類風濕性關節炎患者血清超氧化物歧化酶和血管性血友病因子水平變化及意義

劉 蓮，蔣紅梅，費 櫻，胡昌維

類風濕性關節炎(rheumatoid arthritis，RA)，是一種臨床上常見的全身性自身免疫性疾病，主要表現為對稱性的、涉及多個關節的、慢性的關節疾病和滑膜關節炎，其基本病理改變是關節滑膜炎癥和血管翳的形成[1]，但其具體發病機制現仍尚未完全明確[2]。在我國RA患者較多，發病率為0.32%～0.36%[3-4]。黃健等[5]研究表明，超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)是機體清除含氧自由基的主要酶系之一，其活力反映機體清除氧自由基的能力。多數RA患者病變過程中在關節腔內出現一種特征性的病理產物-血管翳，從而引起血管內皮損傷。血管內皮細胞損傷時，會釋放其獨特內容物-血管性血友病因子(von willebrand factor，vWF)，其血清濃度升高可視為內皮細胞損傷的標志[6]，C反應蛋白(CRP)、血清類風濕因子(RF)是臨床常用的判斷RA疾病活動與否的重要指標[7]。本研究旨在探討RA患者血清SOD與vWF的水平變化，并結合RF和CRP進行分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年10月—2013年2月貴陽醫學院附屬醫院門診和住院病房確診為RA的患者55例作為RA組，其中男17例，女38例；年齡24～76歲，平均(51.3±14.0)歲。患者均符合2009年美國風濕病學會(ACR)和歐洲抗風濕聯盟(EULAR)共同發布的RA分類標準[8]。另選取同期在本院體檢健康者30例作為對照組，其中男10例，女20例；年齡23～71歲，平均(49.1±13.7)歲。兩組受試者性別、年齡比較，差異無統計學意義(χ2=0.053，t=0.698，P>0.05)。

1.2 主要試劑和儀器 SOD檢測試劑盒，由上海裕平生物科技有限公司提供；vWF檢測試劑盒，由上海裕平生物科技有限公司提供；RF檢測試劑盒，由美國貝克曼庫爾特商貿(中國)有限公司提供；CRP檢測試劑盒，由上海科華生物工程股份有限公司提供；BIO-RAD XMark全波長酶標儀，由上海創萌生物科技有限公司提供；臺式低速離心機，由上海醫療器械廠提供。

1.3 方法 于清晨空腹、安靜狀態下，采集兩組受試者靜脈血5 ml，以3 000 r/min離心5 min，離心半徑為10 cm，置于-20 ℃冰箱中保存。血清RF檢測采用免疫散射比濁法，CRP檢測采用免疫速率散射比濁法，血清SOD和vWF檢測均采用生物素雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)，均嚴格按照試劑盒說明書操作。

2 結果

2.1 兩組血清SOD和vWF比較 對照組血清SOD高于RA組，vWF低于RA組，差異均有統計學意義(P<0.05，見表1)。

Table1 Comparison of serum SOD and vWF between the two groups

組別例數SOD(μg/L)vWF(ng/L)對照組30169.8±53.1691.4±246.4RA組55129.6±27.61134.1±490.7t值3.8685.532P值<0.05<0.05

注：SOD=超氧化物歧化酶，vWF=血管性血友病因子

2.2 RA組血清RF和CRP檢測結果 RA組患者中RF陽性42例(76.4%)，陰性13例(23.6%)；CRP陽性32例(58.2%)，陰性23例(41.8%)。

2.3 RF陽性與陰性者血清SOD和vWF比較 RF陽性與陰性者血清SOD和vWF比較，差異均無統計學意義(P>0.05，見表2)。

Table2 Comparison of serum SOD and vWF between the RF positive and RF negative RA patients

例數SOD(μg/L)vWF(ng/L)RF陽性42126.0±28.31179.4±518.1RF陰性13134.4±14.1987.8±368.9t值1.4291.475P值>0.05>0.05

