虞 琳 朱麗君 張怡靜 葉樂平
支氣管哮喘(以下簡稱哮喘,asthma)是一種伴有細胞因子產生異常及氣道內變態反應性炎癥發生的免疫失衡性疾病,即Th1/Th2失衡[1]。多種信號轉導通路參與哮喘的發病機制,其中白介素13(IL-13)激活的 Janus激酶(janus kinases,JAK)/信號轉導及轉錄激活因子(signal transduction and activator of transcription,STAT)通路是哮喘發病機制中的重要通路之一,在促進哮喘炎癥、黏液高分泌中發揮重要作用,也是目前的研究熱點[2]。麻杏石甘湯(maxingshigan decoction,MGD)出自我國國粹《傷寒論》,因其有辛涼宣肺、止咳平喘之功,在歷史上應用已久。現代藥理學研究表明其不僅有鎮咳、祛痰、平喘、解熱的功效,還能抗炎、抗過敏、抗病原微生物以及改善血液循環。但其在哮喘治療中的具體機制仍未明確,為其臨床應用帶來一定的局限性。因此,本研究擬通過建立哮喘大鼠模型,研究IL-13、STAT6、黏蛋白表達,來探討麻杏石甘湯抑制氣道炎癥、減少黏液分泌的可能機制。
1.藥物及試劑:卵清白蛋白(ovalbumini,OVA)、焦磷酸二乙酯(diethypyrocarbonate,DEPC)購自美國 Sigma公司,大鼠IL-12、IL-13 ELISA試劑盒來自美國R&D公司,STAT6兔抗大鼠多克隆抗體購自美國Abcam公司(Lot#GR52323-3),二步法免疫組化檢測試劑、DAB顯色試劑盒、蘇木素染液均購自北京中衫金橋,AB-PAS染色試劑盒購自上海源葉生物科技有限公司,其余試劑為市售分析純試劑。
2.MGD 的制備:麻黃6g、杏仁6g、甘草5g、石膏 20g(購自溫州醫科大學附屬第二醫院),MGD的煎制參照中華人民共和國國家衛生和計劃生育委員會國家中醫藥管理局發布的《醫療機構中藥煎藥室管理規范》。煮石膏20min,將雙蒸水浸泡0.5h后的麻黃、杏仁、甘草放入同煎15min,取第1道汁后再加入雙倍雙蒸水,煎15min,取汁,混合第1、2道汁,濃縮至相應體積。……