浙江省金華地區(qū)系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者一級親屬抗核抗體譜檢測及意義

王穎芳 杜紅衛(wèi) 吳紅華 華麗 馬大慶 謝素紅 鄭昭璟

浙江省金華地區(qū)系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者一級親屬抗核抗體譜檢測及意義

王穎芳 杜紅衛(wèi) 吳紅華 華麗 馬大慶 謝素紅 鄭昭璟

目的 了解金華地區(qū)系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）患者一級親屬抗核抗體譜的分布及意義。 方法 收集SLE患者一級親屬162例以及80例健康體檢者，分別檢測自身抗核抗體譜、相關(guān)免疫學(xué)指標(biāo)情況，并進(jìn)行統(tǒng)計。 結(jié)果 162例SLE患者一級親屬中，確診為SLE 6例，3例為先證者母親，2例為先證者姐妹，1例為先證者子女,其患病率為3．7%，同時確診干燥綜合征（SS）2例、混合型結(jié)締組織病（MCTD）1例。剔除以上9例患者，其余153例“健康”一級親屬中ANA陽性15例（9．8%），抗Ro52陽性8例（5．2%），抗核小體陽性3例（2．0%），抗SSA陽性6例（3．9%），抗nRNP陽性9例（5．9%），抗心磷脂抗體IgG陽性11例（7．2%），抗心磷脂抗體IgM陽性3例（2．0%），抗ds-DNA陽性12例（7．8%）；IgG升高10例（6．5%），IgM升高12例（7．8%），IgA升高3例（2．0%）；補(bǔ)體C3下降9例（5．9%），補(bǔ)體C4下降6例（3．9%）。與健康對照組相比，SLE患者一級親屬中ANA、抗心磷脂抗體IgG、抗ds-DNA陽性率與健康對照組比較明顯升高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0．05），其余抗體及免疫球蛋白、補(bǔ)體的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0．05）。 結(jié)論 與正常人群相比，金華地區(qū)SLE患者一級親屬的ANA、抗心磷脂抗體IgG及抗ds-DNA陽性率明顯升高，為狼瘡的高危人群，需加強(qiáng)其篩查及隨診。

系統(tǒng)性紅斑狼瘡 一級親屬 自身抗體譜

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）是一種較為常見的可累及多系統(tǒng)的自身免疫性疾病，好發(fā)于年輕女性，可侵犯全身各個臟器，嚴(yán)重時危及患者生命，目前尚無根治性治療措施。現(xiàn)已明確，遺傳背景在SLE的發(fā)病中起重要作用，SLE具有明顯的家族聚集現(xiàn)象，SLE患者一級親屬是SLE的好發(fā)人群。出現(xiàn)各種抗核抗體是SLE患者最重要的血清學(xué)特征，超過95%的SLE患者血清抗核抗體陽性。Arbuckle等[1]研究發(fā)現(xiàn)，SLE患者在發(fā)病前數(shù)年，體內(nèi)已存在不同種類的抗核抗體，而在SLE發(fā)病前抗核抗體的種類、數(shù)量逐漸增多。筆者通過檢測金華地區(qū)SLE患者一級親屬的抗核抗體譜及其他免疫相關(guān)指標(biāo)，以了解以上指標(biāo)在金華地區(qū)SLE患者一級親屬中的分布情況并評估其意義，為金華地區(qū)SLE的預(yù)防提供方向，現(xiàn)報道如下。

1 對象和方法

1.1 對象 收集2009-08—2012-12在金華市中心醫(yī)院風(fēng)濕免疫科門診及住院的SLE患者88例，均來自浙江省金華城區(qū)及周邊郊縣。所有患者均符合美國風(fēng)濕病學(xué)會1997年修訂的SLE分類標(biāo)準(zhǔn)[2]，所使用的臨床及實(shí)驗(yàn)室資料以患者初診時的資料為準(zhǔn)，并且選擇初診醫(yī)院均為本院的患者。一級親屬包括：SLE先證者的父母、兄弟姐妹、子女，排除暴露于環(huán)境（長期室外工作紫外線照射）、藥物因素（有肼苯達(dá)嗪、普魯卡因酰胺、異煙肼、甲基多巴、奎尼丁、米諾四環(huán)素用藥史）及吸煙的一級親屬，共收集SLE患者一級親屬162例，其中先證者父母69例，子女55例，同胞兄弟姐妹38例；男59例，女103例；年齡4～68歲，平均（28.2±10.2）歲。選取性別、年齡與一級親屬組匹配的本院健康職工、大學(xué)生（來自金華職業(yè)技術(shù)學(xué)院及溫州醫(yī)學(xué)院）及職工子女80例作為健康對照組，排除免疫或免疫相關(guān)性疾病病史及家族史。本研究所有參與者均已知情同意。

