HPLC法測定布洛芬鈉有關物質

齊 勇，聶 磊

（1.山東大學藥學院，山東濟南250012；2.山東新華制藥股份有限公司，山東淄博255000）

HPLC法測定布洛芬鈉有關物質

齊 勇1，2，聶 磊1

（1.山東大學藥學院，山東濟南250012；2.山東新華制藥股份有限公司，山東淄博255000）

目的采用高效液相色譜法測定布洛芬鈉有關物質。方法儀器：高效液相色譜儀（紫外檢測器）；色譜柱：Supelco discovery C18（4.0 mm×150 mm，5μm）；流動相：水（用H3PO4調pH為2.5）－乙腈（66∶34）；檢測波長：214 nm；柱溫：（30±0.5）℃；流速：2 mL·min－1；進樣體積：5μL。結果布洛芬鈉主峰與雜質B主峰分離度為3.0，分離良好；布洛芬鈉鹽檢測限為0.100 6μg·mL－1，定量限為0.503μg·mL－1；雜質B檢測限為0.06μg· mL－1，定量限為0.24μg·m L－1；精密度：樣品雜質含量測試結果的RSD＝0＜2.0%。結論該方法靈敏、簡單、準確，適用于布洛芬鈉有關物質的測定。

高效液相色譜法；布洛芬鈉；有關物質

布洛芬鈉是布洛芬的鈉鹽產品，與布洛芬一樣，具有解熱鎮痛及抗炎作用。用于扭傷、勞損、下腰疼痛、肩周炎、滑囊炎、肌腱及腱鞘炎、牙痛和術后疼痛、類風濕性關節炎、骨關節炎以及其他血清陰性（非類風濕性）關節疾病［1］。可以減輕中度疼痛，如關節痛、肌肉痛、偏頭痛、頭痛、牙痛、痛經、神經痛，也可用于減輕普通感冒或流行性感冒引起的發熱［2］。相關質量標準沒有對其有關物質的測定方法做出規定。本文建立了布洛芬鈉有關物質的HPLC測定方法，該方法操作簡便、準確度高及重現性好，為布洛芬鈉有關物質的準確定量提供參考。

1 實驗部分

1.1 儀器 島津LC－20AT高效液相色譜儀，色譜柱為Supelco discovery C18（4.0 mm×150 mm，5 μm）。

1.2 試藥及溶液配制 2－（4－正丁基苯）丙酸（雜質B），批號：7.0，EDQM官方購買；布洛芬鈉，批號：1308002，山東新華制藥生產；苯戊酮，批號：A0105592；乙腈為色譜純；磷酸、磷酸二氫鉀、氫氧化鈉均為分析純試劑。

稀釋液：稱取磷酸二氫鉀約6.8 g，用水溶解至1 000 mL，用50%氫氧化鈉溶液調pH至7.2，再加1 000 mL甲醇，混勻［3］。

2－（4－正丁基苯）丙酸溶液：量取2－（4－正丁基苯）丙酸對照品1.0 mL，加乙腈稀釋至10.0 mL，取此溶液1.0 mL用稀釋液稀釋到10.0 mL，搖勻。

2 方法與結果

2.1 色譜條件 采用等度洗脫方式，流動相：水（用H3PO4調pH為2.5）－乙腈（66∶34）；檢測波長：214 nm；柱溫：（30±0.5）℃；流速：2 mL· min－1；進樣體積：5μL；記錄至布洛芬主峰保留時間的2倍。

2.2 專屬性 取布洛芬鈉120 mg，加2－（4－正丁基苯）丙酸溶液1.0 mL，用稀釋液制成100.0 mL，進樣測定，布洛芬鈉主峰與2－（4－正丁基苯）丙酸峰分離度為3.0，分離良好。取布洛芬鈉分別在紫外光照、高溫、酸、堿、氧化條件下破壞，按本方法分別進行測定［4］，結果表明，未破壞的樣品與紫外光照、高溫、酸化、堿化破壞后的樣品單個最大雜質均為0.06%，總雜質均為0.17%，雜質個數均為5個。氧化破壞后的樣品單個最大雜質為0.50%，總雜質為1.24%，雜質個數為11個，布洛芬鈉在紫外光照、高溫、酸、堿條件下雜質數量及含量無明顯變化，在氧化條件下雜質個數及含量增加顯著，證明布洛芬鈉在氧化條件下有明顯的降解。本方法對各雜質分離良好，對測定無干擾，專屬性符合要求，圖譜見圖1～7。

圖1 分離度色譜圖

圖2 未破壞樣品色譜圖

圖3 紫外光照破壞色譜圖

圖4 高溫破壞色譜圖

圖5 酸化破壞色譜圖

2.3 精密度 取樣品0.12 g，置100 mL容量瓶中，用稀釋液溶解并稀釋至刻度，搖勻。連續進樣6次，6次雜質含量測試結果的RSD為0＜2.0%，精密度符合要求［5］，測試數據見表1。

表1 精密度測試數據

2.4 檢測限與定量限

圖6 堿化破壞色譜圖

圖7 氧化破壞色譜圖

2.4.1 布洛芬鈉的檢測限和定量限 取布洛芬鈉稀釋進樣測定，按3倍信噪比計算，布洛芬鈉的檢測限為0.100 6μg·mL－1；取布洛芬鈉稀釋進樣測定，按10倍信噪比計算，布洛芬鈉的定量限為0.503μg·mL－1。

