樟芝的藥理作用及其培植方式的研究進展

摘要 樟芝富含多種生物成分，是一種藥用價值極高的藥用真菌。在此介紹了樟芝的藥理作用及其培植方式的最新的研究進展。

關(guān)鍵詞 樟芝；藥理作用；培植方式；研究進展

中圖分類號S572文獻標識碼A文章編號0517-6611（2014）29-10129-02

作者簡介陳清法（1984- ），男，山東聊城人，研究員，博士，從事樟芝的現(xiàn)代化研究。*通訊作者，研究員，從事樟芝的現(xiàn)代化研究。

樟芝（Antrodia cinnamomea），又名牛樟芝，是擔(dān)子菌綱多孔菌目真菌，富含多種生物活性成分，其子實體和菌絲體均可被食用，是一種藥用價值極高的藥用真菌。具有抗癌、保肝、抗炎、抗病毒、調(diào)節(jié)免疫力、抗氧化、降血脂等作用，是滋補強壯、扶正固本的珍品。筆者在此對樟芝的藥理作用及其培植方式的研究進展進行了介紹。

1樟芝的藥理作用機理

1.1抗腫瘤作用機理樟芝因其具有抗腫瘤的活性而廣受重視，不論在體外細胞試驗或是體內(nèi)的動物試驗中，都有文獻指出樟芝具有良好的抗腫瘤活性。Kuo等用樟芝子實體的乙醇提取物（EAC）處理人肝癌細胞Hep3B，結(jié)果發(fā)現(xiàn)EAC可以減少Hep3B細胞的增殖，達到誘導(dǎo)細胞凋亡的效果[1]。EAC能夠增加細胞間質(zhì)Ca2+的含量，以及增加鈣蛋白酶和caspase12的表達。Song等對樟芝發(fā)酵菌絲的甲醇提取物（MEM）作用于人肝癌細胞的效果進行了研究，結(jié)果表明MEM通過caspase3和caspase8的活化及阻斷細胞循環(huán)，實現(xiàn)對肝癌細胞增殖的抑制，從而達到誘導(dǎo)肝癌細胞HepG2的凋亡[2]。Hseu等對樟芝誘導(dǎo)人早幼粒細胞白血病HL60細胞的體外凋亡能力進行了研究，結(jié)果顯示樟芝可通過誘導(dǎo)細胞凋亡，而抑制HL60細胞的增殖和生長[3]。Liu等研究了樟芝的乙醇提取物（EEAC）對WEHI3 細胞的體外增殖和遷移的影響，結(jié)果表明，EEAC能夠減少WEHI3 細胞進入肝臟和脾臟的機會，從而使腫瘤細胞的生長能力降低[4]。Rao等證實從樟芝中分離得到的Antrocin作用于轉(zhuǎn)移性乳腺癌MDAMB231細胞（MMCs），可通過作為Akt/mTOR途徑的選擇性小分子抑制劑而實現(xiàn)對MDAMB231細胞的抑制作用[5]。Hseu等發(fā)現(xiàn)樟芝可通過調(diào)節(jié)Wnt/β catenin信號通路實現(xiàn)對黑色素瘤細胞的腫瘤抑制作用[6]。

1.2保肝機理樟芝具有解毒、抗癌及抗炎作用，為一本土性很強且非常具有經(jīng)濟效益的中藥及保健藥。Song等研究發(fā)現(xiàn)樟芝發(fā)酵液具有保護大鼠肝臟避免CCl4誘導(dǎo)的急性氧化傷害的能力，并初步推測其保肝活性和多糖、多酚及三萜類化合物有關(guān)[7]。Lu等研究了樟芝深層液體發(fā)酵液乙醇提取物（FrI）對大鼠肝臟乙醇誘導(dǎo)的急性肝損傷和清除自由基的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)樟芝菌粉高、低劑量均可避免乙醇誘導(dǎo)的天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶以及丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶的血清水平的升高，且可以維持肝組織MDA水平，降低谷胱甘肽的水平，提高乙醇誘導(dǎo)引起的的肝臟谷胱甘肽過氧化物酶（GPx）以及谷胱甘肽還原酶（GR）水平的降低，說明其具有明顯的抗脂質(zhì)過氧化作用，其作用機制與上調(diào)肝臟GSH水平以及GSH相關(guān)酶系GPx和GR的活性有關(guān)[8]。

