高效液相色譜法測(cè)定甲硝唑片的溶出度

北京市大興區(qū)藥品檢驗(yàn)所（102600）苗立紅

甲硝唑片臨床用于各種厭氧菌感染，還可用于阿米巴病，陰道滴蟲等。為《中國(guó)藥典》（2010版）二部收載的品種，其溶出度采用的是紫外分光光度法，而本文采用高效液相色譜法，結(jié)果準(zhǔn)確，操作簡(jiǎn)便。

1 儀器與試藥

島津LC—20AT高效液相色譜儀；賽多利斯精密天平CP225D；智能藥物溶出儀（D-800LS）。甲硝唑?qū)φ掌罚ㄖ袊?guó)食品藥品檢定研究院批號(hào)100191-200606）；甲硝唑片（批號(hào)121051）規(guī)格0.2g；甲醇為色譜純；水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱：十八烷基鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水（20：80）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為320nm；進(jìn)樣量10μl；柱溫30℃；流速1.0ml/min；理論塔板數(shù)按甲硝唑峰面積計(jì)算不低于2000。

2.2 溶液的配制

2.2.1 對(duì)照品溶液的配制 精密稱取甲硝唑?qū)φ掌?2.20mg，置50ml容量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為甲硝唑片溶出度的對(duì)照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的配制 按《中國(guó)藥典》（2010版）二部，以鹽酸溶液（9→1000）900ml為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為每分鐘100轉(zhuǎn)，依法操作，經(jīng)30分鐘時(shí)，取續(xù)濾液作為供試品溶液（0.45μm微孔濾膜），照2.1色譜條件測(cè)定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算每片溶出量，限度為標(biāo)示量的80%。

2.3 線性關(guān)系考察 精密稱取甲硝唑?qū)φ掌?5.00mg，置50ml容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻。分別精密量取1.0ml、2.0ml、3.0ml、5.0ml、10.0ml置10ml的容量瓶中，加流動(dòng)項(xiàng)至刻度，配成系列對(duì)照品溶液，按上述色譜條件進(jìn)樣測(cè)定峰面積為1607368、3215838、4723407、8036345、16064689。以峰面積Y對(duì)濃度X繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程Y=32172347X-26664，R=0.9999。結(jié)果表明，甲硝唑濃度在0.05～0.5mg/ml范圍內(nèi)，線性良好。

2.4 精密度試驗(yàn) 取對(duì)照品溶液10μl，連續(xù)進(jìn)樣五針（n=5）記錄色譜圖，其峰面積為7770765、7763699、7765574、7768326、7774289，平均峰面積為7768531測(cè)定RSD為0.05%。本方法精密度良好。

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取對(duì)照品溶液分別于0、2、4、6、12、24h進(jìn)樣1次，測(cè)定其峰面積為7776759、7780012、7775574、7788366、7780899、7781126，平均峰面積為7780456，RSD為0.1%.( n=6)，甲硝唑在24h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.6 加樣回收試驗(yàn) 取已知含量的甲硝唑片樣品3份，分別加入900ml溶出介質(zhì)，超聲使其溶解，濾過(guò)（0.45μm微孔濾膜），另取對(duì)照品適量加入，取續(xù)濾液10μl，注入色譜儀，記錄色譜峰圖，按外標(biāo)法計(jì)算回收率，得回收率為99.24%，RSD為0.26%。結(jié)果表明本方法回收率良好。

2.7 不同方法測(cè)定 取樣品三批次，按供試品溶液制備方法進(jìn)行操作，在2.1色譜條件下測(cè)定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算甲硝唑片溶出量，分別為91.56%、93.00%、90.26%。采用《中國(guó)藥典》（2010年版）二部收載的紫外分光光度法，分別為93.60%、91.10%、92.00%。

3 討論

本文采用的高效液相色譜法測(cè)定甲硝唑片的溶出度，專屬性強(qiáng)，準(zhǔn)確度高。在320nm的波長(zhǎng)處可有效避免雜質(zhì)干擾，主峰吸收也很強(qiáng)。還可與甲硝唑片的含量測(cè)定在同一色譜條件下同時(shí)測(cè)定，簡(jiǎn)單易行，線性良好。與藥典方法比較無(wú)明顯差異，可很好地用于該品種的質(zhì)量控制。