Ki-67 和PCNA 表達與乳腺癌及乳腺癌化療敏感性的關系

魏 昕 楊舉倫 (遵義醫藥高等專科學校病理教研室，遵義 563000)

乳腺癌是最常見的困擾中老年女性的惡性腫瘤之一，臨床流行病學研究表明乳腺癌已成為歐美國家發病率最高的惡性腫瘤。乳腺癌的治療與預防在于乳腺癌的早期診斷，但是由于其發病隱匿，早期臨床癥狀不明顯，易被患者和醫生忽視，確診時多已為晚期甚至伴有遠處淋巴轉移灶的形成，造成乳腺癌最后保乳手術率低，低治愈率的結局［1］。由于乳腺癌部位的特殊性，臨床上乳腺癌治療的主要方式仍為化療或是手術結合化療的綜合治療。乳腺癌化療方式目前以蒽環類化療藥物為主，但是不同患者對化療敏感性不同［2］，為此，本研究利用我院病例資源，探討分析乳腺癌組織中核增殖相關抗原(Ki-67)及增殖細胞核抗原(PCNA)表達變化與乳腺癌的關系及其對乳腺癌化療敏感性的關系，為臨床乳腺癌的有效化療提供理論依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 研究對象為我院近年來就診的已經病理確診的84 例原發性乳腺癌患者。年齡為21～63 歲，平均年齡為(41.2 ±1.4)歲;所有患者均經過臨床確診，且無其他心血管或神經系統等嚴重疾患，病理診斷及臨床分期參考2010 年中國版乳腺癌NCCN 指南［3］。

1.2 化療方案 所有患者均為首次確診，且無惡性腫瘤病史。所選患者化療CEF 方案共48 例:第1、8 天環磷酰胺800 mg/m2，第2、3 天吡柔比星60 mg/m2，第4～7 天5-FU 500 mg/m2;CTF 方案36例:第2、3 天吡柔比星30 mg/m2，或第2 天吡柔比星60 mg/m2，其余時間與CEF 方案一致，所有藥物均為靜脈注射，化療時間為2～7 個周期。

1.3 Ki-67 及PCNA 檢測方法［4］采用免疫組化SP 法，實驗步驟按說明書進行。經抗原修復，DAB顯色。Ki-67、PCNA 陽性均為核呈棕黃色，計算陽性細胞占腫瘤細胞的百分比，陽性細胞數＞25%判為陽性。表達陽性以下簡稱陽性，記為“+”，表達陰性以下簡稱陰性，記為“-”。整個切片未見陽性細胞為“-”，陽性細胞數1%～25%定為“+”，25%～50%為“++”，50%～75%為“+++”，陽性細胞在75%以上定位“++++”。

1.4 化療敏感性評定方法 化療敏感性評定以化療效果決定，而化療效果以原發灶的變化來衡量，化療前后分別測量腫瘤最大直徑。根據“實體瘤治療療效評價標準(RECIST)”［5］進行評估，乳腺癌原發灶臨床緩解分為:臨床檢測手段未發現腫瘤為完全緩解(CR);腫瘤最長徑之和縮小30%或以上為部分緩解(PR);腫瘤非PR 且非進展(PD)則定義為穩定(SD)，PD 為腫瘤最長徑之和增加20%，病灶增加前非CR、非PR 且非SD。本研究中以CR+PR 計算腫瘤化療總有效率。

1.5 統計學處理 研究中所有數據均使用SPSS17.0 統計學軟件，計數資料采用χ2檢驗，計量資料用±s 表示，進行t 檢驗，P＜0.05 表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 研究患者一般情況 84 例研究患者中浸潤性導管癌58 例，浸潤性小葉癌8 例，單純癌8 例，其他類型10 例;TNM 分期:Ⅰ期33 例，Ⅱ期38 例，Ⅲ、Ⅳ期13 例。所有患者均于手術治療后行化療治療。

2.2 Ki-67 及PCNA 表達及其與乳腺癌關系 通過免疫組化方法檢測到的Ki-67 及PCNA 表達陽性并結合患者一般臨床資料，Ki-67 陽性率與患者淋巴結轉移及腫瘤分型分期呈正相關，差異有統計學意義，P＜0.05。而PCNA 陽性率與腫瘤淋巴結轉移成正相關，P＜0.05，與腫瘤臨床分型分期無關，P ＞0.05。具體數值情況見表1。

表1 Ki-67 及PCNA 表達及其與乳腺癌的關系Tab.1 Ki-67 and PCNA and its relationship with breast cancer

表2 Ki-67 及PCNA 單項及聯合檢測與乳腺癌化療敏感性關系Tab.2 Ki-67 and PCNA individual and joint detection and breast cancer chemosensitivity relations

2.3 Ki-67 及PCNA 單項及聯合檢測與乳腺癌化療敏感性關系 單項檢測時，Ki-67+總有效率為80.8%明顯高于Ki-67-的56.2%，P＜0.05。PCNA-有效率為72.7%明顯高于PCNA+45.2%，P＜0.05。提示，Ki-67+、PCNA-可為乳腺癌化療敏感性的判定指標。聯合檢測時，與Ki-67+/PCNA-組相比，Ki-67+/PCNA+有效率無差異，P ＞0.05，而Ki-67-/PCNA+和Ki-67-/PCNA-有效率明顯降低，P＜0.05。見表2。

