3-甲基腺嘌呤誘發HeLa細胞自噬及抑制輻照細胞自噬的雙重作用

楊艷麗 劉 玲 王 豫 劉曉丹 周平坤

自噬是指細胞將一些聚集或錯誤折疊蛋白、損傷的細胞器等胞質成分通過包裹并最終運送至溶酶體降解的過程，可促進細胞代謝的原料的循環再利用［1］。目前認為，自噬的主要功能之一是真核細胞在營養缺乏、生長因子撤除、能量匱乏或受到應激性的死亡威脅時，使細胞獲得對抗不利的生長環境、維持穩態、實現更新的一種重要的自我保護性反應機制［2］。但是，當細胞受到嚴重的不可修復的損傷，如大劑量的電離輻射輻照、某些化療藥物的作用，自噬就會轉變成為細胞的一種死亡機制。正是由于自噬在決定細胞命運中具有雙面性，有關其調控機制的研究受到極大關注。

生長因子刺激信號通過激活磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K)/Akt/mTOR信號途徑抑制自噬，而Ⅲ型磷脂酰肌醇3-激酶復合物(PI3KC3/Vps34)是啟動細胞自噬的一個關鍵調控復合體，PI3KC3/Vps34被激活后會產生磷脂酰肌醇3-磷酸(phosphatidylinositol 3-phosphate，PIP)，PIP則促進其他自噬相關蛋白家族成員(autophagy related protein family，Atg)的募集，啟動自噬過程［3，4］。3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine，3-MA)是一種磷脂酰肌醇3激酶抑制劑，因其能抑制參與自噬調節的Ⅲ型PI3K的活性，而被廣泛用于自噬研究［6］。筆者前期的實驗也證實，3-MA可以抑制饑餓誘導的細胞自噬，并增加細胞的放射敏感度。本研究發現，3-MA單獨作用也能誘導細胞自噬和促進細胞凋亡。因此，進一步對3-MA在輻射誘導的細胞自噬及凋亡中的作用進行探討，將為今后3-MA合理使用以及放射誘發自噬機制的闡述提供新的依據。

材料與方法

1．細胞培養和試劑:人子宮頸癌細胞HeLa為本實驗室留存。……