1.2 方法 收集SLE患者一級親屬以及健康對照組的一般資料，即性別、年齡、職業(yè)、既往健康狀態(tài)、既往用藥情況、吸煙史及與先證者的關(guān)系等，檢測抗核抗體譜及其他免疫學(xué)指標(biāo)。抗核抗體譜項(xiàng)目包括：ANA及抗Ro52、抗PM-Scl、抗著絲點(diǎn)抗體、抗PCNA、抗核小體、抗組蛋白抗體、抗AMA-M2、抗核糖體P蛋白、抗SSA、抗SSB、抗Jo-1、抗nRNP、抗Sm、抗Scl-70、抗ds-DNA、抗心磷脂抗體等，同時檢測免疫球蛋白G、A、M及補(bǔ)體C3、C4等。比較不同SLE患者一級親屬（父母、同胞、子女）間抗核抗體譜等指標(biāo)的分布，以及SLE患者一級親屬組與健康對照組間的抗核抗體譜等分布情況。

1.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑及儀器 抗核抗體譜檢測使用歐蒙試劑盒、間接免疫熒光法；免疫球蛋白、補(bǔ)體檢測使用德靈儀器、免疫散射比濁法。所有入選的一級親屬及健康對照組的實(shí)驗(yàn)室檢查項(xiàng)目均由本院檢驗(yàn)科同1位副主任醫(yī)師完成。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件，計量資料以表示，SLE患者一級親屬組與健康對照組抗核抗體譜等陽性率的比較采用χ2檢驗(yàn)，當(dāng)頻數(shù)＜5時采用四格表資料的Fisher確切概率法。

2 結(jié)果

2.1 SLE患者一級親屬中結(jié)締組織病患病情況 162例SLE患者一級親屬中，確診為SLE 6例，其中3例為先證者母親，2例為先證者姐妹，1例為先證者女兒，金華地區(qū)SLE患者一級親屬SLE患病率為3.7%。除SLE外，確診為干燥綜合征（SS）2例（均為先證者母親），確診為混合型結(jié)締組織病（MCTD）1例（先證者姐姐）。

2.2 SLE患者一級親屬免疫學(xué)指標(biāo)檢測結(jié)果 剔除一級親屬中已確診的6例SLE、2例SS以及1例MCTD患者，153例SLE患者“健康”一級親屬的風(fēng)濕相關(guān)抗體檢測結(jié)果顯示，ANA陽性15例（9.8%），其中ANA滴度1∶100 9例，1∶160 3例，1∶320 3例，其核型顆粒型6例，均質(zhì)型4例，斑點(diǎn)型3例，核膜型2例。其他抗體陽性情況：抗Ro52陽性8例（5.2%），抗核小體陽性3例（2.0%），抗SSA陽性6例（3.9%），抗nRNP陽性9例（5.9%），抗心磷脂抗體IgG陽性11例（7.2%），抗心磷脂抗體IgM陽性3例（2.0%），抗ds-DNA陽性12例（7.8%）。免疫球蛋白及補(bǔ)體檢測結(jié)果顯示，IgG升高10例（6.5%），IgM升高12例（7.8%），IgA升高3例（2.0%）；補(bǔ)體C3下降9例（5.9%），補(bǔ)體C4下降6例（3.9%）。

2.3 SLE患者一級親屬組與健康對照組免疫學(xué)檢測結(jié)果的比較 與健康對照組相比，SLE患者“健康”一級親屬中ANA、抗核小體、抗SSA、抗nRNP、抗心磷脂抗體IgG、抗心磷脂抗體IgM、抗ds-DNA的陽性率及高免疫球蛋白、低補(bǔ)體血癥的發(fā)生率較高。其中ANA、抗心磷脂抗體IgG、抗ds-DNA與健康對照組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，而其他抗體及免疫球蛋白、補(bǔ)體與健康對照組比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義，詳見表1。

表1 SLE患者一級親屬組與健康對照組免疫學(xué)指標(biāo)檢測結(jié)果比較[例（%）]

