塔黃的化學成分研究

施天一，廖志新*，葉 潤，胥廉謙，孫洪發，紀蘭菊(.東南大學化學化工學院，南京 0009；.中國科學院西北高原生物研究所，西寧 8000)

塔黃(RheumnobileHook. f. et Thoms)屬蓼科大黃屬多年生高大草本植物，生長于喜馬拉雅山南麓4 000～4 800米高山石灘及濕草地[1]。《藏藥志》[2]記載：塔黃根莖入藥；用于瀉黃水，治惡性腹水、腫病[3]。迄今為止，塔黃的化學成分，國內外尚未有研究報道。為了更好地開發和利用塔黃資源，利用硅膠、Sephadex LH-20、MCI等色譜技術從其乙醇提取物分離得到了8個化合物，通過各種波譜技術，例如：紅外光譜、核磁共振譜、質譜等鑒定了它們的結構，分別為：大黃素(1)，大黃酚(2)，大黃素甲醚(3)，1，8-二羥基-2，3-甲氧基-6-甲基蒽醌(4)，大黃酚葡萄糖苷(5)，大黃素葡萄糖苷(6)，β-谷甾醇(7)，胡蘿卜素(8)。所有化合物均為首次從該種植物中分離得到。

1 儀器與試藥

1.1儀器 RE-85E旋轉蒸發器(鞏義市英峪予華公司)；AVANCE AV-500核磁共振波譜儀(Bruker)；NICOLET IR200 FT-IR型紅外光譜儀；XT4型顯微熔點儀(上海荊和分析儀器有限公司)；Q-Tof micro(ESI-MS)。

1.2試藥 實驗用塔黃于2011年8月采自西藏林芝縣色季拉山，植物樣品經中國科學院西北高原生物研究所孫洪發研究員鑒定；柱層析硅膠(200～300目，青島海洋化工廠)；薄層層析硅膠(GF254，10～40 μm，青島海洋化工廠)；Sephadex LH-20(20～100 μm，Pharmacia)；MCI：Mitsubishi Chemical(75～150 μm，Mitsubishi Kasei Corporation)；硫酸(分析純，南京化學試劑有限公司)；磷鉬酸(分析純，上海展云化工有限公司)；丙酮，石油醚，乙酸乙酯，乙醇及甲醇等試劑(分析純，南京晚晴試劑公司)。

2 提取與分離

稱取塔黃干燥根莖3.0 kg，粉碎，用體積分數為90%乙醇10 L冷浸[4]，7 d萃取1次，共4 次，在50 ℃下減壓濃縮得到浸膏500 g。以2 000 mL水溶解浸膏，先后分別用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇1 500 mL多次萃取，減壓濃縮，重復5次，得到不同極性部分萃取物。得到石油醚萃取物(78 g)、乙酸乙酯萃取物(146 g)、正丁醇萃取物(276 g)。經正相硅膠柱層析、Sephadex LH-20凝膠柱層析、MCI柱層析及重結晶等方法，通過使用石油醚-乙酸乙酯體系，從石油醚浸膏中分離得到化合物7(5 g)；從乙酸乙酯浸膏中分離得到化合物1(10 g)，2(5 g)，3(2 g)，4(1 g)；通過使用二氯甲烷-甲醇體系，從正丁醇浸膏中分離得到化合物5(10 g)，6(5 g)，8(1 g)。

3 結構鑒定

化合物1：紅色針狀結晶，易溶于乙酸乙酯，C15H10O5，mp：255～256 ℃，ESI-MSm/z：269[M-H]-。IR(KBr)νmaxcm-1：3 363，1 673，1 626，1 585，1 478，1 448，1 404，1 364，1 332，867，72。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：12.07(1H，s，α-OH)，12.00(1H，s，α-OH)，11.35(1H，s，β-OH)，7.48(1H，brs，H-4)，7.16(1H，brs，H-5)，7.11(1H，d，J=2.2 Hz，H-2)，6.59(1H，d，J=2.25 Hz，H-7)，2.41(3H，brs，6-CH3)。13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)：190.3(C-9)，181.0(C-10)，165.1(C-8)，164.8(C-1)，162.1(C-6)，148.3(C-3)，135.3(C-14)，133.1(C-11)，123.9(C-7)，119.6(C-5)，113.2(C-12)，108.9(C-13)，108.2(C-4)，107.4(C-2)，21.0(CH3)。以上數據與參考文獻數據[5]一致，故確定為大黃素(1，3，8-trihydroxy-6-methylanthraquinone)。