1.3抗炎癥機理截至目前為止，研究人員在樟芝中總共鑒定出了20幾種具有抗炎作用的化合物，包括琥珀/馬來酸衍生物、三萜類化合物、苯環(huán)型化合物、苯醌衍生物、多糖和其他化合物。Hseu等以巨噬細胞RAW264.7為研究對象，觀察液態(tài)深層發(fā)酵法培養(yǎng)的樟芝菌絲體的體外抗炎作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，樟芝菌絲體在0～50 μg/ml時無明顯的細胞毒性，但能顯著抑制RAW264.7細胞內(nèi)由脂多糖LPS引起的細胞因子NO和PGE2的產(chǎn)生，并降低他們的含量；進一步研究發(fā)現(xiàn)這些變化是由細胞內(nèi)iNOS和COX2蛋白表達量減少所致[9]。iNOS和COX2蛋白是細胞重要抗炎途徑之一NFκB途徑的關(guān)鍵蛋白，二者含量的減少說明樟芝菌絲體可以通過NFκB途徑來發(fā)揮體外抗炎作用。Chen等闡明了樟芝抗炎作用的分子機理，從樟芝子實體中分離純化出5種三萜類化合物antcin A、B、C、H、K，發(fā)現(xiàn)在5種化合物里面antcin A與糖皮質(zhì)類激素可的松（cortisone）和地塞米松（dexamethasone）的化學(xué)結(jié)構(gòu)最相似；由于結(jié)構(gòu)的相似，antcin A導(dǎo)致了人肺腺癌細胞A549中糖皮質(zhì)激素受體（GR）從細胞質(zhì)中易位至細胞核；由于antcin A的親脂性，很容易擴散通過細胞膜，接著與細胞質(zhì)的糖皮質(zhì)激素受體（GR）結(jié)合；與antcin A結(jié)合后，GR與熱休克蛋白分離，然后GR/antcin A復(fù)合物形成二聚物，最后易位至細胞核；在細胞核中GR/antcin A與目標基因的糖皮質(zhì)激素反應(yīng)元件（GRE）結(jié)合，來調(diào)控基因的表達，如抑制促炎蛋白的表達，增加抗炎蛋白的表達來發(fā)揮抗炎效應(yīng)[10]。

1.4免疫調(diào)節(jié)作用機理現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，部分中草藥具有免疫雙向調(diào)節(jié)功能，使過高或過低的免疫反應(yīng)恢復(fù)正常。它們作為免疫調(diào)節(jié)劑的物質(zhì)基礎(chǔ)是其所含多糖類、甙類、萜類、黃酮類以及揮發(fā)油等。孟繁岳等將H22瘤株腹水接種于小鼠的背部皮下，建造荷瘤小鼠模型，并喂以樟芝子實體粉末低劑量[40 mg/（kg·bw）]、中劑量[200 mg/（kg·bw）]和高劑量[1 000 mg/（kg·bw）]，結(jié)果表明，樟芝子實體能夠同時從免疫細胞和免疫分子水平提高荷瘤小鼠的抗腫瘤免疫功能，并表現(xiàn)出劑量依賴趨勢[11]。可見，樟芝子實體的抑瘤作用與其改善免疫系統(tǒng)狀態(tài)、增強機體抗腫瘤能力有關(guān)。