3 討論

SLE好發(fā)于青年女性，尤其是20～40歲的育齡期婦女，男女之比為1∶3～1∶8，部分高達(dá)1∶10，幼兒及老年人亦可患病，但性別差異不明顯。目前世界SLE患病率為17/ 10萬～48/10萬[3]。SLE作為一種抗原誘導(dǎo)下的T細(xì)胞依賴性自身免疫疾病，以多種自身抗體的產(chǎn)生亢進(jìn)為特征。雖然具體的病因及發(fā)病機(jī)制尚不明確，但同卵雙生子和患者親屬的高共患率（29%～57%，10%～12%），以及多種基因與SLE的相關(guān)性均說明遺傳易感性是發(fā)病的主要因素[4-5]，SLE的家族聚集現(xiàn)象已得到公認(rèn)。目前，針對SLE患者親屬這一高危人群的免疫指標(biāo)分布情況的研究較少，國外有學(xué)者進(jìn)行初步SLE家系調(diào)查，結(jié)果顯示各種自身抗體如抗核抗體、抗心磷脂抗體等陽性率升高[6]，血沉、免疫球蛋白升高，低補(bǔ)體血癥也不少見。一些更細(xì)致深入的基礎(chǔ)研究顯示，“健康”的SLE患者一級親屬與患者一樣存在雌激素羥基化作用的增強(qiáng)，雌激素樣物質(zhì)產(chǎn)生增多，雌激素/雄激素比例升高，從而促進(jìn)體液免疫的亢進(jìn)[7]。

本研究收集了金華城區(qū)及周邊郊縣88例SLE患者的一級親屬共162例，在檢測其一級親屬自身抗體譜及其他免疫相關(guān)指標(biāo)分布情況的過程中，確診為SLE的一級親屬6例。有文獻(xiàn)報道SLE最常見的共患關(guān)系是手足（45%），其次是父母與子女（31%），最后是二、三級親屬（24%）[8]。本研究確診的6例SLE中包括3例先證者母親，2例先證者姐妹，1例先證者女兒，已根據(jù)其病情輕重選擇激素和（或）免疫抑制劑治療。本研究發(fā)現(xiàn)，金華地區(qū)SLE先證者一級親屬的SLE患病率為3.7%，該數(shù)據(jù)與既往相關(guān)報道相比略高。有報道顯示，SLE患者的所有一級親屬中約3%患病[9]，說明金華地區(qū)SLE先證者一級親屬的SLE患病率可能較一般水平略高。同時，在162例一級親屬中確診SS 2例、MCTD 1例，提示SLE患者一級親屬中其他結(jié)締組織病的發(fā)生率可能高于正常人，相關(guān)結(jié)論還需更科學(xué)、更大樣本的調(diào)查加以證實(shí)。

剔除一級親屬中已確診的6例SLE、2例SS以及1例MCTD患者，金華地區(qū)153例“健康”的SLE一級親屬免疫學(xué)檢測結(jié)果中，ANA陽性率較高（間接免疫熒光法，1∶100為陽性），共15例（9.8%），其中50歲以上6例（男2例，女4例）；ANA滴度1∶100 9例，1∶160 3例，1∶320 3例，其核型顆粒型6例，均質(zhì)型4例，斑點(diǎn)型3例，核膜型2例。ANA是SLE中最常見的自身抗體，據(jù)國外資料統(tǒng)計，SLE患者中ANA的陽性率為90%～96%，而SLE血親的陽性率為10%～12%[10]，其中一級親屬的ANA陽性率未見報道。因正常老年人的ANA陽性率本身較高（低滴度），故青年及兒童陽性者更值得關(guān)注。與健康對照組相比，金華地區(qū)SLE先證者“健康”一級親屬的ANA、抗ds-DNA及抗心磷脂抗體IgG陽性率明顯升高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）。抗ds-DNA對SLE的診斷有特異性，其他疾病少見。在SLE患者中的陽性率為30%～70%，并與狼瘡性腎炎及疾病活動關(guān)系密切[11-12]。只有Arbuckle等[1]報道過在診斷SLE前發(fā)現(xiàn)抗ds-DNA陽性，這對預(yù)示SLE的發(fā)生意義重大。本研究發(fā)現(xiàn)，12例抗ds-DNA陽性的一級親屬中，有2例ANA、抗Ro52、抗SSA同時陽性，但無其他異常，無法確診任何結(jié)締組織病。正常人中抗ds-DNA是陰性的，因此，其發(fā)生SLE的概率較其他親屬升高，需要嚴(yán)密隨訪。抗心磷脂抗體是一種以血小板和內(nèi)皮細(xì)胞膜上帶負(fù)電荷的心磷脂作為靶抗原的自身抗體，其免疫學(xué)分型有IgG、IgM和IgA 3類，其中高水平的IgG型對原發(fā)性抗磷脂綜合征（APS）的診斷最具有特異性。有報道認(rèn)為，SLE患者出現(xiàn)抗心磷脂抗體陽性更易發(fā)生高血壓、神經(jīng)系統(tǒng)癥狀和腎炎[13]。抗心磷脂抗體在SLE中的陽性率為10%～40%[14]，主要是IgG和IgM型，血栓形成、習(xí)慣性流產(chǎn)和血小板減少主要與IgG型的抗體相關(guān)，其滴度越高，越易發(fā)生并發(fā)癥。目前，SLE患者一級親屬的抗心磷脂抗體陽性率筆者在文獻(xiàn)檢索中未發(fā)現(xiàn)相關(guān)報道，本研究發(fā)現(xiàn)在153例SLE患者一級親屬中，抗心磷脂抗體IgG陽性11例、抗心磷脂抗體IgM陽性3例，其陽性率分別為7.2%、2.0%，其中抗心磷脂抗體IgG陽性率與健康對照組相比明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），提示金華地區(qū)SLE患者一級親屬中抗心磷脂抗體IgG陽性率較健康人群高，需要加強(qiáng)對SLE患者一級親屬抗心磷脂抗體篩查。