2.4.2 2－（4－正丁基苯）丙酸（雜質B）的檢測限和定量限 取2－（4－正丁基苯）丙酸稀釋進樣測定，按3倍信噪比計算，2－（4－正丁基苯）丙酸的檢測限0.06μg·mL－1；取2－（4－正丁基苯）丙酸稀釋進樣測定，按10倍信噪比計算，2－（4－正丁基苯）丙酸的定量限0.24μg·mL－1［6］。

2.5 溶液穩定性 取布洛芬鈉樣品溶液在溶液制備后的0、2、4、8、12和24 h，分別進樣測定，統計有關物質測定結果，各項雜質含量變化均＜0.02%，可認為布洛芬鈉樣品溶液在24 h內雜質含量無顯著性變化，溶液在24 h內是穩定的，測試結果見表2。

表2 溶液穩定性測試數據

2.6 布洛芬鈉樣品測定 分別取連續5個批號的布洛芬鈉120 mg，加稀釋液溶解稀釋至100 mL，作為供試品溶液；精密量取供試品溶液1 mL，加流動相稀釋至100 mL，取1 mL上述溶液稀釋至10 mL，作為對照溶液。按上述色譜條件測定，按主成分自身對照法計算雜質含量，測定結果見表3。

表3 布洛芬鈉有關物質的測定

3 討論

3.1 在布洛芬鈉質量標準中，單個最大雜質要求≤0.10%，總雜質要求≤0.30%，從“2.6”項下的檢測數據可以看出，單個最大雜質已接近限度，因此建立布洛芬鈉有關物質檢測方法對其有關物質進行質量控制是十分必要的［7］。

3.2 在布洛芬鈉的生產原料布洛芬的質量標準中，《美國藥典》規定：雜質2－（4－正丁基苯）丙酸不得過0.1%，其他單個雜質不得過0.1%，總雜質不得過0.3%。在參考上述規定的基礎上，從嚴要求限度，制定本次布洛芬鈉有關物質的限度為：單個最大雜質≤0.10%，總雜質≤0.30%，“2.6”項下的實驗結果表明，5批布洛芬鈉樣品均符合規定［8］。

3.3 本文只對雜質2－（4－正丁基苯）丙酸進行了研究，沒有對其他雜質進行進一步分析，下一步工作中將對其他雜質進行研究，達到對布洛芬鈉有關物質進行更好地質量控制。

4 結論

用HPLC法測定布洛芬鈉有關物質，回收率高，重現性好，測定結果準確可靠，該法適用于布洛芬鈉有關物質含量的測定。

［1］ 李成平，施青紅，李立，等.高效液相色譜手性流動相法拆分布洛芬對映體［J］.藥物分析雜志，2005，25（4）：426－428.

［2］ 李瑋玲.雙氯芬酸二乙胺的有關物質測定［J］.藥物分析雜志.2013，33（9）：1546－1550.

［3］ 稅慶華，錢雪，朱啟登.布洛芬搽劑中有關物質中的HPLC法測定［J］.2006，25（1）：24－26.

［4］ 于如嘏.分析化學（下冊）［M］.第2版.北京：人民衛生出版社，1986：386－387.

［5］ 國家食品藥品監督管理局.藥物研究技術指導原則（2005年）［M］.北京：中國醫藥科技出版社，2005：17－27.

［6］ 余永銘，余仲平.有關物質檢查方法研討［J］.中國藥品標準，2003，4（3）：11－12.

［7］ 李瓊，劉毓宏.高效液相色譜法測定酮基布洛芬［J］.藥物分析雜志，2005，25（8）：994－995.

［8］ 賀秀婷，翟光喜，皇甫傳青，等.HPLC法測定布洛芬緩釋膠囊有關物質［J］.藥學研究，2013，32（2）：85－87.

Determ ination of the related substances in ibuprofen sodium by HPLC

QIYong1，2，NIE Lei1
（1.School of Pharmaceutical Sciences，Shandong University，Jinan 250012，China；2.Shandong Xinhua Pharmaceutical Co.，Ltd.，Zibo 255000 China）

ObjectiveTo establish an HPLCmethod for the determination of the related substances in ibuprofen sodium.MethodsInstrument：HPLC（UV detector），column：Supelco discovery C18（4.0 mm×150 mm，5μm），mobile phase：water（adjusted pH to 2.5 with phosphoric acid）－acetonitrile（66∶34），the detection wavelength was 214 nm，the column temperaturewas（30±0.5）℃；The flow ratewas2 mL·min－1and the inject volume was5μL.ResultsThemain peak of ibuprofen sodium was separated from impurity B completely，the resolution was3.0；The limitof detection（LOD）of ibuprofen sodium was0.100 6μg·m L－1，and its limit of quantitation（LOQ）was0.503μg·m L－1；The LOD of impurity B was 0.06μg·mL－1，and its LOQ was 0.24μg·mL－1；Precision：the RSD of test results of sample impuritieswas 0＜2.0%.ConclusionThemethod was highly selective，simple and accurate，and was suitable for the determination of related substances in ibuprofen sodium.

HPLC；Ibuprofen sodium；Related substances

R927.1

A

2095－5375（2014）08－0446－003

山東省自然科學基金（No.ZR2011HM080）

齊勇，男，研究方向：藥物分析，E－mail：43934617＠qq.com

聶磊，男，博士研究生，副教授，研究方向：中藥質量評價，Tel：0531－88382330，E－mail：nielei2004＠sdu.edu.cn