摘要:激光共聚焦顯微鏡(LSCM)是當今世界上最先進的分子細胞生物學分析儀器。它在熒光成像基礎上加裝激光掃描裝置,利用計算機進行圖像處理,利用紫外光激發熒光探針,從而得到細胞或組織內部微細結構的熒光圖像。目前在形態學、分子細胞生物學、神經科學、藥理學、遺傳學都有廣泛地應用,在腫瘤研究中更是成為新一代強有力的研究工具。
關鍵詞:激光共聚焦顯微鏡;腫瘤學;應用
激光共聚焦顯微鏡(laser scanning confocal microscope, LSCM)是在熒光成像基礎上加裝激光掃描設備,利用計算機進行圖像處理,使用紫外光激發熒光探針,以得到細胞或組織內部細微結構的熒光圖像。激光共聚焦顯微鏡(LSCM)目前在形態學、分子生物學、神經科學、藥理學、遺傳學、腫瘤學等醫學領域中得到了很好的應用,本文主要概述其在腫瘤學中的應用。
1基本原理
激光共聚焦顯微鏡(LSCM)利用激光掃描束經照明針孔形成點光源,對標本內平面上的每一點掃描,標本上的被照射點在探測針孔成像,由探測針孔后的光電倍增管或冷電耦合器件逐點或逐線接受,迅速在計算機監視器屏上形成熒光圖像,焦平面上的點同時聚焦于照明針孔,得到的共聚焦圖像是標本的橫斷面,此外在顯微鏡的載物臺上加一個微量步進馬達,使載物臺上、下移動,最小步進距離0.1μm,這樣細胞或組織各橫斷面的圖像都能清楚地顯示,實現\"光學切片\"的目的。
2熒光定性、定量
普通光學顯微鏡及電子顯微鏡僅能對腫瘤抗原進行定性分析,而對多標記細胞、組織標本的抗原表達、細胞結構特征以及抗腫瘤藥的作用機制等方面進行定量的觀察和監測,只能借助激光共聚焦顯微鏡來實現。……