3 討論

乳腺癌是女性惡性疾病中最常見的一種惡性腫瘤，其好發年齡為40～60 歲，但隨著流行病學的深入，目前其發病年齡越來越年輕化，發病率也呈增長趨勢，其原因仍未完全明了，可能與某些基因的缺失或過表達有關［6］。乳腺癌由于其發病部位的特殊性，成為很多女性十分擔憂的原因。一旦發病，最根本的解決辦法是進行乳房切除及淋巴結清掃這種根治性手術，很多患者為追求形體的完美，選擇化療治療。因此，尋找一種有效的化療方式，找到能預測化療敏感性的指標成為臨床工作的重難點。

Ki-67 是在細胞增殖過程中表達產生的一種核抗原，其產生量與細胞有絲分裂有關。Ki-67 在多種腫瘤細胞中高表達，與多種腫瘤的發展、轉移、預后有關［7］。本研究中共調查84 例乳腺癌患者，其Ki-67 檢出陽性例數為52 例，陽性率為61.9%，并且提示其表達與腫瘤淋巴結轉移及腫瘤臨床分期有密切正相關關系，在腫瘤分期越嚴重的患者中，其陽性表達可能性越大。在腫瘤化療敏感性的實驗中，Ki-67+患者的化療總有效率為80.8%，明顯高于Ki-67-患者的56.2%，差異有統計學意義，P＜0.05。

增殖細胞核抗原PCNA 是細胞核內的一種酸性蛋白，是真核細胞DNA 合成所必需的輔酶。PCNA代表著細胞的增殖活性，活性越高其細胞間的張力越大，黏附性越低，越容易脫離原發灶，使腫瘤細胞向遠處轉移及擴散，被很多專家及學者認為是細胞增殖狀態的理想預后標志物［8］。本研究中顯示，乳腺癌中PCNA 表達陽性例數為62 例，陽性率為73.8%，研究中還提示PCNA 的表達與腫瘤臨床分型分期無明顯相關性，P ＞0.05。但是PCNA 表達與淋巴轉移情況呈正相關，即淋巴結轉移陽性的患者中PCNA 表達多為陽性，這與PCNA 促進腫瘤細胞向遠處轉移及擴散的特性是一致的。近年來國內外一些研究表明，PCNA 與多種腫瘤的預后關系密切，有關PCNA 與乳腺癌預后的關系研究也有大量的報道［9］，認為PCNA 的表達與乳腺癌淋巴結轉移、復發及預后有關。

在乳腺癌化療敏感性研究中，Ki-67+總有效率為80.8% 明顯高于Ki-67-的56.2%，P＜0.05。PCNA-有效率為72.7%明顯高于PCNA+45.2%，P＜0.05。提示，Ki-67+、PCNA-可為乳腺癌化療敏感性的判定指標。聯合檢測時，與Ki-67+/PCNA-組相比，Ki-67+/PCNA+有效率無差異，P ＞0.05，而Ki-67-/PCNA+和Ki-67-/PCNA-有效率明顯降低，P＜0.05。這表明Ki-67+及PCNA-可以作為預測乳腺癌患者化療敏感性的指標。

［1］Farooq A，Naveed AK，Azeem Z，et al.Breast and ovarian cancer risk due to prevalence of BRCA1 and BRCA2 variants in Pakistani population:a Pakistani database report［J］.J Oncol，201l，2011:632870.

［2］Liu M，Lawson G，Delos M，et al.Predictive value of the fraction of cancer cells immunolabeled for proliferating cell nuclear antigen or Ki67 in biopsies of head and neck carcinomas to identify lymph node metastasis:comparison with clinical and radiologic examinations［J］.Head Neck，2003，25(4):280-288.

［3］Perkins GL，Slater ED，Sanders GK，et al.Serum tumor markers［J］.Am Fam Physician，2003，68(6):1075-1082.

［4］Sun Z，Fu X，Zhang L，et al.A protein chip system for parallel analysis of muti-tumor markers and its application in cancer detection［J］.Anticancer Res，2004，24(2C):1159-1165.

［5］楊學寧，吳一龍.實體瘤治療評價標準——RECIST［J］.循證醫學，2004，4(2):85-90.

［6］唐 平，魏 兵，David G，等.乳腺癌的分子分類及其臨床應用［J］.中華病理學雜志，2009，38(1):13-17.

［7］邱獻華.青年乳腺癌42 例臨床分析［J］.實用臨床醫學，2011，12 (1):64-65.

［8］Zhou B，Yaog DF，Xie F.Biological markers as predictive factors of response to neo-adjuvant taxanes and anthracy cline chemotherapy in breast carcinoma［J］.Chin Mcd J(Engi)，2008，121(5):387-391.

［9］李 明，全細云.乳腺癌組織分類與ER、PR、CerbB-2、Ki67 表達的關系［J］.中國現代醫藥雜志，2009，11(5):15-17.