miRNA在肝細胞癌患者預后中的應用

文武等

[摘要] 越來越多的證據證實miRNA（microRNA）通過上調癌基因或抑制抑癌基因的表達，參與腫瘤的發生、侵襲轉移、血管形成和凋亡的過程，從而影響腫瘤患者的預后。肝細胞癌（HCC）是常見且侵襲性較強的惡性腫瘤之一，起病隱匿，發展迅速，惡性程度高，預后極差。究其關鍵原因是缺乏預測預后的高敏感度及高特異度的分子標志物。而目前研究發現，單個或聯合多個miRNA在HCC中的異常表達可預測患者的預后。

[關鍵詞] miRNA；肝細胞癌；預后

[中圖分類號] R735.7 [文獻標識碼] A [文章編號] 2095-0616（2014）03-37-03

miRNA（microRNA）是一類由長度約為18～25個核苷酸組成的單鏈非編碼微小RNA分子，廣泛存在于真核生物中，具有高度遺傳穩定性，曾作為秀麗小桿線蟲發育時序調節因子被首次報道。初始miRNA轉錄產物由核糖核酸酶Drosha和Dicerl進行剪接后形成成熟的miRNA[1]，后者主要通過與目的基因mRNA的3'UTR結合而使mRNA 降解或抑制其翻譯，進而發揮基因調節作用。miRNA可以通過多種途徑對腫瘤的發生、凋亡和侵襲轉移進行調控，從而影響腫瘤患者的預后。肝細胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是一種病死率高、生存期短的消化系統惡性腫瘤。在全球HCC每年新增病例國家中，中國排在第1位，占全球總發病率的一半。西方國家發病率雖不高但卻在逐年遞增[2]。眾所周知，如何改善HCC患者的預后，延長其生存期，是HCC研究中亟待解決的難題。目前大量研究表明miRNA異常表達跟HCC患者的預后密切相關，其給HCC患者的預后帶來了曙光?，F將就miRNA及其在HCC患者預后中的研究進展作一綜述。

1 miRNA的生物學特性

隨著測序技術的發展，越來越多的miRNA被發現，截至2011年miRbase已收錄140個物種的15 000條miRNA基因位點和17 000條不同的miRNA序列[3]。據保守估計，約60%～70%的人類蛋白編碼基因受到miRNA的調控[4]。miRNA在表達上具有保守性、時空特異性等特點，參與生命的生長發育過程。Robin等[5]研究發現與miRNA匹配的靶基因具有保守性，而這些現象也存在于脊椎動物中，表明這些miRNA的功能在動物進化過程中仍被保留。在生物體內的miRNA也表現為動態調控模式，不同的發育時期和不同的疾病狀態下，miRNA表現出時空特異性。從miRNA生物學特性可以看出，每一種細胞在每一個發育階段表達的miRNA模式也不同，這樣可以更細微、更有效地調控RNA 轉錄體的生成和降解，在組織發育中發揮重要作用。

2 miRNA在HCC預后中的應用

近年來，隨著miRNA研究的深入，miRNA可能成為某些腫瘤早期診斷、惡性分級及評價預后的重要指標[6]。目前有研究表明，發現miRNA與HCC臨床病理及生存預后相關性也越來越密切，單個或聯合幾個miRNA表達水平可以預測HCC的預后，血清miRNA與HCC相關性研究也日益增多。HCC中miRNA的高表達可能提示患者生存時間短，預后不良，這可能與miRNA發揮類似癌基因作用，促進HCC發生發展、侵襲轉移，降低放、化療敏感性具有相關性。反之，低表達的miRNA可能起抑癌基因作用，抑制HCC整個病變過程，從而改善預后。

