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M2型抗線粒體抗體在原發性膽汁性肝硬化中的應用研究

2014-04-29 00:00:00楊興萍
藥物與人 2014年4期

摘要:目的: 探討M2型抗線粒體抗體診斷原發性膽汁性肝硬化的臨床價值。 方法 回顧分析48例原發性膽汁性肝硬化(觀察組)和40例其他原因導致肝硬化(對照組)患者血清M2型抗線粒體抗體、堿性磷酸酶(ALP)及氨酰轉肽酶(GGT)檢測結果。 結果 觀察組患者血清M2型抗線粒體抗體檢測陽性率91.67%;高于對照組的2.50%,差異有統計學意義(P<0.05)。血清M2型抗線粒體抗體陽性與陰性患者ALP及GGT水平相似,差異無統計學意義(P>0.05)。 結論 原發性膽汁性肝硬化患者血清M2型抗線粒體抗體陽性率較高,有助于早期診斷,為臨床治療提供參考依據。

關鍵詞: 原發性膽汁性肝硬化;抗線粒體抗體; M2型

【中圖分類號】R575.22 【文獻標識碼】B 【文章編號】1002-3763(2014)04-0065-01

近年來,隨著檢驗醫學的飛速發展,敏感檢測方法相繼開展,無癥狀、無黃疸的原發性膽汁肝硬化早期診斷逐漸增多。文獻報道[1],抗線粒體抗體與原發性膽汁性肝硬化有關,高滴度的抗線粒體抗體是其主要的血清學指標,其中M2亞型具有特異性。本研究回顧性分析68例原發性膽汁性肝硬化患者M2型抗線粒體抗體檢測結果,報道如下。

1.資料與方法

1.1診斷標準 參照2009年美國肝病學會原發性膽汁性肝硬化指南中的診斷標準[2]:①存在膽汁淤積癥的生化學證據,主要是堿性磷酸酶(ALP)升高;②血清抗線粒體抗體陽性;③非化膿性破壞性膽管炎及小葉間膽管破壞的組織學證據。如果符合上述三個標準中的兩項即可診斷原發性膽汁性肝硬化。

1.2臨床資料 2010年1月~2014年1月,選取在我院診治的原發性膽汁性肝硬化患者48例(觀察組),其中男19例、女29例,年齡23~57歲,平均(45.57±8.19)歲。主要臨床表現:黃疸31例(64.58%)、疲乏26例(54.17%)、納差24例(50.00%)和皮膚瘙癢 19例(39.58%)。選擇同期在我院治療的其他原因導致的肝硬化(梗阻性黃疸及惡性腫瘤者除外)患者40例(對照組),其中乙肝肝硬化27例、酒精性肝硬化13例,男22例、女18例,年齡29~59歲,平均(46.90±8.43)歲。主要臨床表現:黃疸24例(60.00%)、疲乏20例(50.00%)、納差17例(42.50%)和皮膚瘙癢 12例(30.00%)。兩組患者年齡、性別及臨床表現相似,差異統計學意義(P>0.05),具有可比性。

1.3檢測指標及方法

1.3.1樣本收集 患者均于空腹清晨8:00時抽取靜脈血5 ml置入EDTA抗凝管中,常溫下3000 r/min離心10 min,分離血清保存于-70℃冰箱集中待測。

1.3.1生化指標 ALP及氨酰轉肽酶(GGT)采用全自動生化分析儀(日立7600—020)檢測。

1.3.2M2型抗線粒體抗體 M2型抗線粒體抗體酶免疫試劑盒由德國歐蒙醫學實驗診斷股份公司提供。操作步驟:①加樣。用100μL樣品稀釋液按1:200比例稀釋血清,將不同濃度的M2型抗線粒體抗體標準品及血清依次加入到已包被M2抗原的微孔中;在微振蕩器上進行振蕩混勻,室溫(18℃~24℃)孵育30 min,應用自動洗板機洗板3次,拍干。②酶結合物反應。將50μL已稀釋的堿性磷酸酶標記的抗人IgG加入相應微孔中,室溫條件下再次溫育30 min及洗滌、拍干。③顯色:各微孔依次加入50 μL底物液室溫下反應10 min,洗板、風干。④結果判斷:M2抗原包被區出現深藍或紫色條帶為陽性,無顏色為陰性。

1.4統計學處理 采用SPSS 17.0統計軟件進行數據分析處理,計數資料比較采用卡方檢驗,計量資料比較采用t檢驗,P<0.05為差異有統計學意義。

2.結果

2.1兩組患者血清M2型抗線粒體抗體檢測結果比較 觀察組患者血清M2型抗線粒體抗體檢測陽性44例,陽性率91.67%,陰性4例,陰性率8.33%;對照組患者血清M2型抗線粒體抗體檢測陽性1例,陽性率2.50%,陰性39例,陰性率97.5%;差異有統計學意義(P<0.05)。