化合物2：淡黃色粉末狀，易溶于乙酸乙酯，C16H12O5，mp：197～198 ℃，ESI-MSm/z：283[M-H]-。IR(KBr)νmaxcm-1：3 402，1 674，1 622，1 562，1 487，1 460，1 223，1 034，926，870，847，763，720。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：12.18(1H，s，OH)，11.98(1H，s，OH)，7.55(1H，d，J=2.4 Hz，H-4)，7.22(2H，d，J=2.4 Hz，H-2，H-5)，6.89(1H，d，J=2.5 Hz，H-7)，3.94(3H，s，3-OCH3)，2.44(3H，s，6-CH3)。13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δC：190.3(C-9)，181.0(C-10)，165.4(C-1)，164.8(C-8)，161.5(C-3)，147.1(C-6)，134.8(C-14)，132.9(C-12)，123.8(C-13)，120.1(C-7)，112.8(C-5)，109.4(C-11)，107.3(C-2)，105.8(C-4)，55.7(3-OCH3)，21.9(6-CH3)。以上數據與參考文獻數據[6]一致，故確定為大黃素甲醚(1，8-dihydroxy-3-methoxy-6-methyl-anthracene-9，10-dione)。

化合物3：黃色片狀結晶，易溶于乙酸乙酯，C15H10O4，mp：186～188 ℃，ESI-MSm/z：253[M-H]-。IR(KBr)νmaxcm-1：1 672，1 620，1 601，1 563，1 452，1 203，895，868，838，747。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：11.91(2H，s，1，8-OH)，7.80(1H，t，J=6.5 Hz，H-6)，7.71(1H，t，J=6.5 Hz，H-5)，7.55(1H，brs，H-4)，7.38(1H，brd，J=8.0 Hz，H-7)，7.22(1H，brs，H-2)，2.44(3H，s，3-CH3)。13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δC：191.463(C-9)，181.248(C-10)，161.489(C-1)，161.237(C-8)，149.063(C-3)，137.207(C-6)，133.156(C-14)，132.839(C-12)，124.272(C-13)，123.945(C-7)，120.427(C-5)，119.200(C-11)，115.679(C-2)，113.587(C-4)，21.522(CH3)。以上數據與參考文獻數據[7]一致，故確定為大黃酚(1，8-dihydroxy-3-methyl-anthraquinone)。

化合物4：橙黃團狀結晶，易溶于乙酸乙酯，C17H14O6，mp：198～199 ℃。ESI-MSm/z：313[M-H]-。IR(KBr)νmaxcm-1：1 660，1 622，1 600，1 561，1 240。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：12.29(1H，s，1-OH)，12.10(1H，s，8-OH)，7.65(1H，s，5-H)，7.11(1H，s，4-H)，6.69(1H，d，J=2.45，7H)，3.74(6H，dd，J=7，2-OCH3，3-OCH3)，2.47(3H，s，6-CH3)。以上數據與參考文獻數據[8]一致，故確定為1，8-二羥基-2，3-甲氧基-6-甲基蒽醌(1，8-dihydroxy-2，3-dimethoxy-6-methylanthracene-9，10-dione)。

化合物5：黃色針狀結晶，易溶于甲醇，C21H20O9，mp：258～261 ℃。ESI-MSm/z：415[M-H]-。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：12.82(1H，s，a-OH)，7.85(1H，m，H-6)，7.71(1H，brs，H-7)，7.70(1H，brd，J=7.8 Hz，H-5)，7.51(1H，brs，H-4)，7.20(1H，brs，H-2)，5.10(1H，d，J=7.5 Hz，H-1′)，4.62～3.22(6H，m，H-2′，3′，4′，5′，6a′，6b′)，2.43(3H，s，3-CH3)。13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δC：187.4(C-9)，182.0(C-10)，161.7(C-8)，158.3(C-1)，147.7(C-3)，135.8(C-6)，134.6(C-4a)，132.2(C-10a)，124.1(C-7)，122.6(C-2)，120.5(C-4)，119.4(C-5)，114.6(C-8a，C-9a)，100.6(C-1′)，77.3(C-3′)，76.6(C-5′)，73.4(C-2′)，69.5(C-4′)，60.6(C-6′)，21.4(3-CH3)。以上數據與參考文獻數據[9]一致，故確定為大黃酚-8-O-β-D-葡萄糖苷(chrysophanol-8-O-β-D-glucopyranoside)。

