辣蘿卜干中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測定分析研究

趙晶　張愛琳

摘要 [目的]了解寧河縣醬腌菜辣蘿卜干中防腐劑和甜味劑的使用情況，加強(qiáng)食品添加劑的監(jiān)測。[方法]通過薄層色譜法和高效液相色譜法對辣蘿卜干中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉進(jìn)行定性定量分析。[結(jié)果]分析表明，辣蘿卜干中苯甲酸含量為0.590 4 g/kg，山梨酸含量為0. 309 8 g/kg，糖精鈉含量為0. 090 8 g/kg，通過參考GB2760-2011《食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評價(jià)，樣品辣蘿卜干中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉均在限量使用范圍內(nèi)。[結(jié)論]研究可為醬腌菜生產(chǎn)企業(yè)采用食品添加劑提供一定的理論依據(jù)，保障消費(fèi)者食用安全、健康、放心。

關(guān)鍵詞 食品防腐劑；薄層色譜；高效液相色譜；辣蘿卜干

中圖分類號(hào) S609.9 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611（2014）20-06776-03

Analysis and Detection of Benzoic Acid， Sorbic Acid and Saccharin in Dried Radish Pickles

ZHAO Jing，ZHANG Ailin

（Ninghe Product Quality Supervision and Inspection， Tianjin 301500；College of Food Science and Biotechnology，Tianjin Agricultural University，Tianjin 300384）

Abstract [Objective] To understand the use of preservatives and sweetener in dried radish pickles and strengthen the monitoring of food additives. [Method] The benzoic acid， sorbic acid and saccharin sodium was analyzed in qualitative by means of the thin layer chromatography （TLC） and high performance liquid chromatography （HPLC） methods for spicy dried turnip. [Result] The results showed that the Benzoic acid content is 0.590 4 g/kg， sorbic acid content is 0.309 8 g/kg， saccharin sodium content is 0. 090 8 g/kg， by reference to the hygienic standards of using food additives GB2760-2011 standard to evaluate， benzoic acid， sorbic acid and saccharin sodiumin in the sample spicy dried turnip are within the scope of limited use. [Conclusion] The results could provide a safe use quantity standard for manufacturers and need to strengthen the supervision and monitoring， to ensure the health and safety of consumers in the future.

Key words Food preservatives； TCL； HPLC； Dried radish pickles

辣蘿卜干是一種獨(dú)具風(fēng)味、具有悠久歷史的食品，傳統(tǒng)蘿卜干利用食鹽腌漬及添加適量的防腐劑來保鮮防腐[1]。由于部分加工企業(yè)通過加大防腐劑和糖精鈉的使用量來抑制產(chǎn)品中的微生物，改善風(fēng)味和適口性，以延長其保存期，這也造成防腐劑和糖精鈉的超標(biāo)問題[2]。長期的研究表明，化學(xué)合成防腐劑和甜味劑存在致癌性、致畸性和易引起食物中毒等問題，已引起了人們的高度關(guān)注[3]。近年來，一系列由食品防腐劑使用不當(dāng)造成的安全事件層出不窮，已給人們敲響了警鐘，因此，食品防腐劑的安全性及檢測方法已成為公眾和行業(yè)共同關(guān)注的焦點(diǎn)[4]。目前，在食品工業(yè)中常用的酸性防腐劑大多為苯甲酸和三梨酸，甜味劑為糖精鈉。同時(shí)測定食品中多種防腐劑的技術(shù)，即食品防腐劑的同時(shí)檢測技術(shù)已逐漸成為目前防腐劑檢測領(lǐng)域新的研究點(diǎn)[5]。筆者針對辣蘿卜干中常見的防腐劑和甜味劑超標(biāo)問題，采用薄層色譜和反相高效液相色譜法相結(jié)合對辣蘿卜干腌菜中常用的防腐劑和甜味劑同時(shí)進(jìn)行測定，探討一種高效、便捷的測定方法，同時(shí)也為醬腌菜企業(yè)采用食品添加劑提供理論依據(jù)，保障消費(fèi)者食用安全、健康、放心。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1