2.2血清M2型抗線粒體抗體陽性與陰性患者生化指標比較 M2陽性組ALP為 256.91±34.75 U/L,GGT 274.33±38.41 U/L, M2陰性組ALP為 242.65±33.93 U/L, GGT 268.97±35.80 U/L. 血清M2型抗線粒體抗體陽性與陰性患者ALP及GGT水平相似,差異無統計學意義(P>0.05)

3.討論

原發性膽汁性肝硬化發病與自身免疫、病原微生物感染、接觸化學物品、遺傳和家庭因素有關,臨床主要表現為皮膚瘙癢、進行性黃疸、黃色瘤、肝脾腫大和后期出現門脈高壓癥,好發于中老年女性[3]。本研究顯示男:女為0.66:1,平均年齡(45.57±8.19)歲。原發性膽汁性肝硬化目前尚無有效的治療方法,所以早期診斷、及時治療對于改善患者的預后至關重要。抗線粒體抗體共有9各亞型,與原發性膽汁性肝硬化相關的有M2、M4、M8及M9亞型。M2是線粒體內膜抗體,可與多個抗原發生反應,最主要是與丙酮酸脫氧酶E2亞基,其次則是2-氧戊二酸脫氫酶復合物與2-氧戊二酸脫氫酶復合體的E2亞基。中M2診斷原發性膽汁性肝硬化的特異性抗體,主要原因:①靈敏度及特異度均達到95%以上[4]。②在疾病早期已經出現,甚至在無癥狀的體檢者中可出現,多年后大多數發展為原發性膽汁性肝硬化患者;③動物實驗證實M2抗原可誘導建立小鼠原發性膽汁性肝硬化模型,其生化與病理特征和人類相似, 進一步證實了M2在原發性膽汁性肝硬化發病中的重要作用[5]。本研究顯示,48例原發性膽汁性肝硬化患者血清M2型抗線粒體抗體陽性率高達91.67%,進一步證實了上述結論。國內文獻報道[6],5011名健康體檢者,8例檢出血清M2型抗線粒體抗體陽性,其中5例符合美國肝病學會推薦的原發性膽汁性肝硬化診斷標準,提示無癥狀者在我國也不少見,也說明懷疑該病者應早做M2亞型篩查。許峰[7]報道采用ELISA法檢測原發性膽汁性肝硬化患者血清M2型抗線粒體抗體水平,以25 RU/mL(95%上限為25 RU/mL)為臨界值,其靈敏度為95.2%,特異度為97.4%,診斷符合率達95.6%,陰性預測值98.7%,陽性預測值 90.9%,對其診斷原發性膽汁性肝硬化進一步量化。本研究還發現,M2型抗線粒體抗體無論是陰性還是陽性患者,其肝臟均具有以下病理改變:①膽管改變明顯,以小膽管最具特征性,膽管周圍見炎性細胞浸潤;②匯管區細胞浸潤現象明顯,甚至形成淋巴濾泡;③肝細胞改變相對較輕,缺乏特異性。所以,對M2型抗線粒體抗體陰性者,病理學檢查十分重要。ALP及GGT升高是原發性膽汁性肝硬化患者肝功能損害的特征性改變。本研究48例患者肝功能ALP及GGT均為陽性,較正常值高4~6倍。并且M2型抗線粒體抗體陰性及陽性患者,ALP及GGT水平無差異。

綜上所述,原發性膽汁性肝硬化早期臨床癥狀輕微且無特異性,極易誤診為病毒性肝炎或肝炎性肝硬化,臨床醫師有必要加強對原發性膽汁性肝硬化及M2型抗線粒體抗體的認識,將有助于患者獲得早期診斷和有效治療,對患者預后具有十分重要的意義。

參考文獻:

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[5]姜小華,仲人前,方曉云,等.抗線粒體抗體M2抗原誘導小鼠原發性膽汁性肝硬化模型的建立[J].中華肝臟病雜志,2006,14(3):202-204.

[6]姜小華,仲人前,方曉云,等.原發性膽汁性肝硬化特異性AMA-M2抗體在5011名體檢者中的篩查分析[J].中華檢驗醫學雜志,2003,26(8):553-555.

[7]許峰.血清抗線粒體抗體M2亞型檢測在原發性膽汁性肝硬化臨床診斷中的價值[J].診斷學理論與實踐, 2013,12(5):556-558.

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