1.5其他作用機理很多研究證明，樟芝除以上功能之外，還具有抗氧化、降血壓、降血脂、抗血小板凝集、保護神經(jīng)等作用。Hseu等探索了樟芝菌絲體水提物對AAPH誘導(dǎo)下人體紅細胞溶血、脂質(zhì)/蛋白質(zhì)過氧化反應(yīng)的抑制作用[12]。AAPH是一種水溶性自由基誘導(dǎo)物，它可以刺激體內(nèi)氧化反應(yīng)和過氧化氫自由基的生成，進而引發(fā)紅細胞被自由基損傷而引起一系列的病變。樟芝菌絲體水提物可以抑制AAPH所誘導(dǎo)的自由基損傷，有效減弱紅細胞的氧化溶血和脂質(zhì)過氧化作用，且對于胞質(zhì)抗氧化劑谷胱甘肽有保護作用[12]。Cheng等發(fā)現(xiàn)樟芝多糖可以通過抑制血管內(nèi)皮生長因子受體VEGF來阻斷VEGF誘導(dǎo)的內(nèi)皮細胞遷移和毛細血管樣血管形成，并抑制細胞周期蛋白D1的表達，從而抑制新血管的生成[13]。Li等研究發(fā)現(xiàn)樟芝可以減少模型試驗鼠頸動脈處新生血管形成外，有效地抑制PDGF引起的主動脈平滑肌細胞增殖和遷移，并減少頸動脈結(jié)扎引起的新生內(nèi)膜的形成[14]。說明樟芝具有很好地治療血脂異常和動脈粥樣硬化的功效。

2樟芝的培育方式

良好的藥理研究成果，推升了樟芝的應(yīng)用。由于資源有限，樟芝的培植技術(shù)成為另一個研究重點，現(xiàn)在人工培植的樟芝菌絲體和子實體在技術(shù)上均已成熟，且培育出的樟芝在總?cè)坪糠矫婵膳c野生樟芝相媲美。香港中醫(yī)科學(xué)院深圳樟芝實驗室所研發(fā)的富萜樟芝深層液體發(fā)酵等多種樟芝培植技術(shù)，使樟芝的人工培育技術(shù)得到了很大的突破，為樟芝得以廣泛開發(fā)應(yīng)用奠定了堅實的基礎(chǔ)。

2.1感染栽培和人工椴木栽培法可獲得人工子實體，活性成分接近野生樟芝，但賴以生長的牛樟椴木存量稀少，子實體生長過于緩慢，生產(chǎn)成本居高不下，且易于污染黃曲霉毒素、重金屬等有害成分，所產(chǎn)樟芝子實體質(zhì)量不易控制，很難實現(xiàn)標準化及規(guī)模化生產(chǎn)。

2.2固態(tài)發(fā)酵也叫太空包培養(yǎng)，固態(tài)發(fā)酵能明顯降低生產(chǎn)成本，生產(chǎn)周期可縮短至3個月左右，在一定程度上可實現(xiàn)自動化、工業(yè)化生產(chǎn)，發(fā)酵產(chǎn)物為樟芝菌絲體，總?cè)坪靠蛇_3%～5%，一般對發(fā)酵產(chǎn)物粗提后使用，效果不遜色于野生樟芝。但3個月生長周期仍然難以大幅度降低生產(chǎn)成本，大規(guī)模生產(chǎn)時難以實現(xiàn)自動化，菌絲體質(zhì)量參差不齊，品質(zhì)管理有難度。

2.3深層液體發(fā)酵是多數(shù)藥用真菌實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)的必然方式，具有自動化程度高、生產(chǎn)周期可大幅度縮短、生產(chǎn)成本低廉、質(zhì)量可控等優(yōu)點。香港中醫(yī)科學(xué)院[15-16]、深圳市仁泰生物科技有限公司、江南大學(xué)[17-18]等多個科研單位和生物技術(shù)公司都投入大量財力物力進行樟芝液體發(fā)酵產(chǎn)物的研究。目前通過液體發(fā)酵方式生產(chǎn)的樟芝總?cè)谱罡呖蛇_11.9%，超過了固體發(fā)酵和皿培式培植。三萜類化合物是樟芝的核心藥理成分，也是判斷樟芝原料優(yōu)劣的最重要指標，實現(xiàn)了高產(chǎn)三萜工藝，為樟芝的深入研究尤其以樟芝為原料生產(chǎn)抗癌藥物及抗肝損傷藥物奠定了基礎(chǔ)，這一研究成果必將極大地促進樟芝產(chǎn)業(yè)化進程。

