乳腺癌組織及血清MICA表達特點

張曉燕 周 斌

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一。2011年美國《Chemical Abstracts》雜志公布的最新統計數據顯示，僅2011年美國就將有20萬以上的女性罹患乳腺癌，其發生率已占據婦科腫瘤的31%［1］。近年來主要組織相容性復合體Ⅰ類相關基因A(MICA)越來越吸引研究者興趣。腫瘤細胞表面表達NK細胞的活化型受體(NKG2D)的配體MICA蛋白，激活NK細胞和CD8+T細胞的細胞毒作用，殺滅腫瘤細胞。隨著腫瘤進展，組織細胞的MICA從腫瘤細胞表面脫落到癌細胞周圍的間質組織及血液中，成為可溶性MICA，下調NK細胞對抗腫瘤細胞的作用，可能是腫瘤免疫逃逸的機制［2，3］。本研究通過檢測乳腺癌組織及血清中MICA表達水平，探討其與乳腺癌進展相關臨床參數的相關性，為臨床診斷提供新的參考，為進一步以MICA為靶點進行乳腺癌免疫治療提供基礎。

材料與方法

1．實驗對象:收集具有明確病理和影像學診斷的乳腺癌患者組織32例，按照1972年國際抗癌協會修訂的乳腺癌臨床分期法分期，其中Ⅰ期+Ⅱ期15例，Ⅲ期+Ⅳ期18例;同時收集血清56例，患者年齡25～69歲，平均年齡43．5歲;乳腺良性疾病組69例，包括乳腺纖維瘤，乳腺小葉增生等其他乳腺疾病患者，年齡23～67歲，平均年齡45．2歲;筆者醫院女性健康體檢者75例為正常對照組，年齡21～65歲，平均年齡 41．6 歲。

2．RT-PCR檢測:MICA液氮研磨約1g組織標本，Trizol試劑提取總RNA，按照反轉錄試劑盒說明書，將總RNA反轉錄成cDNA后，進行MICA的PCR反應，引物序列為上游:5'-CTGTGCCATACCAGTTAA-3'，下 游:5'-ATCAAGGACCAGAAAGAAGG-3'，產物片段長439bp;PCR反應條件:94℃ 2min，94℃ 30s，54℃ 30s，72℃ 45s，循環 35 次，72℃ 延伸5min，4℃保存;PCR產物上樣于1．5%瓊脂糖凝膠上進行電泳檢測，凝膠成像系統分析，以MICA和β-actin電泳帶的熒光強度灰度值的比值表示其mRNA的相對表達量?！?br>