乳腺癌中E—cadherin和p53的表達分析及其意義

摘要：目的 探討乳腺癌組織中E-cadherin和p53的陽性表達與浸潤轉移的關系。方法 選取2012年9月～2013年9月永州市中心醫院乳腺癌標本80例，采用免疫組化法檢測E-cadherin和p53蛋白的陽性表達情況。結果 ①E-cadherin、p53在80例乳腺癌組織中陽性表達率分別為70%（56/80）、66.2%（53/80）。②E-cadherin陽性表達隨組織學分級升高而降低（P<0.05），且有淋巴結轉移組E-cadherin的陽性表達率較無淋巴結轉移組低（P<0.05）。③p53陽性表達與組織學分級有關，且有淋巴結轉移組p53的陽性表達率較無淋巴結轉移組高（P<0.05）。結論 乳腺癌組織中E-cadherin和p53的表達可作為乳腺癌浸潤轉移潛能的判斷指標之一，具有重要的臨床意義\"

關鍵詞：乳腺癌；E-cadherin；p53；浸潤轉移

乳腺癌目前居女性常見惡性腫瘤的首位[1-2]，嚴重危害女性的健康。乳腺癌導致人死亡的關鍵在于癌細胞發生了轉移同時還侵襲身體的其它器官[3-4]，而淋巴轉移是乳腺癌的重要轉移途徑。其淋巴結轉移與否及組織學分級常被臨床作為選擇治療方法和判斷治療預后的重要參考指標。E-cadherin基因作為判斷乳腺癌轉移的重要標志物之一，具有重要臨床意義，p53作為評估乳腺癌變預后的另一指標，其在乳腺癌的發生、發展中也具有重要作用，且乳腺癌的淋巴結浸潤轉移的關系密切。本研究采用免疫組化sp法檢測80例乳腺癌組織中E-cadherin和p53蛋白的陽性表達情況，旨在探討乳腺癌組織中E-cadherin和p53的陽性表達與組織學分級、浸潤轉移的相關性分析。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2012年9月～2013年9月永州市中心醫院乳腺癌標本，均經兩名病理醫師閱片確診且均選取為非特殊性浸潤性導管癌80例。年齡32～78歲，平均45.3歲。根據WHO乳腺腫瘤病理學和遺傳學分類（2003）推薦的半定量組織學分級標準進行組織學分級，Ⅰ級20例，Ⅱ級32例，Ⅲ級28例。淋巴結轉移32例，無淋巴結轉移48例。

1.2主要試劑 E-cadherin單克隆抗體、p53單克隆抗體，sp試劑盒和DAB試劑盒均購于福州邁新生物技術有限公司。

1.3實驗方法 本實驗采用免疫組化sp法檢測。所有的標本均經10%中性福爾馬林固定，石蠟包埋，4um厚切片，常規石蠟切片HE染色，免疫組化采用S-P法。實驗步驟按說明書進行，檸檬酸緩沖液高溫高壓修復，DAB顯色，蘇木精復染。以E-Cadherin和p53陽性切片做陽性對照，以PBS液代替一抗做陰性對照。

1.4結果判定 E-Cadherin染色陽性信號位于在細胞膜或者細胞質，呈棕黃色顆粒。采用雙評分方法評定結果，按陽性細胞百分比例：無陽性細胞或者陽性細胞小于10%為0分，陽性細胞10%～30%為1分，陽性細胞31%～60%為2分，大于61%為3分，細胞不著色為0分，淡黃色為1分，黃色為2分，棕黃色為3分，兩項評分乘積小于6分為陰性表達，大于或等于6分為陽性表達。P53染色陽性信號位于細胞核，呈棕黃色顆粒，

1.5統計分析 應用SPSS17.0軟件進行χ2檢驗，若P<0.05差異有顯著性。

2 結果

2.1 E-cadherin和p53在乳腺癌中陽性表達E-cadherin和p53在80例乳腺癌組織中陽性表達率分別為70%（56/80）、66.2%（53/80），見表1。

2.2 E-cadherin和p53在不同組織學分級陽性表達E-cadherin陽性表達率在不同的組織學分級為I級95%（19/20）、Ⅱ級78.1%（22/32）、Ⅲ級42.8%（12/28）；p53陽性表達率在不同的組織學分級為I級55.0%（11/20）、Ⅱ級68.8%（22/32）、Ⅲ級71.4%（20/28），見表2。

.

