抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體在類風濕關節炎中的診斷價值

張文蘭 王永福 白 力 尹芳蕊 趙劍波 (包頭醫學院風濕免疫研究所，包頭 014010)

類風濕性關節炎(Rheumatoid arthritis，RA)是一種常見的、嚴重的致畸性自身免疫疾病。越來越多的研究發現，越早對RA 進行治療干預，就能越有效地控制該病的進一步惡化，并有較好的預后。因此，早期診斷和治療對阻止該疾病對關節的破壞非常必要。最早應用于RA 臨床診斷的血清學指標為類風濕因子(Rheumatoid factor，RF)，雖然其敏感性較高，但特異性較差，在其他風濕疾病、感染性疾病及1%～5%的正常人群中均可呈陽性。后來，又陸續出現了抗核周因子(APF)、抗角蛋白抗體(AKA)等。近年來，抗環瓜氨酸多肽(anti-cyclic citrullin-ated peptide，anti-CCP)抗體被廣泛用于RA 的早期診斷，具有靈敏度高、特異性好的特點，是早期診斷RA 的血清學標志性抗體。最近，有研究表明，抗突變型瓜氨酸波形蛋白(anti-mutated citrullinated vimentin，anti-MCV)抗體是另外一種診斷RA 的敏感性和特異性都較好的實驗診斷指標［1-5］。

Anti-MCV 是1994 年由Despres 等發現的一種自身抗體，靶抗原波形蛋白是一種重要的細胞骨架蛋白，主要在中胚層起源的細胞中表達，它在凋亡的巨噬細胞內的肽酰精氨酸亞氨酶的作用下瓜氨酸化，這一過程改變了蛋白結構并增加了潛在的抗原決定簇(與RA 相關的靶抗原瓜氨酸)［6，7］。本文通過對RA患者血清中anti-MCV、anti-CCP 及RF-IgM 進行檢測，探討anti-MCV 抗體在RA 診斷中的應用價值。

1 對象與方法

1.1 研究對象 487 例各種風濕性疾病患者均為2013 年3 月至2014 年3 月我院風濕科門診及住院病例，其中男性138 例，女性349 例，年齡14～76歲，平均(49±18)歲。

1.1.1 RA 患者組 共359 例，其中男性87 例，女性272 例，年齡24～77(48±18)歲。均符合2009年ACR 和歐洲抗風濕病聯盟(EULAR)提出的新的RA 分類標準和評分系統［8］。

1.1.2 疾病對照組 共128 例，包括系統性紅斑狼瘡(SLE)34 例，男性10 例，女性24 例，年齡14～72(46±18)歲;原發性干燥綜合征(pSS)22 例，男性9 例，女性13 例，年齡16～74(47±17)歲;混合性結締組織病(MCTD)28 例，男性10 例，女性18 例，年齡18～70 歲，平均(48±18)歲;骨關節炎16 例，男性7 例，女性9 例，年齡17～76 歲，平均(50±20)歲;強直性脊柱炎15 例，男性9 例，女性6 例，年齡14～68 歲，平均(44±13)歲;痛風13 例，男性6 例，女性7 例，年齡20～69 歲，平均(45±17)歲。

1.1.3 正常對照組 共90 例，其中男性28 例，女性62 例，年齡23～70 歲，平均(46±17)歲。均為我院體檢健康者。

1.2 研究方法 采用酶聯免疫吸附試驗法定量檢測anti-MCV 和anti-CCP，檢測試劑盒分別由德國ORGENTEC 公司和上海科新生物技術股份有限公司生產。anti-MCV ＞20 U/ml 為陽性，anti-CCP ＞25 U/ml 為陽性。采用動態免疫散射比濁法檢測RFIgM，＞15 U/ml 為陽性，儀器和試劑均由西門子股份有限公司提供。

1.3 統計學處理 應用SPSS 17.0 進行統計學分析。采用四格表計算抗體的靈敏度和特異性，兩個樣本的比較用t 檢驗和χ2檢驗。

表1 anti-MCV、anti-CCP 及RF-IgM 在各種疾病中的陽性例數及陽性率Tab.1 Positive cases and positive rates of anti-MCV，anti-CCP and RF-IgM

