少葡萄糖的輸入來保護自身免遭高血糖的破壞，而內皮細胞沒有這種葡萄糖誘導的自動調節的反應功能［4］，導致內皮細胞內葡萄糖與代謝中產物的持續升高，損傷內皮細胞并加速其凋亡;葡萄糖氧化過程中伴有大量氧自由基，活性氧產生［5］，造成氧化應激損傷血管內皮，改變腎臟血液流變學，引起腎單位結構、功能等改變，促使DN發生發展。

研究表明，控制血糖水平可以延緩DN的發展進程，減輕腎臟病理損害［6］。千金文武湯由葛根、山藥、藳本、黃芪、麥冬、桔梗等中藥組成，其中葛根含有葛根素、大豆黃酮，具有醛糖還原酶活性，有抑制蛋白非酶糖化的功效，從而發揮降糖作用［7］。山藥的主要有效成分薯蕷皂甙［8］可刺激或調節免疫系統的功能，山藥提取物對禁食大鼠有降血糖作用，能控制四氧嘧啶引起的高血糖［9］，對四氧嘧啶所致的大鼠胰島β細胞損傷有保護作用。張忠泉等［10］認為，山藥多糖對DM的治療作用可能與增加胰島素分泌、改善受損的胰島β細胞功能有關。麥冬的主要化學成分為各種類型的多聚糖、甾體皂苷、高異黃酮類化合物以及氨基酸等成分［11］。麥冬多糖能明顯降低小鼠的血糖，同時對葡萄糖、腎上腺素及四氧嘧啶所致的小鼠高血糖具有明顯的抑制作用，其作用機制可能為減少四氧嘧啶對胰島β細胞損傷或對這種損傷具有一定程度的保護和修復作用［12］。王丹蕊等［13］報道，麥冬多糖可以降低STZ致DM大鼠的血糖，對DM大鼠血液學指標和激素的調節作用顯著。桔梗含有大量三萜皂苷，具有明顯的降糖作用［14］。本實驗結果表明，模型組血糖持續升高，而千金文武湯大、中、小劑量組血糖明顯降低，與模型組比較有統計學差異。表明千金文武湯能夠控制DN大鼠血糖的持續升高。

BUN、Scr、Ccr是評價DN療效的客觀指標。本研究顯示，造模后各組 BUN、Scr、Ccr比較，模型組均明顯高于正常對照組，提示腎臟受到了一定的損害。給藥后陽性對照組與千金文武湯各劑量組的BUN均低于模型組，說明千金文武湯能夠降低DN大鼠升高的BUN;給藥后千金文武湯各劑量組的Scr、Ccr明顯也均低于模型組;故千金文武湯對DN大鼠升高的Scr和Ccr具有一定的調節作用。Ccr主要反映的是腎小球的濾過功能，Ccr的高低與尿量呈正比，因此尿量是影響Ccr的直接因素。給藥組尿量明顯低于模型組和陽性對照組也進一步證明其具有改善DN大鼠腎臟病理損害的作用，對DN具有一定的輔助治療作用。

［1］劉洪，高明殿，夏美娜.銀杏黃酮對糖尿病腎病大鼠的腎保護作用及機制探討［J］.山東醫藥，2013，53(32):30-32.

［2］李淑華，白潔，周寧.谷胱甘肽治療糖尿病腎病療效觀察［J］.山東醫藥，2004，44(25):55-56.

［3］Gu W，Zou LX，Shan PF.Analysis of urinary proteomic patterns for diabetic nephropathy by ProteinChip［J］.Proteomics Clin Appl，2008，2(5):744-750.

［4］Patel A，MacMahon S，Chalmers J，et al.Intensive blood glucose control and vascular outcomes in patients with type 2 diabetes［J］.N Eng J Med，2008，358(24):2560-2572.

［5］Alpert E，Cruzman A，Riahi Y，et al.Delayed autoregulation of glucose transport in vascular endothelial cells［J］.Diabetolodia，2005，48(4):752-755.

［6］Nishikawa T，Edelstein D，Brownlee M.The missing link:a single unifying mechanism for diabetic complications［J］.Kidney Int Suppl，2000，77:S26-30.

［7］Kovesdy CP，Sharma K，Kalanter-Zadeh K.Glycemic control in diabetic CKD patients:where do we stand［J］.Am J Kidney Dis，2008，52(4):766-777.

［8］段有金，王韻顆，三輪一智，等.五種中藥對蛋白質非酶糖基化的抑制作用［J］.中國糖尿病雜志，1998，6(4):227-229.

［9］鄭虎占，董澤宏，佘靖.中藥現代研究與應用［M］.北京:學苑出版社，1998:562-573.

［10］Maurica M.Dioscoretine，The Hypoglycemic Principle of Dioscoreae dumetorun［J］.Planta Medical，1990，56(1):l19.

［11］張忠泉，陳百泉，許啟泰.山藥多糖對大鼠血糖及胰島釋放影響的研究［J］.上海中醫藥雜志，2003，37(10):52-53.

［12］王智杰，茍小林.麥冬降血糖作用的藥效學研究［J］.中醫藥學刊，2003，21(6):898-899.

［13］王丹蕊，石階平.幾種植物多糖對鏈脲菌素致糖尿病大鼠的調節作用及機理探討［J］.成都中醫藥大學學報，2003，26(3):20-22.

［14］欒海艷，歐芹，齊淑芳，等.桔?？傇碥諏?型糖尿病大鼠肝臟的保護作用［J］.黑龍江醫藥科學，2009，32(3):52.