高爾基體蛋白73定量測(cè)定對(duì)肝細(xì)胞癌的診斷價(jià)值

張紅娟，寧樹(shù)成，王 菁，張 潔，張雪麗

(1河北聯(lián)合大學(xué)，河北唐山063000;2秦皇島市第一醫(yī)院)

肝癌是一種惡性程度高、進(jìn)展快、預(yù)后差的惡性腫瘤，我國(guó)因肝癌死亡人數(shù)約占全球肝癌死亡人數(shù)的45% ～50%［1］，其中肝細(xì)胞癌(HCC)占90%以上。高爾基體蛋白73(GP73)是新發(fā)現(xiàn)的一種HCC相關(guān)蛋白，其主要分布于膽管上皮細(xì)胞中，健康肝臟細(xì)胞中含量很低，而在患有病毒性或非病毒性肝臟疾病患者的肝細(xì)胞內(nèi)表達(dá)顯著上調(diào)［2］。研究表明，GP73對(duì)診斷肝癌的敏感度和特異度均較AFP高。本研究通過(guò)檢測(cè)HCC、良性肝病、其他惡性腫瘤及健康人群的血清GP73水平，探討其在HCC診斷中的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2012年8月～2013年12月秦皇島市第一人民醫(yī)院收治的肝病患者273例，其中HCC患者145例(HCC組)，男87例、女58例，年齡31～78(50±14.5)歲，均符合《原發(fā)性肝癌診療規(guī)范(2011年版)》中的診斷標(biāo)準(zhǔn);肝炎及肝硬化患者128例(良性肝病組)，男77例、女51例，年齡31～70(48±13.5)歲。另?yè)裢谧≡旱钠渌到y(tǒng)惡性腫瘤患者87例(腫瘤對(duì)照組)，男52例、女35例，年齡34～83(57±12.3)歲，其中結(jié)直腸癌35例、食管癌13例、胃癌35例、壺腹周圍癌4例;同期健康體檢者99例(健康對(duì)照組)，男59例、女40例，年齡24～78(53±9.8)歲。各組性別、年齡具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 檢測(cè)方法 采集受試者空腹靜脈血5 mL，置于未加抗凝劑的試管中，室溫靜置1 h后，離心分離血清。使用羅氏E170電化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)及配套試劑檢測(cè)血清甲胎蛋白(AFP)，雙抗體夾心ELISA法定量檢測(cè)GP73。對(duì)HCC組行手術(shù)切除治療，于術(shù)后2周后進(jìn)行復(fù)查，比較治療前后血清GP73的變化。

1.2.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用GraphPad Prism5.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，血清GP73用中位數(shù)表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清GP73檢測(cè)結(jié)果 HCC組、良性肝病組、腫瘤對(duì)照組、健康對(duì)照組的血清GP73平均濃度分別為201、66、58、38 ng/mL，HCC 組顯著高于其他三組(P 均 ＜0.01)。

2.2 GP73與AFP檢測(cè)對(duì)HCC診斷的敏感度、特異度比較 AFP、GP73分別以400、150 ng/mL作為診斷臨界值，比較二者在HCC患者與非HCC患者中的表達(dá)。145例HCC患者中，GP73陽(yáng)性53例，AFP陽(yáng)性17例，GP73與AFP均陽(yáng)性50例，AFP陽(yáng)性或GP73陽(yáng)性120例，占82.8%;AFP陰性78例中，50例GP73陽(yáng)性，占64.1%。非HCC患者314例中，GP73陰性268例，AFP陰性252例，GP73與AFP均陰性246例，占78.3%。血清GP73診斷HCC的敏感性和特異性分別為71.0%、85.4%，AFP分別為46.2%和80.3%;二者聯(lián)合檢測(cè)的敏感性和特異性分別為82.8%和78.3%。

2.3 HCC患者治療前后血清GP73比較 HCC患者治療前后血清GP73平均濃度分別為219、78 ng/mL，治療前后比較，P＜0.05。其中24例患者因復(fù)發(fā)再次入院，入院時(shí)的血清GP73平均濃度為156 ng/mL，與其術(shù)后2周的GP73平均濃度93 ng/mL比較，P ＜0.01。