注：RF=血清類風濕因子

2.4 CRP陽性與陰性者血清SOD和vWF比較 CRP陽性與陰性者血清SOD比較，差異無統計學意義(P>0.05)；CRP陽性者血清vWF高于CRP陰性者，差異有統計學意義(P<0.05，見表3)。

2.5 相關性分析 RA患者血清SOD與vWF、RF、CRP均無直線相關關系(r=0.090、-0.072、-0.032，P>0.05)；血清vWF與SOD、RF均無直線相關關系(r=-0.064、0.040，P>0.05)，與CRP呈正相關(r=0.529，P<0.05)。

Table3 Comparison of serum SOD and vWF between the CRP positive and CRP negative RA patients

例數SOD(μg/L)vWF(ng/L)CRP陽性32128.2±22.71288.3±500.6CRP陰性23131.6±29.9934.9±406.2t值0.0802.961P值>0.05<0.05

3 討論

RA是一種常見的系統性、慢性自身免疫性疾病，通常以滑膜炎癥、血管翳形成及關節損傷為主要病理特征，其病因至今尚不完全清楚。孔慶勝等[9]研究顯示，RA患者的發病機制與氧化應激密切相關。正常生理情況下，體內存在有效的抗氧化防御體系，使氧化物質的產生與清除保持動態平衡[10]，一旦平衡被打破，就會使細胞內蓄積氧化性物質而引發氧化反應[11]。SOD是一種抗氧化類物質，可清除人體內含氧自由基，其活性高低反映機體清除自由基能力的強弱，是機體清除氧自由基、發揮抗氧化作用及自由基破壞的敏感指標[12]。本研究結果顯示，與對照組相比，RA組血清SOD降低，與陳晗等[13]研究結果相符，提示RA患者體內抗氧化能力減弱。氧化應激可以促進活性氧簇和活性氮簇的產生，其可作為信使分子參與調節基因表達等生理病理過程，進而促進對內皮細胞的損傷[14]。內皮受損可釋放大量的活性物質，如vWF、一氧化氮(NO)、內皮素1(ET-1)等，其中vWF是反映血管內皮受損的重要指標[7]。vWF主要由血管內皮細胞合成，具有內皮特異性及良好穩定性，因此其變化可反映內皮細胞損傷、異常活化或功能障礙[15]。王艷嬌等[16]研究結果顯示，當血管內皮損傷時，vWF合成釋放增多。本研究結果顯示，RA組血清vWF高于對照組，提示RA在發生發展過程中可能存在血管內皮損傷。

CRP、RF是臨床常用的判斷RA疾病活動與否的重要指標，RF在RA患者中的檢出率很高，RF陽性支持早期RA的傾向性診斷。Rojas-Villarraga等[17]報道，無論任何時期發病的RA患者均發現有內皮功能紊亂，并且其證明血清RF陽性與內皮功能紊亂有明顯的關系。本研究結果顯示，RF陽性與陰性RA患者相比，血清vWF、SOD無差異，可能與RF陰性樣本量過少有關，可進一步增大樣本量進行探究。CRP是一種急性時相反應蛋白，其在炎癥開始數小時即可升高，能較好地反映RA疾病活動與否。CRP陽性與陰性RA患者相比，血清SOD間無差異，而vWF顯著升高。且RA患者血清SOD與vWF、RF、CRP及 vWF與SOD、RF均無直線相關關系，僅vWF與CRP呈正相關，與王昌富等[18]研究相符，提示vWF水平與病情的急性期反應有關。

蘇敏等[7]研究發現，RA患者均存在血管內皮功能失調，與機體氧化應激水平有關，氧化應激水平升高，活性氧在體內蓄積，可直接由于內皮細胞毒性作用造成血管內皮功能障礙并啟動動脈粥樣硬化進程。同時，活化的內皮細胞也產生大量活性氧，加重氧化應激狀態，最終導致內皮損傷和內皮障礙[19]。綜上所述，RA患者體內抗氧化能力減弱，且可能存在血管內皮損傷。而RA患者氧化應激反應、血管內皮功能及二者之間的關系，仍需在本研究基礎上結合RA患者的病情、病程、并發癥及臨床治療方案等因素，擴大樣本量、增加檢測指標作進一步研究。

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