鹽酸乙胺丁醇的測定及其抗結核作用

蘆紅

錦州市傳染病醫院藥劑科，遼寧錦州121017

鹽酸乙胺丁醇的測定及其抗結核作用

蘆紅

錦州市傳染病醫院藥劑科，遼寧錦州121017

結核病是一種全球性的疾病，嚴重危害公眾的身心健康，全球每年由于結核病而死亡的人數有幾百萬。鹽酸乙胺丁醇是一種合成一線抗結核藥物，高效液相色譜法是常用于檢測其含量的一種方法，快速、簡便。但是由于其不能用紫外檢測，一直是一個難題。有許多學者用其他方法進行了檢測，且除了高效液相色譜還有一些其他的檢測方法。鹽酸乙胺丁醇主要是一種抑菌藥物，必須與其他藥物聯合使用，長期使用會造成視神經損害。耐藥性也是難以克服的一個問題。

鹽酸乙胺丁醇；高效液相色譜；抗結核

結核病是一種危害全球公眾健康的疾病，發病率高，死亡率高。世界衛生組織在全球結核控制中發現，2005年患病人數近九百萬。結核病是由于結核桿菌感染導致的，大多數發生在肺部，臨床表現呈現慢性，常表現為午后低熱、全身乏力、咳嗽咳血等。鹽酸乙胺丁醇是一種常用一線抗結核藥物，常與其他類藥物聯合使用。高效液相色譜是一種常用于檢測其含量的方法，有許多學者將其與其他方法聯合應用，可以快速、簡便地檢測其含量。鹽酸乙胺丁醇的滲透性好，能進入結核桿菌內，抑制其DNA和RNA合成，從而抑制細菌繁殖，發揮其抗結核作用。但鹽酸乙胺丁醇的使用會產生不良反應，比如視力模糊、關節腫痛、發熱或過敏反應等，且抗結核藥物面臨一個很大的難題，就是耐藥性的產生。現從鹽酸乙胺丁醇的測定、鹽酸乙胺丁醇的抗結核作用兩個方面對鹽酸乙胺丁醇的測定及其抗結核作用進行了論述，在此基礎上闡述了目前鹽酸乙胺丁醇相關研究的不足并對未來的發展方向進行了展望。

1 鹽酸乙胺丁醇的測定

色譜法根據流動相的狀態可分為氣相色譜法和液相色譜法。在液相色譜中，采用顆粒十分細的高效固定相并采用高壓泵輸送流動相，全部工作通過儀器來完成，這種色譜稱為高效液相色譜（high performance liquid chromatography，HPLC）[1]。高效液相色譜在藥物分析中已經廣泛應用[2]。

高效液相色譜是一種快速、簡便的方法，許多學者都運用這種方法來測定鹽酸乙胺丁醇[3]。由于鹽酸乙胺丁醇沒有紫外吸收官能團，不能通過常規的高效液相色譜-紫外檢測法來進行測定。因此，很多學者建立了其他的方法來進行檢測。有學者建立了高效液相色譜-電霧式檢測器法測定鹽酸乙胺丁醇片中鹽酸乙胺丁醇的含量，色譜柱為Hedera ODS-2C18色譜柱，流動相為15 mmol/L醋酸銨溶液-甲醇（80:20），電霧檢測條件為氣壓35 psi，量程100 pA。檢測到平均回收率＞99.84%，并且流動相的堿性逐漸增強時，鹽酸乙胺丁醇的峰形也會標的尖銳和狹窄。而pH＞7.5時，色譜圖的基線則不太穩定。還有人建立了高效液相色譜-蒸發光散射檢測器法來測定鹽酸乙胺丁醇片的含量及溶出度，采用Kromasil C18色譜柱，流動相為乙腈-水（50:50），蒸發光散射檢測器條件為：撞擊器條件狀態：關，漂移管溫度：105℃，載氣流速：2.6 L/min。最后平均回收率為99.4%。類似地，湯興球、王伍承[4]也同樣建立了高效液相色譜-蒸發光散射檢測器法來測定復方制劑中鹽酸乙胺丁醇的含量，檢測條件與上述大致相同，只是漂移管溫度為50℃，這也印證了該研究提及的蒸發光散射檢測器的漂移管溫度對基線水平沒有明顯影響。反相高效液相色譜法也可以測定鹽酸乙胺丁醇片的含量。還有柱前衍生化高效液相色譜法，但是不如柱后衍生化常用，國內比較少用，該方法也可以成功測定復方制劑中的鹽酸乙胺丁醇的含量和溶出度。

