骨科藥酒的薄層鑒別研究

胡玉良

（廣州中醫藥大學附屬中山中醫院，廣東 中山 528400）

骨科藥酒的薄層鑒別研究

胡玉良

（廣州中醫藥大學附屬中山中醫院，廣東 中山 528400）

目的：建立骨科藥酒的薄層鑒別方法。方法：采用薄層色譜法對方中藥材進行定性鑒別研究。結果：在薄層色譜中分別檢出大黃、當歸、川芎、木香、石菖蒲、梔子的特征斑點，陰性對照均無干擾。結論：該方法簡便、專屬性強、重現性好，可用于骨科藥酒的質量控制。

骨科藥酒；大黃；當歸；川芎；木香；石菖蒲；梔子；薄層色譜法

骨科藥酒為我院制劑，由大黃、當歸、川芎、木香、石菖蒲、梔子等 15味中藥制成，具有活血化瘀、舒筋通絡的功效，臨床上用于治療急慢性跌打瘀傷。為控制該制劑質量及保證臨床療效的穩定，對骨科藥酒中的主要藥味大黃、當歸、川芎等進行了薄層色譜研究，參考《中國藥典》及有關文獻的方法進行改進并多次試驗摸索，找尋可作為骨科藥酒質量控制的方法。

1 實驗材料與儀器

1.1 實驗材料

骨科藥酒（由我院制劑室提供，批號：20120804、20120928、20121109），大黃（121249-201003）、當歸（120927-201014）、川芎（120918-200809）、木香（120921-201008）、石菖蒲（110757-201008）、梔子（120986-201007）等，均由原中國藥品生物制品檢定所提供。硅膠G薄層板（青島海洋化工廠分廠，批號為：20120418），薄層層析硅膠G（青島海洋化工有限公司分廠，批號：013012），羧甲基纖維素鈉（廣州市化學試劑玻璃儀器批發部，批號：960501）；其余試劑均為分析純。

1.2 實驗儀器

KQ3200E醫用超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）、JA1203電子天平（上海天平儀器廠）、電熱恒溫水浴鍋（上海衡平儀器儀表廠）、直熱式電熱恒溫干燥箱（廣州東方電熱干燥設備廠）。

2 方法與結果

2.1 大黃的薄層鑒別

取本品10 mL，加水 5 mL，鹽酸 1 mL，置水浴中加熱30 min，立即冷卻，用乙醚提取 2次，第1次 20 mL，第 2次 10 mL，合并乙醚提取液，揮干，殘渣加乙酸乙酯 1 mL使溶解，作供試品溶液。另取大黃對照藥0.5 g，加乙醇15 mL，超聲處理20 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水5 mL，鹽酸1 mL，使溶解，置水浴上加熱30 min，同法制成對照藥材溶液。缺大黃陰性樣品，按供試品溶液制備方法處理，制成陰性對照溶液。 照《中國藥典》（2010年版）一部薄層色譜法[1]試驗，吸取上述 3種溶液各5 μL，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠 G薄層板上，以石油醚（30～60℃）-甲酸乙脂-甲酸（15∶5∶1）的上層溶液為展開劑[2]，展開，取出，晾干，氨熏至斑點顯色清晰，分別于日光下和紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照無干擾。結果見圖1。

圖1 大黃TLC圖

2.2 當歸、川芎的薄層鑒別

取本品10 mL，加乙醚20 mL，超聲處理10 min，取乙醚液，蒸干[3]，殘渣加乙醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取當歸、川芎對照藥材各0.5 g，分別加乙醚20 mL，超聲處理10 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇 1 mL使溶解，作為對照藥材溶液。缺當歸、川芎陰性樣品，按供試品溶液制備方法處理，制成陰性對照溶液。照《中國藥典》（2010年版）一部薄層色譜法[1]試驗，吸取上述 4種溶液各5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯（4∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相對應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，陰性對照無干擾。見圖2。

圖2 當歸、川芎TLC圖

2.3 木香的薄層鑒別

取本品 20 mL，水浴加熱，揮去乙醇，加乙醚20 mL，密塞，超聲處理 15 min，取乙醚液，揮干，殘渣加乙酸乙酯[4]1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取木香對照藥材0.5 g，加乙醚20 mL，同法制得對照藥材溶液。缺木香陰性樣品，按供試品溶液制備方法處理，制成陰性對照溶液。依照《中國藥典》（2010年版）一部薄層色譜法[1]試驗，吸取上述3種溶液各5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-環己烷-甲醇（5∶3∶0.1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以 5%香草醛硫酸溶液，于105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照無干擾。見圖3。

