探討常規(guī)微生物學(xué)檢驗(yàn)方法中影響念珠菌檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的因素

景曉敏

探討常規(guī)微生物學(xué)檢驗(yàn)方法中影響念珠菌檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的因素

景曉敏

目的 探討在念珠菌的常規(guī)生物學(xué)檢驗(yàn)中影響其檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的相關(guān)因素。方法 采用常規(guī)方法分離培養(yǎng)鑒定 16 株念珠菌 , 對(duì)其中 8 株進(jìn)行 DNA 序列分析以確定其分子型別。結(jié)果 為達(dá)到準(zhǔn)確鑒定結(jié)果 , ATB 儀器鑒定時(shí)應(yīng)將板條防御 28 e 進(jìn)行 24 h 孵育。結(jié)論 培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度以及穩(wěn)定的時(shí)間控制是保證念珠菌檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的最主要因素。

微生物檢驗(yàn)；念珠菌；準(zhǔn)確性；影響因素

隨著抗生素以及各種激素和免疫抑制劑的過度使用 , 我國居民真菌感染呈現(xiàn)上升趨勢。念珠菌感染是其中最為重要的一種 , 可表現(xiàn)明顯的細(xì)菌感染癥狀 , 在早產(chǎn)、燒傷和器官移植及白血病等患者標(biāo)本中都可檢測到念珠菌［1］。由于相關(guān)規(guī)范的缺失和技術(shù)的落后 , 我國醫(yī)療單位仍采用顯色平板分離對(duì)念珠菌進(jìn)行鑒定 , 受到多種因素的影響［2］。本文對(duì)念珠菌檢驗(yàn)中準(zhǔn)確性的影響因素進(jìn)行探討 , 報(bào)告如下。

1 材料與方法

1. 1 材料 本文所用 16 株念珠菌來自于患者陰道分泌物、痰液、尿液和糞樣等標(biāo)本 , 還包括 3 株標(biāo)準(zhǔn)菌株。所用材料主要包括科瑪嘉顯色平板、培養(yǎng)基、ATB鑒定儀、DADE鑒定儀以及快速酵母菌鑒定板等。

1. 2 方法及觀察指標(biāo) 根據(jù)產(chǎn)品要求以及相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)配置念珠菌培養(yǎng)基。于穩(wěn)定時(shí)間和最適溫度對(duì)所選念珠菌進(jìn)行 2 d的培養(yǎng)基培養(yǎng) , 并對(duì)其生長狀況進(jìn)行觀察和記錄。其次 , 采用ATB 系統(tǒng)對(duì)所用念珠菌進(jìn)行鑒定 , 觀察其于培養(yǎng)基中 1～3 d 的生長情況 , 于 ATB 儀器上判讀其鑒定結(jié)果。

2 結(jié)果

16 株念珠菌進(jìn)行分離培養(yǎng)后結(jié)果顯示 , 培養(yǎng) 48 h 的念珠菌生長態(tài)勢顯著優(yōu)于培養(yǎng) 24 h 的 , 且 35 e 的念珠菌生長情況優(yōu)于 28 e 的念珠菌。使用不同質(zhì)量和型號(hào)培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)的念珠菌顯色結(jié)果也不盡相同。對(duì)念珠菌采用 ATB系統(tǒng)鑒定后結(jié)果顯示 , 念珠菌的顯色效果與培養(yǎng)基指示劑、培養(yǎng)時(shí)間和培養(yǎng)溫度等因素密切相關(guān)。為保證菌種鑒定的穩(wěn)定性應(yīng)保證培養(yǎng)時(shí)間、溫度和培養(yǎng)基的相同。與 ATB 系統(tǒng)鑒定結(jié)果相比 , 快速酵母菌鑒定板鑒定結(jié)果與其大致相同。該 16株念珠菌進(jìn)行分子分型后結(jié)果顯示 , 僅 1 株不適合自動(dòng)化儀器鑒定。

3 討論

念珠菌作為一種常見真菌 , 是人體正常菌群的一種 , 在人體中主要存在于皮膚、陰道、腸道和口腔等 , 可與外界環(huán)境相通腔道。當(dāng)人體正常菌群發(fā)生紊亂 , 抵抗力和免疫力下降時(shí) , 念珠菌可于定植部位大量增殖 , 入侵人體腔道 , 引發(fā)念珠菌感染。常見的念珠菌感染主要包括肺部炎癥、眼部感染、傳染性口角炎以及外陰陰道炎和真菌血癥等［3］。

臨床上對(duì)念珠菌感染進(jìn)行診斷時(shí)主要依靠實(shí)驗(yàn)室微生物學(xué)技術(shù)分離鑒定患者標(biāo)本中的念珠菌。顯色培養(yǎng)基分離鑒定和沙保弱培養(yǎng)基分離培養(yǎng)是最為常規(guī)的念珠菌鑒定方法。但是在我國對(duì)于念珠菌的臨床檢驗(yàn)尚無標(biāo)準(zhǔn)檢測手段和規(guī)范 ,其分離培養(yǎng)和鑒定等環(huán)節(jié)存在多種不可控因素 , 導(dǎo)致檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性受到影響［4］。

為探討在常規(guī)微生物學(xué)檢驗(yàn)方法中影響念珠菌檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的因素 , 在本文中選取從患者標(biāo)本中分離的念珠菌 16株進(jìn)行分離培養(yǎng)和鑒定 , 發(fā)現(xiàn)較高的孵育溫度和較長的培養(yǎng)時(shí)間是念珠菌更好生長態(tài)勢的最主要因素。大多數(shù)菌株通過科瑪嘉顯色培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)鑒定時(shí) , 可于 24 h 左右顯色。雖然白色念珠菌可通過綠色菌落判斷 , 但一些念珠菌可由多種指示顏色 , 因而需要結(jié)合細(xì)胞形態(tài)和菌落特征進(jìn)行判斷 , 一些不顯色的菌落需根據(jù)鏡檢結(jié)果進(jìn)行鑒定。本文中發(fā)現(xiàn)快速酵母菌檢驗(yàn)可在較短時(shí)間內(nèi)滿足檢驗(yàn)需要 , 其結(jié)果與需 24 h的 ATB 鑒定系統(tǒng)相似。

綜上所述 , 在念珠菌的鑒定中 , 培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)溫度以及培養(yǎng)基和指示劑的選用都可影響念珠菌于培養(yǎng)基中的顯色效果 , 從而影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。在念珠菌感染發(fā)生率的不斷增高和相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)欠缺的態(tài)勢下 , 加強(qiáng)對(duì)念珠菌檢驗(yàn)技術(shù)的研究仍是一個(gè)重要的課題。

［1］盧麗 , 齊亞娟 . 探討常規(guī)微生物學(xué)檢驗(yàn)方法中影響念珠菌檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的因素 .中國保健營養(yǎng) , 2013,02(下 ):997-998.

［2］劉學(xué)杰 , 婁崢 , 陳悅 . 影響念珠茵檢驗(yàn)結(jié)果因素的探討 .檢驗(yàn)醫(yī)學(xué) , 2009,24(1):17-20.

［3］馬嵐云 , 代世娥 , 何鑫 , 等 .影響微生物檢驗(yàn)結(jié)果的因素 .中國社區(qū)醫(yī)師 , 2011(21):227.

［4］楊柳 , 郭清蓮 , 申及 , 等 . 回顧性分析比較不同臨床標(biāo)本微生物檢驗(yàn)的陽性率 .國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志 , 2011, 32(14):1573-1574.

2014-05-28］

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