Beckman-Coulter LH750在體液常規中的應用評估

郭學霖 張瑞敏 楊勇

Beckman-Coulter LH750在體液常規中的應用評估

郭學霖 張瑞敏 楊勇

目的評價Beckman-Coulter LH750在體液常規計數中的應用。方法用LH750的體液模式測定腦脊液和胸腹水中的有核細胞和紅細胞, 通過批內精密度、攜帶污染率、線性等指標進行評價, 從隨機選擇的130例標本中選擇符合要求的標本對有核細胞和紅細胞進行儀器和顯微鏡手工法計數比對。結果LH750在檢測腦脊液和胸腹水中的有何細胞核紅細胞具有良好的重復性和線性, 攜帶污染率低, 與手工法計數結果比對相關性良好。結論Beckman-Coulter LH750體液模式對于體液常規細胞計數, 特別是細胞數量較多時,與顯微鏡計數有較好的符合性, 精密度高, 攜帶污染率低, 使用方便快速, 在體液細胞計數中確實存在一定的優越性。

體液模式；腦脊液；胸腹水；血細胞分析儀

目前, 腦脊液和胸腹水常規檢查計數多采用顯微鏡手工計數法, 操作過程繁瑣耗時, 特別是細胞數量較多時結果準確性、重復性受到個人因素影響較大,而結果的準確性對于臨床的診斷鑒別診斷起到重要作用。Beckman-Coulter LH750提供了專門的體液模式用于體液細胞的計數, 本文就LH750體液模式對體液常規計數能力進行評價。

1 材料與方法

1. 1標本來源 隨機選取武漢協和醫院住院患者130例體液標本(EDTA-K2抗凝), 腦脊液50例, 胸水36例, 腹水44例。

1. 2儀器和試劑

1. 2. 1儀器 Coulter LH750；奧林巴斯光學顯微鏡；改良牛鮑血細胞計數板。

1. 2. 2試劑 LH750原裝配套試劑及質控；等滲生理鹽水。

1. 3方法

1. 3. 1計數 在2 h內進行儀器計數及顯微鏡計數。儀器每日完成質控, 保證儀器狀態良好, 選擇體液模式, 手工顛倒10次混勻標本, 手工進樣(大約200 μl)進行計數。顯微鏡手工計數由兩名有經驗的檢驗師按盲法, 嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程 》(第3版)操作［1］, 計數結果取均值 。渾濁或者帶血標本用等滲鹽水稀釋后進行計數。

1. 3. 2計數結果評價 批內精密度測定：選取高、中、低三個WBC水平標本, 對每一份標本計數11次來評定精確性, 每一個標本的第一個分析都會被丟棄。

攜帶污染率：進行三個連續的高體液計數(H1-H3), 隨后立即進行三個連續的低體液計數(L1-L3)的來評定由高至低的攜帶污染。攜帶污染被評定為

［(L1-L3)/(H3-L3)］×100%

線性：選取高值標本(有核細胞3500/ul, 紅細胞13000/ul)稀釋比率為1:2～1:32, 以稀釋計算值為理論值與儀器結果做回歸分析, 求線性方程。

2 結果

批內精密度：見表1。

攜帶污染率：見表2。

線性：有核細胞及紅細胞在儀器WBC與RBC線性范圍內稀釋結果與理論值呈線性關系, 見表3。

比對：120例標本中, 去除有干擾信息的標本, 62例WBC>0.20×103細胞/μl, 33例RBC>10×103細胞/μl, 用于兩種方法的相關性比較, 結果見表4, 表5。

表1 有核細胞、紅細胞批內精密度結果

表2 攜帶污染率

表3 稀釋線性結果

表4 LH 750有核細胞計數與手工法相關性比較

表5 LH750紅細胞計數與手工法相關性比較

3 討論

現在腦脊液和胸腹水常規細胞計數均采用顯微鏡手工的方法進行計數, 存在操作耗時, 報告結果速度較慢, 細胞數較多時, 勞動強度較大, 不同的檢驗人員之間結果重復性差等問題。因此, 近些年, 大家都在探討以尿沉渣分析儀及血細胞計數儀代替手工計數的可行性［2,3］。

Beckman-Coulter LH750對細胞的計數采用經典的庫爾特技術, 加上計算機軟件的技術更新, 結合了的智能微數技術(AccuCount), 及智能動力系統等先進的技術, 專門增設了對體液測定的體液模式, 無需專門的試劑可得到有核細胞和紅細胞兩個參數。本文結果該儀器有核細胞和紅細胞檢測重復性好。攜帶污染率低, 有核細胞和紅細胞攜帶污染率分別為1.5%和0.4%,在儀器允許的2.0%和0.8的范圍內。有核細胞和紅細胞濃度在0～100×103個/μl 和0～8×106個/μl有良好的相關性, 此范圍較大, 完全能滿足臨床的需求。與手工計數相比較, 有核細胞和紅細胞計數在腦脊液與胸腹水都有較好的相關性。

綜上, Beckman-Coulter LH75體液模式在腦脊液與胸腹水常規計數中精密度, 攜帶污染率, 線性良好,與手工計數法有較好的相關性。在細胞數量較少時,變異系數稍大, 儀器要求有核細胞>0.20×103細胞/μl, RBC>10×103細胞/μl, 故細胞較少時建議手工進行計數。細胞數較大時, 結果可靠, 能夠代替手工計數。此外, 對儀器計數有細胞干擾的不能用儀器測定, 主要的細胞干擾產生有：標本中的小凝塊, 細胞碎片；所以標本必須經抗凝處理, 而且需要及時測定, 最好在2 h內完成檢驗［4］。因此, Beckman-Coulter LH750體液模式對于體液常規細胞計數, 特別是細胞數量較多時, 與顯微鏡計數有較好的復合型, 并且能夠有效的提高結果的重復性, 大大縮短檢驗時間, 而且該儀器較低的試劑成本, 表明其在體液細胞計數中確實存在一定的優越性。

［1］ 葉應嫵, 王毓三, 申子瑜. 全國臨床檢驗操作規程. 第3版. 南京：東南大學出版社, 2006: 312-317.

［2］ 陸鳳燕, 朱雪明, 潘揚, 等. iQ200全自動尿沉渣分析儀在體液檢測中的應用評價. 醫療衛生裝備, 2011(4): 42-44.

［3］ 何銀華, 顏宇飛, 蔡崢, 等. Sysmex XE-2100全自動血液分析儀計數胸腹水有核細胞的評價. 檢驗醫學, 2011(4):228-230.

［4］ Barnes pw, Eby CS, Shimer G. An evaluation of the utility of performing body fluid counts on the coulter LH 750 Lab hematol, 2004,10(3):127-131.

R446.11

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1674-9316(2014)01-0015-03

10.3969/J.ISSN.1674-9316.2014.01.010

675000 楚雄醫藥高等?？茖W校檢驗系(郭學霖)；武漢, 華中科技大學附屬協和醫院檢驗科(張瑞敏 楊勇)