除了高效液相色譜國內還有許多其他方法來測定鹽酸乙胺丁醇，比如比色、旋光、氣相色譜等。比如有人不用中國藥典中的醋酸汞試液的非水滴定法，而采用電位突躍指示拐點的中和滴定法，稱取適量鹽酸乙胺丁醇，加入乙醇和鹽酸，稀釋、搖勻、濾過，再用氫氧化鈉滴定，這個方法就是避免了醋酸汞試液的使用，比較環保。陳小利等[5]使用了反向流動注射化學發光法，主要是依據鹽酸乙胺丁醇與高碘酸鉀-魯米諾反應產生很強的化學發光，結合反向流動注射技術而建立的新方法，靈敏度高,線性范圍寬。邱涵等[6]用氣相色譜法測定鹽也獲得了不錯的效果。

綜上所述，高效液相色譜是一種最常用，并且簡便、快速的檢測方法。雖然鹽酸乙胺丁醇不能通過紫外檢測，但是可以通過各種其他方法如電霧式檢測、蒸發光散射檢測等，也有其他如氣相色譜等檢測方法。對國內部分文獻中鹽酸乙胺丁醇的測定方法和高效液相色譜的測量條件進行總結，見下表1、2。

從表1中可以得出，在國內關于鹽酸乙胺丁醇測量的18篇文獻中，高效液相色譜是鹽酸乙胺丁醇最常見的一種測定方法，占了66.4%，主要是因為其操作步驟簡便，可以迅速得到結果。而其他一些測量方法也有學者使用，只是并不是特別普及，例如柱前衍生化高效液相色譜法，雖然也是高效液相色譜的衍生的方法，但是其操作復雜，國內極少有人使用。

從表2可以看得出，根據不同的儀器來選擇不同的色譜條件，但是大致條件還是差不多。用高效液相色譜法的回收率都比較高，最低也有97.8%。在使用高效液相色譜法時，不同的過濾方法也會對檢測結果造成很大偏差，無水硫酸鈉吸附的效果比濾紙吸附的測定結果要好。但是高效液相仍然是最常用的一種檢測方法，而且精密度好，重復性高，準確性好，值得在藥物分析檢測上應用。

表1 鹽酸乙胺丁醇的測定方法總結

表2 高效液相色譜測定鹽酸乙胺丁醇的條件總結

2 鹽酸乙胺丁醇的抗結核作用

常用的抗結核的藥物主要有4類：異煙肼、利福平、乙胺丁醇、鏈霉素，且用藥須遵循早期、聯合、適量、規律、全程的原則。鹽酸乙胺丁醇是其中一種，其作用機制目前尚不明確，可能是針對細胞壁阿拉伯半乳聚糖（AG）的聚合過程，繼之抑制阿拉伯甘露聚糖（LAM）的合成，影響細胞壁的形成。鹽酸乙胺丁醇主要是一種抑菌藥物，不能單獨用于結核病，必須和其他藥物聯合使用。鹽酸乙胺丁醇的不良反應比較少，發生率為4.6%左右，而吡嗪酰胺可以達到53.9%，利福平可以達到49%[7]。鹽酸乙胺丁醇最常見的不良反應就是視神經損害，發生率約為0.8%。乙胺丁醇與乙硫異煙胺合用可增加不良反應，與氫氧化鋁同用能減少吸收，與神經毒性藥物合用可增加本品神經毒性。還會產生腎毒性，表現為蛋白尿、尿素氮升高。鹽酸乙胺丁醇單獨使用時較少發生肝損害，而其通常與其他藥物如異煙肼、利福平聯合使用，肝毒性的發生幾率就大大增加，且通常是導致死亡的重要原因。

