銀杏葉類脂和衍生物制備及其生物活性研究(摘要)

陶冉(1.中國林業(yè)科學(xué)研究院，北京 100091;2.中國林業(yè)科學(xué)研究院林產(chǎn)化學(xué)工業(yè)研究所，江蘇 南京 210042)

銀杏葉類脂成分主要包括烴類、聚戊烯醇類、萜烯醇類、甾醇類等化合物，銀杏葉聚戊烯醇是重要的銀杏葉類脂成分，具有抗病毒、提高免疫功能、肝細(xì)胞再生、抑制癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移等生物活性。本文主要研究銀杏葉類脂的化學(xué)成分，聚戊烯醇衍生物的合成以及抑菌和抗氧化作用，為銀杏葉資源有效生物活性成分的高效利用，擴(kuò)大其藥理藥效應(yīng)用范圍，以及保健功能產(chǎn)品和新藥的研究和開發(fā)提供必要的理論依據(jù)。

1)利用分子蒸餾以及多種色譜技術(shù)對(duì)銀杏葉類脂成分(結(jié)晶物、分子蒸餾輕餾分和重餾分)進(jìn)行系統(tǒng)分離，對(duì)銀杏葉類脂輕餾分進(jìn)行Py-GC-MS分析，結(jié)果:裂解后化合物中單萜、倍半萜類化合物，GC含量約為23%;長鏈醇(酮、酯)及二萜類化合物，GC含量約為47%;烷基酚、甾體類化合物，GC含量約為30%;從銀杏葉類脂成分分離得到了15個(gè)單體化合物，其中β-谷甾醇乙酯、棕櫚酸酰胺、三棕櫚酸甘油酯、正十一烷、β-石竹烯、異植物醇、橙花叔醇、芳樟醇和松油醇是首次從銀杏葉中分離得到。

2)給出聚戊烯醇同系物(C70～C120)的3D-DAD-HPLC(190～232 nm)光譜圖，并標(biāo)出了不同碳鏈的最大吸收波長。對(duì)聚戊烯醇α-終端單元的—OH基團(tuán)進(jìn)行化學(xué)結(jié)構(gòu)修飾，分別得到5種聚戊烯醇衍生物，并對(duì)其利用光譜進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征:通過乙酸酐酯化反應(yīng)合成得到聚戊烯基乙酸酯(GPA)，得率為91%;利用格氏試劑合成正戊基溴化鎂作為中間體，與聚戊烯醇偶合反應(yīng)合成正戊烷基聚戊烯(GAP)，得率為90%;利用格氏試劑合成(R)-4-芐氧基-2-甲基-1-丁基溴化鎂作為中間體，與聚戊烯醇偶合反應(yīng)合成聚戊烯基-3-異戊基芐醚(GPB)，得率為86%;利用三氯氧磷作為磷酰化劑，在堿性條件下將聚戊烯醇磷酰化為聚戊烯基二氯磷酸酯(GPD)，得率為90%;聚戊烯基二氯磷酸酯(GPD)經(jīng)過堿水解生成聚戊烯基單磷酸酯，繼而經(jīng)過無機(jī)堿成鹽為聚戊烯基磷酸酯二鈉鹽(GPP)，得率為79%。

3)利用濾紙片法測(cè)定樣品抑菌圈值，以及確定MIC、MBC、MFC值和FIC值等方法指標(biāo)來考察銀杏葉聚戊烯醇和15種類脂成分以及5種聚戊烯醇衍生物對(duì)5種不同菌種(沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、黑曲霉菌、大腸桿菌和枯草芽孢桿菌)的抑菌及協(xié)同作用，結(jié)果:橙花叔醇對(duì)4種細(xì)菌(沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和枯草芽孢桿菌)的抑菌活性均為最強(qiáng);芳樟醇對(duì)黑曲霉菌的抑菌活性最強(qiáng);當(dāng)β-石竹烯與銀杏葉聚戊烯醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)為43.42%∶56.58%時(shí)，抗枯草芽孢桿菌協(xié)同作用最佳;當(dāng)異植物醇與銀杏葉聚戊烯醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)為38.19%∶61.81%時(shí)，抗沙門氏菌協(xié)同作用最佳;聚戊烯基二氯磷酸酯(GPD)對(duì)5種菌種的抑菌活性均為最強(qiáng);當(dāng)銀杏葉聚戊烯醇與聚戊烯基磷酸酯二鈉鹽(GPP)質(zhì)量分?jǐn)?shù)比為62.59%∶37.41%時(shí)，抗沙門氏菌協(xié)同作用最佳。

4)利用DPPH、ABTS、超氧陰離子自由基和羥自由基法，結(jié)合Sigmoidal擬合曲線法求銀杏葉類脂分子蒸餾輕、重餾分不同極性餾分的IC50，評(píng)價(jià)所得各餾分的抗氧化性，結(jié)果:輕餾分中餾分2(95%石油醚/5%乙酸乙酯部位)在輕餾分各組中抗氧化性最強(qiáng);在超氧陰離子和羥自由基測(cè)定法中，銀杏葉聚戊烯醇的IC50均低于陽性對(duì)照組及其它各重餾分組。除陽性對(duì)照組(Vc和BHT)以及聚戊烯醇組之外，重餾分中餾分5(60%石油醚/40%乙酸乙酯部位)的抗氧化作用最強(qiáng)。

銀杏葉;類脂成分;聚戊烯醇;聚戊烯醇衍生物;抑菌;抗氧化