樣品來源。 辣蘿卜干來自寧河縣超立食品廠。

1.1.2

主要試劑。標(biāo)準(zhǔn)品：苯甲酸、山梨酸、糖精鈉，均為分析純，含量>99.0%，天津科密歐。

試劑：甲醇、乙醇、乙腈，均為色譜純，含量為99.9%，上海國藥集團(tuán)；乙酸銨、乙酸鋅、乙醚、石油醚、氫氧化鈉、亞鐵氰化鉀、正丁醇、氨水、無水乙醇等化學(xué)試劑，均為分析純，天津科密歐；瓶裝純凈水，娃哈哈；蒸餾水，實(shí)驗(yàn)室制備；甲醇，色譜純。薄層板：為聚丙烯酰胺板，購自天津?yàn)榭粕锛夹g(shù)有限公司。

1.1.3

儀器及色譜條件。安捷倫1200高效液相色譜儀，PDA100光電二極管陣列檢測器紫外檢測，ZORBAX Eclipse XDBC18（4.6×150 mm，5 μm）色譜柱；流動(dòng)相：甲醇+乙酸銨 （5+95），流速 1 ml/min，檢測波長230 nm，進(jìn)樣量10 μl；吹風(fēng)機(jī)，層析缸，玻璃毛細(xì)管。

1.2 檢測方法和評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

薄層色譜法，參考中國輕工業(yè)出版社《食品分析》中的方法加以改進(jìn)進(jìn)行測定[6]。GB/T 23495-2009 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測定高效液相色譜法進(jìn)行定量測定；按照GB2760-2011《食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》（ 苯甲酸≤1.0 g/kg，山梨酸≤1.0 g/kg，糖精鈉≤0.15 g/kg） 進(jìn)行評價(jià)。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置

①苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：準(zhǔn)確稱取0.236 0 g苯甲酸鈉，加水溶解并定容至200 ml。此溶液1 ml相當(dāng)于含苯甲酸1.00 mg。

②山梨酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：準(zhǔn)確稱取0.268 0 g山梨酸鉀，加水溶解并定容至200 ml。此溶液1 ml相當(dāng)于含山梨酸1.00 mg。

③糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：準(zhǔn)確稱取0.170 2 g糖精鈉，加水溶解并定容至200 ml，此溶液中糖精鈉的含量為1.00 mg。

④混合標(biāo)準(zhǔn)使用液：分別準(zhǔn)確吸取不同體積苯甲酸、山梨酸和糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，將其稀釋成苯甲酸、山梨酸和糖精鈉含量為0、0.020、0.040、0.080、0.100、0.200、0.300 mg/ml混合標(biāo)準(zhǔn)使用液。⑤展開劑：正丁醇∶氨水∶無水乙醇=7∶2∶1；

顯示劑：溴甲酚紫-乙醇（50%）溶液（0.4 g/L），用氫氧化鈉溶液（4 g/L）調(diào)至pH為8。

1.4 樣品的處理

稱取辣蘿卜干2～3 g（精確至0.001 g）于研缽中研碎，用20 ml水分?jǐn)?shù)次清洗轉(zhuǎn)移至25 ml容量瓶中，加0.5 ml鹽酸（1+1）酸化，用15、10 ml乙醚提取2次，每次振搖1 min，將上層醚提取液吸入另一個(gè)25 ml帶塞量筒中，合并乙醚提取液。用3 ml氯化鈉酸性溶液（40 g/L）洗滌2次，靜止15 min，用滴管將乙醚層通過無水硫酸鈉濾入25 ml容量瓶中，加乙醚至刻度，混勻。吸取10.0 ml乙醚提取液分2次置于10 ml帶塞離心管中，在約40 ℃的水浴上揮干，加入0.10 ml乙醇溶解殘?jiān)迫腚x心管中，4 000 r/min離心5 min，吸取上清液，用微孔濾膜過濾，備用。