2.1 單個miRNA與HCC的預后

Xie等[7]通過研究分析了hsa-miR-125b與75例HCC根治術后患者生存時間的相關性，單因素分析中顯示，高表達的hsa-miR-125b與HCC患者的生存時間延長顯著相關，分析hsa-miR-125b可能是影響HCC患者預后的預測因子。Chen等[8]采用K-M分析和多因素生存分析分析miR-203與66例HCC術后患者預后的相關性，發現miR-203在HCC中表達下調，miR-203過表達的HCC患者總生存期（OS）更長，高表達的miR-203是HCC預后良好的獨立預測因素，由此表明，miR-203可能是一個新的HCC預后標志物。Wang等[9]發現在HCC患者中，miR-199b高表達組的生存率和無病生存率均高于相對低表達組。Zhang等[10]發現miR-22的靶點為與轉移相關的組蛋白脫乙酰酶4（HDAC4），miR-22低表達者出現HDAC4的相對高表達，導致HCC術后較早轉移復發，預后較差。Coulouarn等[11]發現在早期肝癌中miR-122表達的明顯下調與肝癌后期轉移密切相關，并常伴有很差的預后。Ji等[12]發現miR-26表達相對低的患者比高表達者具有更長的生存期，且術后對干擾素治療有更好的反應。miR-145在HCC細胞及組織中的低表達，可能與HCC發生發展密切相關，并可能作為HCC的診斷及預后的指標[13]。韓中博等[14]報道miR-155在腫瘤復發的HCC中過表達，其表達水平越高，患者無瘤生存期越短，提示其可作為HCC肝移植術預后判斷的分子標志物。miRNA可用來預測肝癌術后轉移和復發、判斷患者生存率、指導術后輔助治療。

2.2 多個miRNA與HCC的預后

Jiang等[15]在43對HCC的癌和癌旁組織及12例正常肝組織中，應用實時定量PCR對182個miRNA前體進行篩查，顯示多個miRNA在HCC中有顯著性表達，如miR-199a、-21、-301等。與無肝硬化和肝炎基礎的組織相比，合并有肝硬化和乙肝病毒感染的癌旁組織中miRNA有表達增多。結合患者生存率分析發現，大部分低表達miRNA的患者生存率低，而高表達組的生存率較高。

2.3 血清miRNA與HCC的預后

有研究表明血清miRNA可作為腫瘤診斷和預后判斷的標志物[16]。Xiong等[17]發現HCC中miR-29b表達與肝癌的增殖、凋亡及預后密切相關，同時鄭建建等[18]研究分析血清miR-29b水平是影響HCC患者生存率的獨立危險因素之一，這有助于HCC的診斷和預后的評估。Li等[19]采用qRT-PCR技術檢測了46例HCC患者及20例健康正常對照組患者的血清miRNA，發現在HCC患者血清樣本中4種miRNA（miR-221、-222、-21、-224）不同程度的高表達，通過K-M生存分析表明，miR-221表達上調組的總生存率明顯低于表達下調組，結果表明，血清miR-221在預測HCC預后方面具有重要意義。有研究通過實時定量PCR技術檢測49例HCC患者的血清miRNA表達，發現miR-222在HCC患者血清中表達上調，應用Cox比例風險模型顯示TNM分期和miR-222表達水平是兩個主要的獨立預后因子[20]。血清miRNA 對于HCC預后判斷的研究不多，但由于其具有良好的穩定性、檢測的無創性、可重復性等自身特性使其應用于預后預測的價值日益受到重視。endprint

3 miRNA在HCC患者預后中應用的作用機制

HCC組織中高表達的miRNA調控下游靶基因起癌基因的作用，促進HCC的發生發展，致使預后不良，但是否可以通過干預機制調控該靶基因拮抗miRNA的過度表達，進而抑制HCC的發生發展，提高患者的生存率，改善預后。反之，HCC組織中低表達的miRNA作用于下游靶基因可引發HCC的病變，促使其侵襲轉移，是否也可以通過干預機制調控靶基因使低表達的miRNA表達上調，從而抑制HCC的病變進程，以此來延長患者的生存時間。異常表達的miRNA是作用于何種靶基因，而靶基因又是通過何種干預機制調控miRNA，目前這些機制還不得而知，但隨著miRNA研究的逐步深入，這些調控機制也會逐漸揭曉，進而應用于臨床診斷與治療，為延長HCC患者的生存時間，改善預后帶來新的希望。

4 展望

miRNA給HCC患者的預后帶來曙光，其異常表達與HCC患者的預后密切相關，是HCC療效和預后判斷的有效預測因子。正確而充分認識HCC發病過程中的關鍵分子事件，誘導出與HCC發生發展密切相關miRNA的表達情況將會更好地重現HCC進展過程，對研究HCC的發病及轉移機制、改善預后，延長生存期等均具有非常重要的意義。

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（收稿日期：2013-12-03）endprint