泄?jié)峤舛痉綄?duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠血清IL-4、IL-6的影響*

河北省中醫(yī)院脾胃病一科

劉建平 任 杰 郞曉猛 康 欣△ 趙 源△(石家莊050011)

潰瘍性結(jié)腸炎 (UC)，是一種病因尚不十分明確的炎癥性腸病 (IBD)，其病變多局限于黏膜和黏膜下層，主要損害乙狀結(jié)腸和直腸。目前UC的發(fā)病率逐年增高，嚴(yán)重?fù)p害了患者的身體健康，并影響其學(xué)習(xí)工作及生活。［1］多數(shù)學(xué)者認(rèn)為免疫因素是本病的主要發(fā)病原因之一。白介素-4(IL-4)通過(guò)調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞免疫作用，發(fā)揮了抑制炎癥的特性。［2］白介素-6(IL-6) 依靠其多向調(diào)節(jié)功能和廣泛的生物活性，在UC的腸道免疫性炎癥反應(yīng)的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中扮演重要角色。［3］本研究通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，采用多年臨床經(jīng)驗(yàn)方泄?jié)峤舛痉綄?duì)UC大鼠進(jìn)行治療，并探討其作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物 由河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供的Wistar大鼠45只，體質(zhì)量220～250 g，雄性，健康清潔級(jí)。動(dòng)物等級(jí):一級(jí)。動(dòng)物合格證號(hào):1210003。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥物 泄?jié)峤舛痉?(魚(yú)腥草、黃連、黃芩、紅藤、敗醬草、車(chē)前子、半夏、葛根、薏苡仁、木香)為中藥復(fù)方，實(shí)驗(yàn)時(shí)采用醇提和水提相結(jié)合的方法濃縮至所需濃度，置4℃冰箱貯存?zhèn)溆谩Ｐ節(jié)峤舛痉降蛣┝拷M、高劑量組分別按10.0、20.0 g/kg給藥，相當(dāng)于成人用量 (1.45 g/kg)的7倍、14倍，柳氮磺胺吡啶片 (SASP)，規(guī)格:250 mg/片，上海中西醫(yī)三維制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào):20120518。將片劑研成細(xì)粉，過(guò)100目篩，用蒸餾水溶解為混懸液，按0.3 g/kg給藥。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法 將大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，隨機(jī)抽取8只作為空白組 (BK)，其余參照文獻(xiàn)［4-5］復(fù)制潰瘍性結(jié)腸炎動(dòng)物模型。隨機(jī)處死5只造模大鼠明確造模成功后，將剩余32只大鼠隨機(jī)分為模型組 (MK)、柳氮磺胺吡啶組 (SK)、泄?jié)峤舛痉降蛣┝拷M (LK)、泄?jié)峤舛痉礁邉┝拷M (HK)，每組8只。造模后第5天，BK正常喂養(yǎng);MK用0.9%氯化鈉10 mL/kg每日灌胃;SK、HK、LK分別用柳氮磺胺吡啶液、泄?jié)峤舛痉礁摺⒌蛣┝棵咳展辔?，連續(xù)14 d。

1.4 標(biāo)本采集 治療后第14 d，大鼠禁食不禁水24 h，斷頭取血2～4 mL，4℃ 3 000 r/min離心10 min，分離血清，-20℃保存;留取肛門(mén)至回盲部的結(jié)腸標(biāo)本8 cm，沿腸系膜縱行切開(kāi)，以冷生理鹽水沖洗掉腸內(nèi)容物，迅速放入液氮中冷凍，-70℃保存待測(cè)。

1.5 觀察指標(biāo) 用放射免疫法檢測(cè)UC大鼠血清IL-4、IL-6，采用北京普爾偉業(yè)生物科技有限公司試劑盒，操作按說(shuō)明書(shū)步驟進(jìn)行。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 13.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理。以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示數(shù)據(jù)，各組間采用單因素方差分析比較。以P＜0.05作為差異有顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

各組大鼠血清IL-4、IL-6含量結(jié)果詳見(jiàn)表1。健脾和中，防止苦寒之品傷及脾胃，共為佐藥。木香善行氣止痛，用于此處調(diào)暢氣機(jī)為使藥。諸藥合用共奏泄?jié)嵘濉⒔舛眷顫裰Α?/p>

西醫(yī)認(rèn)為白介素在免疫細(xì)胞的發(fā)育、分化、免疫應(yīng)答及某些細(xì)胞的激活過(guò)程中起重要調(diào)節(jié)作用。［2］炎癥發(fā)生前，細(xì)胞因子與抗炎細(xì)胞因子的平衡失調(diào)是UC發(fā)生重要機(jī)制。IL-4具有抑制炎癥的特性，可以抑制其他細(xì)胞因子 (包括IL-1、IL-8及TNF-α等)產(chǎn)生，［7］并抑制淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的產(chǎn)生和移動(dòng)，抑制超氧化物陰離子形成。研究表明將表達(dá)IL-4的重組人5型腺病毒載體，用于治療TNBS誘發(fā)的潰瘍性結(jié)腸炎，可使組織損傷顯著減輕。［3］IL-6是一種作用廣泛的促炎性因子，對(duì)中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生趨化是其主要作用，能刺激巨噬細(xì)胞或單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞及成纖維細(xì)胞合成前列腺素、細(xì)胞因子、血小板激活因子等炎性介質(zhì)，導(dǎo)致免疫反應(yīng)上調(diào)。［8］Daig 等［9］發(fā)現(xiàn)IL-6水平可以一定程度的反映UC病情。

本實(shí)驗(yàn)顯示，與空白組相比，UC大鼠血清IL-4含量降低、IL-6含量升高，差異有顯著性，治療后血清IL-4含量顯著提高，血清IL-6含量顯著下降，高劑量泄?jié)峤舛痉叫Ч鼮轱@著，提示泄?jié)峤舛痉街委煗冃越Y(jié)腸炎的機(jī)制可能與血清IL-4、IL-6含量變化有關(guān)，其機(jī)理可能為:該方通過(guò)提高UC大鼠血清IL-4含量，減少炎癥介質(zhì)釋放;降低血清IL-6含量，減弱炎性反應(yīng)，促進(jìn)潰瘍愈合。

3 討論

潰瘍性結(jié)腸炎 (UC)屬于炎癥性腸病，中醫(yī)學(xué)將其歸于“腹痛”“泄瀉”“痢疾”“腸風(fēng)”“腸毒”等病的范疇加以辨證治療。我們提出UC“濁毒”致病理論:濁毒壅盛，彌漫腸道，腸膜血絡(luò)受損，血敗肉腐，積滯成膿，腸道傳導(dǎo)失司而形成本病。泄?jié)峤舛痉揭浴靶節(jié)嵘?、解毒祛濕”為組方原則，方中魚(yú)腥草清熱解毒、消癰排膿;車(chē)前子清熱滲濕止瀉，兩藥合用散熱毒除濕濁，解毒消癰而止瀉共為君藥。黃芩、黃連清熱燥濕祛濁、瀉火解毒;［6］敗醬草清熱解毒、消癰排膿;半夏燥濕化痰、消痞散結(jié);紅藤清熱解毒散瘀、活血通絡(luò);諸藥合用有清熱毒化濕濁之功，共為臣藥。薏苡仁健脾滲濕、清熱排膿;葛根升陽(yáng)止瀉，二者同用升陽(yáng)

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