3展望

樟芝作為臺灣的一種珍稀藥用真菌，從1990年在臺灣正式報道以來，受到研究者的重視也僅僅20年的時間，越來越多的研究從最初的總體提取物的生物學(xué)功能鑒定轉(zhuǎn)變?yōu)樘崛∥锏膯我换钚猿煞值奶囟üδ馨悬c的鑒定[19]。許多動物模型試驗被研究人員用來鑒定樟芝不同組分或活性成分在抗腫瘤、保肝、抗炎癥、免疫調(diào)節(jié)、抗氧化中的生物學(xué)活性。體內(nèi)試驗的樟芝的藥理作用機理可以應(yīng)用到未來的臨床研究中。

由于樟芝的資源稀少，市場價格十分昂貴，所以為了保護這種珍稀資源以及滿足人們?nèi)找嬖鲩L的需要，通過大規(guī)模的培養(yǎng)技術(shù)獲得三萜等有效組分或通過合成獲得樟芝的生物學(xué)活性組分等方法越來越被重視。盡管認為樟芝在很大程度上可以治療人類的健康狀況，然而目前樟芝只是作為一種食品補充劑而不是藥品在市場上流通，將來有望通過應(yīng)用臨床試驗方法將樟芝或樟芝中的某些成分轉(zhuǎn)變?yōu)樗幬铮瑥亩軌蜃屵@種珍貴的菌類物質(zhì)得到充分利用。

參考文獻

[1] KUO P L，HSU Y L，CHO C Y，et al.Apoptotic effects of Antrodia cinnamomea fruiting bodies extract are mediated through calcium and calpaindependent pathways in Hep 3B cells[J].Food and Chemical Toxicology，2006，44（8）：1316-1326.

[2] SONG T Y，HSU S L，YEN G C.Induction of apoptosis in human hepatoma cells by mycelia of Antrodia camphorate in submerged culture[J].Journal of Ethnopharmacology，2005，100（1/2）：158-167.

[3] HSEU Y C，YANG H L，LAI Y C，et al.Induction of Apoptosis by Antrodia camphorate in Human Premyelocytic Leukemia HL60 Cells[J].Nutrition and Cancer，2004，48（2）：189-197.

[4] LIU Y M，LIU Y K，LAN K L，et al.Medicinal Fungus Antrodia cinnamomea Inhibits Growth and Cancer Stem Cell Characteristics of Hepatocellular Carcinoma[J].EvidenceBased Complementary and Alternative Medicine，2013，2013：1-8.

[5] RAO Y K，WU A T H，GEETHANGILI M，et al.Identification of Antrocin from Antrodia camphorataas a Selective and Novel Class of Small Molecule Inhibitor of Akt/mTOR Signaling in Metastatic Breast Cancer MDAMB231 Cells[J].Chemical Research Toxicology，2011，24：238-245.

[6] HSEU Y C，TSOU H T，KUMAR K J S，et al.The Antitumor Activity of Antrodia camphoratain Melanoma Cells：Modulation of Wnt/βCatenin Signaling Pathways[J].EvidenceBased Complementary and Alternative Medicine，2012，2012：1-14.

[7] SONG T Y，YEN G C.Protective Effects of Fermented Filtrate from Antrodia camphorata in Submerged Culture against CCl4Induced Hepatic Toxicity in Rats[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry，2003，51：1571-1577.

[8] LU Z M，TAO W Y，XU H Y，et al.Further studies on the hepatoprotective effect of Antrodia camphoratain submerged culture on ethanolinduced acute liver injury in rats[J].Natural Product Research，2011，25：684-695.

[9] HSEU Y C，WU F Y，WU J J，et al.Antiinflammatory potential of Antrodia Camphorata through inhibition of iNOS，COX2 and cytokines via the NFκB pathway[J].International Immunopharmacology，2005，5：1914-1925.