胃消合劑質量標準研究

呂 科，蔣志芳，封浩得

（四川省安岳縣人民醫院藥劑科，四川 資陽 642350）

胃消合劑由白術、枳實、黃連、厚樸、陳皮、吳茱萸、合歡皮、茯苓、玄胡索等組方，為我院治療慢性胃炎的院內制劑，具有健脾和胃、疏肝解郁、行氣止痛的功效，用于治療慢性胃炎、功能性消化不良。為了控制和提高藥品質量，筆者通過薄層色譜（TLC）法對白術、玄胡索進行定性鑒別，采用高效液相色譜（HPLC）法對黃連中主要成分鹽酸小檗堿進行含量測定，現報道如下。

1 儀器與試藥

LC－4A型高效液相色譜儀（日本島津公司）；SPD－10AVP型檢測器（日本島津公司）。鹽酸小檗堿對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號為110713－200609）；胃消合劑（四川省安岳縣人民醫院制劑室，川藥準字 SZBZ20070581，批號分別為090307，100311，110317）；水為純化水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2．1 TLC法鑒別試驗

白術[1]：取3個批號本品各15 g，剪細，加硅藻土 15 g，研勻，加環己烷40 mL，回流提取15 min，濾過，濾液置旋轉薄膜蒸發儀上濃縮至0．5 mL，作為供試品溶液；另取白術對照藥材 0．5 g，同法制成對照藥材溶液；稱取白術陰性樣品，同供試品溶液制備方法制成缺白術的陰性對照品溶液。照文獻[1]中TLC法試驗，吸取上述3種溶液各5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90℃）－乙酸乙酯（50∶1）為展開劑，展開，取出晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰。結果，供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應的位置上顯相同顏色斑點，并顯一桃紅色主斑點，陰性對照品溶液則無此斑點。見圖1 A。

玄胡索[2]：取3個批號本品各15 g，研細，加甲醇 20 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液置水浴上蒸干，殘渣加水10 mL使溶解，加濃氨試液調至堿性，用乙醚充分振搖提取2次，每次15 mL，合并乙醚液，蒸干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液；另取玄胡索對照品藥材0．1 g，同法制成對照品溶液;稱取玄胡索陰性樣品，同法制成陰性對照品溶液。照文獻[2]中TLC法試驗。吸取上述3種溶液各2 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯－丙酮(9∶2)為展開劑，展開，取出晾干，置碘缸中約3 min后取出檢視。結果，供試品色譜中，在與對照藥材溶液色譜和對照品溶液色譜相應的位置上顯相同顏色的熒光斑點，陰性對照品溶液無干擾。見圖1 B。

圖1 薄層色譜圖

2．2 含量測定

2．2．1 色譜條件與系統適用性試驗

色譜柱：Agilent Zorbax SB － C18柱 （250 mm ×4．6 mm，5 μm)；流動相：乙腈 － 0．03 mol／L 磷酸二氫鉀（45 ∶55）；流速 1．0 mL ／min；柱溫：30℃；檢測波長:265 nm。在上述條件下，鹽酸小檗堿色譜峰與其他組分色譜峰分離完全，陰性樣品溶液無干擾，色譜圖見圖2。

2．2．2 溶液制備

精密稱取鹽酸小檗堿對照品適量，加甲醇稀釋成每1 mL含60 μg的溶液，即得對照品溶液。精密量取本品 50 mL，用 80%甲醇萃取3次，合并萃液減壓蒸餾至浸膏狀，用流動相稀釋至100 mL，濾過，即得供試品溶液。取不含鹽酸小檗堿的陰性樣品適量，同法制得陰性對照品溶液。

圖2 高效液相色譜圖

2．2．3 方法學考察

線性關系考察：精密吸取對照品溶液 1．0，2．0，3．0，5．0，10 μL注入高效液相色譜儀，按擬訂色譜條件測定鹽酸小檗堿峰面積。以鹽酸小檗堿峰面積積分值（Y）為縱坐標、進樣量（X）為橫坐標進行線性回歸，得回歸方程 Y＝4×106X－38 649(r＝0．999 9)。結果表明，鹽酸小檗堿進樣量在 0．062～1．804 μg范圍內與峰面積積分值呈良好線性關系。

精密度試驗：取同一對照品溶液，在擬訂色譜條件下連續進樣 6次，記錄峰面積。結果的 RSD為 0．7%(n＝6)，表明儀器精密度良好。

穩定性試驗：取同一供試品溶液（批號為090311）1份，分別在 0，2，4，8，12，24 h 時按擬訂色譜條件進樣測定。結果的 RSD 為0．87%，表明供試品溶液在24 h內穩定。

重復性試驗：精密量取樣品（批號為090311）50 mL，依法平行制備供試品溶液6份，測定鹽酸小檗堿含量。結果鹽酸小檗堿平均含量為 1．36 g／L，RSD 為 0．30% （n＝6）。表明該方法重復性良好。

加樣回收試驗：取已知含量的樣品0．9 mL，置10 mL容量瓶中，平行操作6次，加入適量鹽酸小檗堿對照品溶液，按供試品含量測定方法進樣測定，計算加樣回收率。結果見表1。

表1 鹽酸小檗堿加樣回收試驗結果（n＝6)

2．2．4 樣品含量測定

取樣品3批，依法制備供試品溶液，按擬訂色譜條件測定含量。結果批號為090307，100311，110317的樣品中鹽酸小檗堿含量分別為 1．32，1．41，1．33 g ／L。

3 討論

在鑒別白術時，由于蒼術酮成分不穩定，放置時間稍長，其檢出靈敏度大為降低，所以試驗時點樣溶液必須新制備。

在考察鹽酸小檗堿含量測定的樣品提取方法時，曾對比30，35，40℃的柱溫條件，結果鹽酸小檗堿色譜峰拖尾因子隨柱溫增加而增大，表明應使用較低柱溫或室溫下進行樣品測定，故最終確定柱溫為30℃。

參考文獻：

[1]王淑紅，宋瀟瀟，熊 英.參術健脾丸的質量控制方法[J].中國藥師，2008，11（9）：1 017．

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[M]．北京：化學工業出版社，2005：附錄 31，41，205．