2 結果

2.1 anti-MCV、anti-CCP 及RF-IgM 在各種疾病中的陽性例數及陽性率 從表1 中可以看出，anti-MCV、anti-CCP 及RF-IgM 在RA 患者組中的陽性率均明顯高于疾病對照組和正常對照組(P ＜0.05)。anti-MCV、anti-CCP 及RF-IgM 在疾病對照組中也有一定的陽性率。anti-MCV 在正常對照組中僅一例陽性，定量測定值為26 U/ml，為低滴度的陽性。RF-IgM 在正常對照組中有8 例陽性，陽性率為8.9%。對這8 例進行進一步分析得知，它們的定量測定值范圍是(18.9～31.2)U/ml，年齡分布范圍為53～62 歲，其中男性3 例，女性5 例。而anti-CCP在正常對照組中無一例陽性。

2.2 anti-MCV、anti-CCP 及RF-IgM 在RA 中的診斷意義見表2 從表2 中可以看出，單一指標中，anti-MCV 具有最高的靈敏度，其次是RF-IgM，最后是anti-CCP;但是在特異性上，anti-CCP 具有最高的特異性，其次是anti-MCV，最后是RF-IgM;所以綜合來看，anti-MCV 是一個靈敏度和特異性都還不錯的指標。聯合檢測anti-MCV 和anti-CCP，靈敏度降低到70.2%;但特異性增加到98.7%。如同時檢測anti-MCV 和anti-CCP，并以二者中任何一種指標為陽性標準，那么，對RA 的靈敏度和特異性分別為89.5%和97.6%。

表2 anti-MCV、anti-CCP 及RF-IgM 在RA 中的診斷意義Tab.2 Diagnostic significance of anti-MCV，anti-CCP and RF-IgM in RA

3 討論

RA 是一種累及周圍關節為主的多系統性炎癥性自身免疫疾病。靶器官主要是關節滑膜，出現經久不愈的炎癥、增厚、血管翳形成、軟骨及軟骨下骨質破壞，最終導致關節畸形及強直而致殘。近年的研究認為，早期診斷、早期積極地給予病情緩解藥物能及時控制病情，減少骨關節的破壞并改善預后［9］。最早應用于RA 臨床診斷的血清學指標為RF，臨床主要檢測IgM 型。RF-IgM 雖然敏感性較高，但其特異性較差，限制了它的診斷作用。在RA患者血清中還可以檢測到幾種自身抗體，如抗核周因子抗體、抗角蛋白抗體及抗Sa 抗體等，其表位都含瓜氨酸，提示瓜氨酸是風濕疾病自身抗體靶抗原的決定簇。而anti-MCV 與anti-CCP 有共同的抗原表位即瓜氨酸，有可能作為特異性抗體用于RA 的早期診斷。因此，針對瓜氨酸波形蛋白的特異性抗體——anti-MCV 逐漸成了新的研究熱點。

本文研究結果顯示:anti-MCV、anti-CCP 和RFIgM 單獨作為RA 的檢測指標時，其敏感度均比較高，分別為85.1%、76.7%和82.7%，特異性分別為93.2%、95.1%和80.1%，并且三個實驗室指標在RA 患者組中的陽性率均明顯高于疾病對照組和正常對照組。anti-MCV 診斷RA 的靈敏度最高，而anti-CCP 的特異性最好;兩者聯合檢測靈敏度降低，但特異性最高。進一步分析RA 患者anti-MCV 與anti-CCP、RF-IgM 的關系，結果顯示，anti-MCV 與anti-CCP 有較好的關聯性，這可能與anti-MCV 和anti-CCP 有共同的抗原表位有關。雖然anti-MCV 與RF-IgM 也有關，但關系不大。anti-MCV、anti-CCP和RF-IgM 三個檢測指標兩兩組合檢測時發現，以anti-MCV 或anti-CCP 為RA 診斷標準時，檢測的敏感度和特異性均達到了理想的水平，分別為89.5%和97.6%。由于RF-IgM 的特異性方面的缺陷，同時進行anti-MCV、anti-CCP 的檢測對臨床診斷顯得非常重要。

綜上所述，作者認為，anti-MCV 對RA 有較高的診斷價值，對于篩查和輔助診斷RA 具有重要意義。

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