3 討論

AFP作為早期肝癌的監(jiān)測(cè)指標(biāo)，其敏感度為40% ～65%，特異度為76% ～96%，近1/3的肝癌患者AFP為陰性［3］。本研究中AFP診斷HCC的陽(yáng)性率不足50%，與文獻(xiàn)報(bào)道相符。而急性病毒性肝炎、慢性活動(dòng)性肝炎、肝硬化活動(dòng)期以及睪丸癌或卵巢癌等非肝癌疾病也常出現(xiàn)AFP升高［4］，因此AFP作為肝癌早期診斷的手段尚不夠理想，2010版美國(guó)肝病研究學(xué)會(huì)指南已不再將AFP作為篩查指標(biāo)［5］。

GP73是一種高爾基Ⅱ型跨膜蛋白，主要表達(dá)于正常組織上皮細(xì)胞中，肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞表達(dá)較少或不表達(dá)。Marrero等［6］報(bào)道，健康對(duì)照者、非HCC肝硬化患者和HCC患者血清中均有GP73表達(dá)，肝硬化和HCC患者較無(wú)肝病對(duì)照者明顯升高;在慢性肝病患者中，HCC患者的血清GP73水平顯著高于肝硬化患者。Kladney等［7，8］報(bào)道，GP73 在急性肝炎和進(jìn)行性肝硬化患者中呈高表達(dá)，認(rèn)為GP73與肝臟疾病有重要關(guān)系。其在急性及慢性肝病中的表達(dá)模式提示有兩種調(diào)節(jié)機(jī)制存在，一種在急性肝細(xì)胞損傷時(shí)觸發(fā)，另一種在慢性組織改變及纖維化發(fā)生時(shí)觸發(fā)。Block等［9］應(yīng)用糖蛋白組學(xué)技術(shù)發(fā)現(xiàn)，GP73是一個(gè)巖藻糖基化蛋白，而巖藻糖基化與HCC的發(fā)生密切相關(guān)，通過(guò)構(gòu)建土撥鼠肝癌模型顯示，GP73與肝癌密切相關(guān)，在肝癌土撥鼠血清中，GP73顯著高于非肝癌土撥鼠。

國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)GP73的臨床應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行了大量研究。Witjes等［10］的一項(xiàng)薈萃研究顯示，GP73是一種新的肝癌血清標(biāo)志物，其價(jià)值優(yōu)于AFP，可用于肝癌診斷和篩查。湯紹輝等［11］的薈萃分析納入HCC患者2 075例，非HCC患者3 204例，結(jié)果顯示GP73和AFP的匯總敏感度分別為78%和55%，匯總特異度分別為84%和80%，表明血清GP73對(duì)HCC有較高的診斷價(jià)值，可作為替代血清AFP的重要參考指標(biāo)。

本研究顯示，HCC組的血清GP73含量明顯高于肝良性病變組、腫瘤對(duì)照組和健康對(duì)照組，表明GP73能夠很好地鑒別HCC。單項(xiàng)檢測(cè)血清GP73的敏感性和特異性分別為71.0%和85.4%，均優(yōu)于AFP，提示其可作為肝癌診斷的獨(dú)立指標(biāo)之一。同時(shí)GP73和AFP聯(lián)合檢測(cè)的敏感性和特異性分別為82.8%和78.3%，進(jìn)一步提高了HCC的診斷效能。此外，HCC治療前的血清GP73水平顯著高于治療后，肝癌復(fù)發(fā)患者的血清GP73水平明顯升高，提示GP73可作為輔助監(jiān)測(cè)肝癌療效和復(fù)發(fā)的指標(biāo)。

綜上所述，GP73對(duì)HCC有較好的診斷性能，有望成為HCC診斷的有效標(biāo)志物。鑒于目前AFP仍然作為一項(xiàng)應(yīng)用最廣泛的腫瘤標(biāo)志物，難以在短時(shí)間內(nèi)完全替代，GP73可成為AFP的有效補(bǔ)充，二者聯(lián)合檢測(cè)可提高HCC的早期診斷率。

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