1.5 結(jié)果計(jì)算

薄層色譜的計(jì)算公式：

2 結(jié)果與分析

2.1 聚丙烯酰胺薄層色譜對苯甲酸和山梨酸的定性分析

從圖1可知，由2個(gè)薄層板對照顯色，可以定性判定辣蘿卜干中含有防腐劑山梨酸鉀和苯甲酸鈉，在該試驗(yàn)條件下苯甲酸和山梨酸的比移值分別為0.50和0.52，以斑點(diǎn)面積的大小不能夠準(zhǔn)確定性，所以采用液相色譜進(jìn)行定量分析。

2.2 外標(biāo)法繪制單一組分標(biāo)準(zhǔn)曲線

從圖2可知，采用外標(biāo)法對山梨酸、苯甲酸和糖精鈉進(jìn)行色譜分析，線性關(guān)系良好，山梨酸標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Y=58 093.88X-120.39，相關(guān)系數(shù)為0.999 6，殘留標(biāo)準(zhǔn)誤差為205.47；苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Y=34 186.01X-358.57，其相關(guān)系數(shù)為0.997 6，殘留標(biāo)準(zhǔn)誤差為279.65；糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Y=18 565.36X-18.94，相關(guān)系數(shù)為0.999 9，殘留標(biāo)準(zhǔn)誤差為13.13。

2.3 混合標(biāo)準(zhǔn)液RPLC測定分析

吸取10 μl混合標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液注入色譜儀中，根據(jù)保留時(shí)間定性，外標(biāo)峰面積法與標(biāo)準(zhǔn)比較定量。苯甲酸、山梨酸和糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)品色譜見圖3。從圖3 可知，苯甲酸保留時(shí)間為4.708 min，山梨酸保留時(shí)間為6.647 min，糖精鈉保留時(shí)間為8.822 min。

2.4 辣蘿卜干樣品RPLC測定

吸取10 μl 辣蘿卜干凈化液注入色譜儀中，根據(jù)保留時(shí)間定性，外標(biāo)峰面積法與標(biāo)準(zhǔn)比較定量分別計(jì)算出苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的含量，樣品圖譜見圖4。

根據(jù)圖4各組分含量，代入公式，計(jì)算出在辣蘿卜干中苯甲酸的含量為0.590 4 g/kg，山梨酸含量為0.309 8 g/kg，糖精鈉含量為0.090 8 g/kg。樣品結(jié)果按照GB2760-2011《食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》對苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的使用限量（MRL）進(jìn)行評價(jià)國標(biāo)限量，該辣蘿卜干中防腐劑苯甲酸鈉、山梨酸和糖精鈉均在合理使用范圍。

圖4 辣蘿卜提取液色譜

3 結(jié)論

薄層色譜法能夠快速簡便地判定樣品中是否含有食

品防腐劑，這為防腐劑的初篩提供了方便，再通過反相液相色譜能檢測多種防腐劑和甜味劑，線性關(guān)系良好。從隨機(jī)抽樣檢測結(jié)果來看，生產(chǎn)商同時(shí)使用了苯甲酸和山梨酸來對辣蘿卜干防腐保鮮，使用糖精鈉提升適口性，其含量均在使用限量內(nèi)。

有的廠家為保持產(chǎn)品的鮮度，超量使用防腐劑情況令人擔(dān)憂，尤其是夏季對于散裝醬腌菜中苯甲酸、山梨酸超標(biāo)率較高，今后還需關(guān)注對苯甲酸、山梨酸的監(jiān)測。甜味，適口性強(qiáng)，糖精鈉作為成本較低的甜味劑和防腐劑一樣都是由人工合成，企業(yè)為了改善食品的風(fēng)味而過多地加入糖精鈉，這些是造成防腐劑和糖精鈉超標(biāo)的主要原因。因此，食品衛(wèi)生監(jiān)督部門加大生產(chǎn)、流通各個(gè)環(huán)節(jié)監(jiān)督力度，定期監(jiān)測，以提高食品衛(wèi)生質(zhì)量，確保廣大消費(fèi)者的健康和安全。

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