幾種中草藥提取物對念珠菌體外抑菌作用研究

倪 萍，牛婷婷

(1.新疆醫科大學 基礎醫學院 形態中心，新疆 烏魯木齊 830011；2.新疆伊寧縣中醫院 檢驗科，新疆 伊寧 835100)

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幾種中草藥提取物對念珠菌體外抑菌作用研究

倪 萍1，牛婷婷2

(1.新疆醫科大學 基礎醫學院 形態中心，新疆 烏魯木齊 830011；2.新疆伊寧縣中醫院 檢驗科，新疆 伊寧 835100)

目的：探討黃芩、薄荷、薰衣草等中草藥提取物對念珠菌體外抑菌作用。方法：采用水提醇沉法提出黃芩、薄荷、薰衣草的提取液，利用微量稀釋法體外測定不同草藥中提取物對念珠菌最低抑菌濃度(MIC)。結果：黃芩、薰衣草提取物對臨床念珠菌菌株均有一定的抑菌效果，其中薰衣草的抑菌效果最好，黃芩其次，薄荷不具備抑制念珠菌作用。結論：黃芩、薰衣草提取物具有一定的抑制白色念珠菌作用。

中草藥；白色念珠菌；抑菌作用

白色念珠菌是條件致病性真菌，存在于腸道、上呼吸道以及口腔中，一般情況下不會引起疾病，但當人體免疫力下降時就會侵入細胞引發疾病。近年來因皮質類固醇藥物、抗生素的濫用導致念珠菌感染的概率增加。鑒于此研究黃芩、薄荷、薰衣草3種中草藥提取液對念珠菌的體外抑菌作用，現將具體情況報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

黃芩、薄荷、薰衣草中草藥各500g(烏魯木齊中藥房)；白色念珠菌標準菌株(新疆醫科大學基礎醫學院形態中心微生物實驗室，經培養獲得2代典型菌落)。從新疆醫科大學第一附屬醫院臨床白帶、膿汁中分離出4株念珠菌菌株分別編號臨床1～4號。從微生物試劑公司購買沙氏培養基，培養基經高壓蒸汽滅菌后待其溫度降至50℃左右時根據無菌操作要求注入內徑為8cm的平皿中，輕輕搖晃使其在平皿底部均勻平鋪以備用；將2個制作好的沙氏平板放置于37℃孵箱中培養48h，未發現細菌表明合格。

1.2 方法

(1)配置中藥提取液。

分別取50g黃芩、薄荷、薰衣草進行粉碎處理，添加8倍蒸餾水浸泡30min，強火煮沸，改文火保持微沸狀態1h，同時進行攪拌操作趁熱進行過濾。向藥渣中添加適量蒸餾水煎煮30min，過濾后合并濾液。將水煎液濃縮至100mL后添加200mL的95%乙醇，添加過程中不斷地攪拌將含醇量控制在67%，進而析出雜質。靜置24h過濾，水浴蒸發至無醇味。向其中添加蒸餾水定容50mL，在55.6kPa條件下滅菌處理后備用[1]。

(2)測定抑菌效果。

待測菌株接種于沙氏培養基，35℃培養 24～48h，選取直徑2～3mm 的2～3個獨立菌落混懸于0.9% 鹽水中，用散射光細菌濁度儀，使其濃度為 0.5麥氏濃度，然后用沙氏液體培養基將菌懸液分別稀釋50倍、20倍使試驗細菌密度為(1×103～5×103)CFU/mL,每個測試孔的菌液量為100μL。

(3)藥敏測試標準。

標準酵母菌菌株對黃芩、薄荷、薰衣草單味中藥煎劑藥物敏感性測定( MIC測定) 均采用微量稀釋法，參照NCCLS(美國臨床實驗室標準化委員會)1997版M27-A方案[2]。

(4)MIC終點的判定。

培養48h后觀察結果，在不攪動的情況下與對照孔按下列標準比較，0: 肉眼觀察清晰; 1: 略模糊; 2: 濁度顯著減低；3:濁度輕度減低; 4 : 濁度未減低。取1 略模糊為判定終點。

2 結果

通過中藥煎劑藥敏試驗提示，黃芩、薰衣草等中草藥提取物均起到了抑制念珠菌的作用，薄荷提取物未見明顯抑菌作用，其中薰衣草的MIC值最低，抑菌效果最好。

標準株中，不同念珠菌對以上3種中藥的MIC值見表1。

3 討論

近年來臨床上免疫抑制劑、激素、抗生素等藥物的廣泛應用，導致致病真菌的耐藥性增強，一定程度上提高了念珠菌等真菌感染疾病的發病率。因此，研究副作用小、對真菌有較好治療作用且適宜免疫力低下患者的藥物顯得尤為重要。

表1 黃芩、薄荷、薰衣草提取物對念珠菌體外抑制MIC值比較 (μg/mL)

通過研究黃芩、薄荷、薰衣草提取物對念珠菌的抑菌作用，發現黃岑、薰衣草單味中草藥提取物對念珠菌均有一定的抑制作用，其中薰衣草提取物對念珠菌的抑菌作用稍好于黃芩。而其他文獻資料曾報道[3],甘草、知母等也能起到抑制念珠菌的作用，要想探究其和本文中不同中藥提取物念珠菌抑菌效果需做進一步的試驗。另外，王文花等[4]通過研究不同中草藥配伍情況發現。有些中草藥配伍后和單味藥對念珠菌的抑制作用有所差別，因此要想對比黃芩、薄荷、薰衣草等不同中草藥配伍和單味藥對念珠菌的抑制作用，仍需進一步研究。不過通過本研究明確了黃芩、薰衣草等中草藥提取物對念珠菌具有一定的抑制作用，而薄荷提取物無抑制念珠菌作用，此結論是否與中草藥產地或提取工藝有關，有待于進一步證實。

[1] 王柱華.10種中草藥乙醇提取物抗真菌作用研究[J].遼寧師范大學學報：自然科學版,2013(1):120-123.

[2] WANGER A,MILLS K,NELSON P W,et al.Comparison of Etest and National Committee for Clinical Laboratory Standards broth macrodilution method for antifungal susceptibility testing: enhanced ability to detect amphotericin B-resistant Candida isolates[J].Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 1995, 39(11): 2520-2522.

[3] 馬廉蘭,張文平,曾祥鳳,等.116種中草藥對白念珠菌的抑菌實驗[J].贛南醫學院學報,1998(3):4-7.

[4] 王文花,李勁松,肖晴晴,等.5種中藥體外抗白色念珠菌的實驗研究[J].廣西中醫學院學報,2010,13(3):54-55.

(責任編輯：李嵐春)

2014-01-22

倪萍(1978-)，新疆醫科大學講師，研究方向為微生物藥物藥理。

R285

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1673-2197(2014)08-0026-01