2.4 石菖蒲的薄層鑒別

取本品20 mL，加石油醚（60～90℃）20 mL[1]，超聲處理 30 min，分取石油醚液，蒸干，殘渣加石油醚（60～ 90℃）1 mL使溶解，作供試品溶液。另取石菖蒲對照藥材0.2 g，加石油醚（60～90℃）20 mL，同法制成對照藥材溶液。缺石菖蒲陰性樣品，按供試品溶液制備方法處理，制成陰性對照溶液。照《中國藥典》（2010年版）一部薄層色譜法[1]試驗，吸取上述 3種溶液各 5 μL，分別點于同一硅膠 G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯（4∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，于紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相對應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，陰性對照無干擾。結果見圖4。

圖3 木香TLC圖

圖4 石菖蒲TLC圖

2.5 梔子的薄層鑒別

取本品40 mL，加在中性氧化鋁柱（100～200目，5 g,內徑2 cm）上，用乙醇40 mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加乙醇 1 mL使溶解，作供試品溶液。另取梔子對照藥材1 g，加75%乙醇10 mL，置溫水浴中浸泡 2 h，濾過，濾液作為對照藥材溶液。缺梔子陰性樣品，按供試品溶液制備方法處理，制成陰性對照溶液。照《中國藥典》（2010年版）一部薄層色譜法[1]試驗，吸取上述 3種溶液各5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（15∶40∶22∶10）為展開劑，在10℃以下展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在 110℃加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照無干擾。結果見圖5。

圖5 梔子TLC圖

3 討論

大黃的鑒別中，樣品加水及鹽酸后置水浴中加熱處理，在水解同時，除去乙醇，簡化了操作。鑒于當歸、川芎均為傘形科植物，含有相同的活性成分，如阿魏酸、蒿本內酯等，相互干擾，故采用缺當歸、川芎雙陰性的方法，同時鑒別兩種藥材。實驗中樣品和對照藥材處理多用超聲法，方法簡便，提取效果好。

本研究中所列薄層方法只采用了對照藥材，未使用對照品，條件允許情況下，可增加相應藥材的對照品作為參照物，使方法更完善。曾對處方中的其他藥味進行了研究，但結果均是陰性有干擾或樣品主斑點不明顯。原因可能是樣品中藥味眾多，混合后化學成分發生了變化，或者是不同藥材中含有相同成分物質（如乳香、沒藥）導致干擾，有待進一步研究。

本研究所采用的方法穩定，斑點顯色清晰，專屬性及重現性好，可作為骨科藥酒質量控制的方法。

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（2010年版）一部[M].北京：中國醫藥科技出版社，2010.

[2] 梁毅，高平，張勤.活血止痛合劑的薄層鑒別研究[J].時珍國醫國藥，2008，19（9）：2210-2212.

[3] 李焰紅,王瑞媛.一柱天酒質量標準研究[J].山東醫藥工業，2003，22（6）：17-18.

[4] 郝麗靜，馮天鑄.五香止痛散質量標準研究[J].時珍國醫國藥，2007，18（12）：3076.

Study on the Orthopaedic Medicated Wine by TLC Identification Method

Hu Yuliang（Zhongshan Hospital of Guangzhou University of TCM，Guangdong Zhongshan 528400，China）

Objective：To establish a TLC identification method for orthopaedic medicated wine.Methods：Using TLC method to identify qualitatively the medicines in the wine.Results：The characteristic spots of rheum,angelica sinensis,ligusticum wallichii,radix vladimiriae,rhizome and jasmine were detected respectively by TLC and the negative controls showed no interference.Conclusion：This method was convenient and characteristic with good reproducibility,and it can be used for the quality control of orthopaedic medicated wine.

Orthopaedic Medicated Wine；Rheum；Angelica Sinensis；Ligusticum Wallichii；Radix Vladimiriae；Rhizome；Jasmine；TLC

10.3969/j.issn.1672-5433.2014.05.007

2014-02-08）

胡玉良，女，主管藥師。研究方向：醫院藥學。E-mail：86841068@qq.com