另外，SLE先證者“健康”一級親屬中抗核小體、抗SSA、抗nRNP、抗心磷脂抗體IgG陽性及高免疫球蛋白、低補(bǔ)體血癥的發(fā)生率雖然較高，與健康對照組比較無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。

綜上所述，與正常人群相比，金華地區(qū)SLE患者一級親屬的ANA、抗心磷脂抗體IgG及抗ds-DNA陽性率高。金華地區(qū)SLE患者一級親屬的SLE患病率（3.7%）可能較其他地區(qū)略高，與普通人群相比為高危人群，對該類人群應(yīng)定期進(jìn)行自身抗體譜及其他相關(guān)風(fēng)濕抗體、免疫指標(biāo)的篩查，加強(qiáng)隨診，以早期發(fā)現(xiàn)疾病、盡早干預(yù)。

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Antinuclear antibodies levels in first-degree relatives of patients with systemic lupus erythematosus

Objective To investigate the distribution of antinuclear antibodies level in first-degree relatives(FDR)of patients with systemic lupus erythematosus(SLE)．Methods Serum levels of antinuclear antibody and other autoantibodies were measured in 162 first-degree relatives of SLE patients and 80 healthy subjects in Jinhua region． Results Prevalence rate of SLE in first-degree relatives was 3．7%(6/162)．Among remaining 152 non-SLE first-degree relatives,antinuclear antibody (ANA),anti-Ro52 antibody,anti-nucleosome,anti-Ro/SSA antibody,anti-nRNP antibody,anticardiolipin antibody(ACA)-IgG, ACA-IgM and anti-ds-DNA antibody were positive in 15 cases(9．8%),8 cases(5．2%),3 cases(2．0%),6 cases(3．9%),9 cases(5．9%),11 cases(7．2%),3 cases(2．0%),12 cases(7．8%),respectively．Higher positive rate of ANA,(ACA)-IgG and anti-ds-DNA antibody were found in FDR of SLE patients than healthy control group(P＜0．05)．Conclusion The first-degree relatives of SLE patients have higher positive rate of ANA,(ACA)-IgG and anti-ds-DNA antibody,indicating high risk of SLE for FDRs．

Systemic lupus erythematosus First-degree Relatives Antinuclear antibodies

2014-08-26）

（本文編輯：嚴(yán)瑋雯）

（本文由浙江省醫(yī)學(xué)會風(fēng)濕病學(xué)分會推薦）

金華市科技研究計劃項(xiàng)目（2009-3-020）

321000 金華市中心醫(yī)院風(fēng)濕免疫科（王穎芳、杜紅衛(wèi)、吳紅華、華麗），保健科（謝素紅），檢驗(yàn)科（鄭昭璟）；金華市文榮醫(yī)院腎臟風(fēng)濕科（馬大慶）

王穎芳，E-mail：1427198357@qq.com