化合物6：黃色粉末，C21H20O10，易溶于甲醇，mp：237～238 ℃。ESI-MSm/z：431[M-H]-。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：13.17(1H，brs，a-OH)，11.25(1H，brs，β-OH )，7.46(1H，brs，H-4)，7.28(1H，d，J=2.5 Hz，H-5)，7.16(1H，brs，H-2)，7.00(1H，d，J=2.5 Hz，H-7)，5.10(1H，d，J=5.0 Hz，H-1′)，4.61～3.23(6H，m，H-2′，3′，4′，5′，6a′，6b′)，2.40(3H，s，3-CH3)。13C-NMR(125 Hz，DMSO-d6)δC：186.5(C-9)，182.0(C-10)，164.1(C-6)，161.6(C-8)，161.3(C-1)，146.9(C-3)，136.4(C-10a)，132.2(C-4a)，124.3(C-2)，119.1(C-4)，114.3(C-8a)，113.4(C-9a)，108.4(C-7，C-5)，100.8(C-1′)，77.3(C-3′)，76.5(C-5′)，73.3(C-2′)，69.3(C-4′)，60.5(C-6′)，21.4(3-CH3)。以上數據與參考文獻數據[10]一致，故確定為大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷(emodin-8-O-β-D-glucoside)。

化合物7：C29H50O，無色針狀結晶，易溶于氯仿，mp：137～138 ℃。ESI-MSm/z：415[M+H]+。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ：1.00(3H，s)，0.91(3H，s)，0.85(3H，d)，0.83(3H，d)，0.81(3H，s)，0.67(3H，s)，3.52(1H，s，H-3)，5.35(1H，d，H-6)。13C-NMR(125 MHz，CDCl3)δC：140.3(C-5)，120.7(C-6)，70.6(C-3)，55.9(C-14)，55.1(C-17)，50.2(C-9)，44.9(C-13)，41.3(C-4)，38.8(C-12)，36.3(C-1)，35.5(C-10)，27.9(C-27)，25.1(C-16)，24.4(C-15)，22.1(C-19)，19.7(C-18)，20.2(C-28)，20.1(C-28)，18.8(2-26)。以上數據與參考文獻數據[11]一致，故確定為β-谷甾醇(β-sitosterol)。

化合物8：C35H60O6，白色粉末，可溶于氯仿-甲醇(1∶1)的混合溶液中。mp：284～285 ℃。ESI-MSm/z：575[M-H]-。1H-NMR(500 MHz，DMSO)δ：0.96(3H，s)，0.90(3H，d，J=6.45 Hz)，0.82(3H，s)，0.80(6H，m)，0.65(3H，s)，3.00-3.67(6H，m)， 4.39(1H，t，J=5.70 Hz，H-3)，4.21(1H，d，J=7.80 Hz，Glc-H-1)，5.35(1H，d，H-6)。13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δC：38.8(C-1)，30.0(C-2)，77.2(C-3)，40.8(C-4)，141.1(C-5)，121.5(C-6)，33.7(C-7)，32.0(C-8)，50.2(C-9)，26.0(C-10)，21.3(C-11)，28.6(C-12)，42.2(C-13)，56.6(C-14)，24.5(C-15)，42.3(C-16)，56.0(C-17)，12.1(C-18)，19.2(C-19)，36.4(C-20)，19.1(C-21)，35.9(C-22)，37.4(C-23)，45.7(C-24)，29.4(C-25)，19.3(C-26)，19.5(C-27)，23.0(C-28)，12.3(C-29)，101.2(C-1″)，74.0(C-2″)，77.4(C-3″)，70.6(C-4″)，77.2(C-5″)，61.5(C-6″)。以上數據與參考文獻數據[11]一致，故確定為胡蘿卜苷(daucosterol)。

參考文獻：

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