抗結核藥物還有一個難題，就是耐藥性的產生[8]。江蘇省社區人群在949株結核分枝桿菌中，643株(67.8%)對6種抗結核病藥全敏感，306株(32.2%)對1種或1種以上藥物耐藥，其中114株(12.0%)為單耐藥菌株，117株(12.3%)為耐多藥菌株，10株(1.1%)為廣泛耐藥菌株[9]。廣西結核分枝桿菌對INH、RFP、EMB、SM、KM、OFX6種抗結核藥物的總體耐藥率為16.45%，單耐藥率為7.88%[10]。目前，對于結核病的耐藥性尚無特別的解決方法，只能在藥物治療的基礎上，輔助給與免疫治療等可能會取得一定的效果。

3 結語

結核病是一個全球性的疾病，我國是一個結核病高發國家，我國結核病患者占全球近20%。鹽酸乙胺丁醇是一種常用抗結核藥物，但是其不能用紫外測定帶來了很大困擾。高效液相色譜是一種常用于藥物分析的手段，它加上一些除紫外之外的檢測手段如蒸發光散射檢測、電霧檢測、質譜聯用，就可以方便、快速地測定鹽酸乙胺丁醇的含量及溶出度，精密度好，重復性高，穩定性好。還有其他一些如氣相色譜法、醇中堿滴定法等也可以快速、簡便地測出其含量。鹽酸乙胺丁醇是一種抑菌藥物，但是具體抗結核機制尚不清楚，還有待進一步深入研究。不良反應與耐藥性的產生應該早預防，早發現，早解決。

[1]王昕.高效液相色譜研究進展[J].光明中醫,2011,26(1):56-58.

[2]Zhang W,Zhang Z,Meng J,et al.Adsorptive Behavior and Solid-phase Microextraction of Bare Stainless Steel Sample Loop in High Performance Liquid Chromatography[J].Journal of Chromatography A,2014（1365）：19-28.

[3]張人福,宋曉園.高效液相色譜在藥學的應用概況和最近進展[J].中國當代醫藥，2013,20(21):15-18.

[4]湯興球,王伍承.HPLC-ELSD法同時測定煙肼丁醇片中鹽酸乙胺丁醇和異煙肼的含量[J].安徽醫藥,2012,16(5):616-617.

[5]陳小利,馬紅燕,張琰圖,等.反向流動注射化學發光法測定鹽酸乙胺丁醇[J].分析試驗室,2005,24(2):15-18.

[6]邱涵,陳素儉,李玲玲,等.氣相色譜法測定鹽酸乙胺丁醇片中鹽酸乙胺丁醇的含量[J].中國藥學雜志,2003,38(8):575.

[7]李存素,周明輝.抗結核藥物不良反應產生因素分析[J].求醫問藥,2013,11 (10):294-295.

[8]Areeshi MY,Bisht SC,Mandal RK,et al.Prevalence of drug resistance in clinical isolates of tuberculosis from GCC:a literature review from January 2002 to March 2013[J].J Infect Dev Ctries,2014，8（9）：1137-1147.

[9]陸偉,周揚,陳誠,等.江蘇省社區人群結核桿菌耐藥狀況及影響因素研究[J].中華疾病控制雜志,2013,17(7):560-563.

[10]羅丹.廣西耐藥結核病流行特征及結核分枝桿菌基因分型的研究[D].廣西：廣西醫科大學,2013.

R914.4

A

1672-5654（2014）12（a）-0108-02

2014-09-02）

蘆紅(1974-)，女，遼寧錦州人，本科，主管藥師，研究方向：藥學。