2.3 E-cadherin和p53在淋巴結有無轉移的陽性表達E-cadherin陽性表達率在有淋巴結轉移組中為46.8%（15/32），無淋巴結轉移組中為85.4%（41/48）；p53陽性表達率在有淋巴結轉移組中為81.2%（26/32），無淋巴結轉移組中為56.2%（27/48），見表2。

3 討論

E-cadherin基因位于人類第16號染色體第16q22.1位點，一種單次跨膜糖蛋白，屬于細胞粘附分子蛋白質家族，廣泛表于各種組織中，它在維持上皮細胞之間粘附連接，保持組織結構的完整性起著重要的作用。E-cadherin是調節細胞與細胞間，細胞與基質間粘附反應的重要媒介，可以通過促進同型細胞間粘附，可以使癌細胞保持緊密連接，難以脫離原發灶進入脈管和淋巴結，故被認為是一個重要的腫瘤轉移抑制基因[5]。趙衛等[6]曾報道E-cadherin蛋白表達水平隨著腫瘤脈管浸潤和淋巴結轉移的發生，E-cadherin蛋白的表達明顯降低，隨著乳腺癌的病理學分級逐漸升高，E-cadherin蛋白的表達水平也逐漸降低。本研究中表明，淋巴結轉移的發生，E-cadherin蛋白的表達明顯降低，隨著乳腺癌的病理學分級逐漸升高，E-cadherin蛋白的表達水平也逐漸降低，與趙衛的報道較一致。這可能說明，E-cadherin過度表達時細胞粘附力增強，不易發生轉移和浸潤，而表達水平降低時導致細胞間的粘附作用力降低，癌細胞容易脫落，從而發生浸潤和轉移。

p53位于人17號染色體短臂上，分野生型和突變型。野生型作為一種抑癌基因，能抑制多種癌基因的轉化活性，而突變型p53可導致所編碼的蛋白功能喪失，可促進細胞的惡性轉化和增殖。野生型的p53半衰期短，免疫組化不易檢測到，突變型p53穩定性明顯增強，在細胞內聚集比正常細胞多很多倍，免疫組化易檢測到，且突變型p53見于多種惡性腫瘤中。林黎娟等[7]報道腋窩淋巴結轉移組p53陽性表達率57%；未轉移組，p53陽性表達率31%，轉移組p53陽性表達較未轉移組明顯增高。任秋華[8]報道p53蛋白表達與分級、轉移呈正相關，隨著組織學分級增高而陽性表達增高。本文研究表明p53蛋白表達在組織學分級I級與Ⅱ級、Ⅲ級表達有顯著差異，而在Ⅱ級和Ⅲ級之間表達沒有差異，與任秋華報道有不同，可能是由于標本數量有限沒有體現出之間的差異性。本研究中p53蛋白表達在淋巴結轉移中陽性表達率81.2%，無淋巴結轉移中陽性表達率為56.2%，與林黎娟報道較一致，淋巴結轉移組中p53陽性表達率明顯高于無淋巴結轉移組。眾多研究表明，P53蛋白的表達水平與乳腺癌的淋巴結轉移以及預后等有明顯關系，它可作為乳腺癌預后的一項重要參數。

惡性腫瘤的分化程度、侵襲力、轉移性是極其復雜的問題，不是某一兩個因素所左右的，惡性腫瘤的預后及高危因素與腫瘤的組織學分級及是否有淋巴結轉移息息相關。

本研究表明，E-cadherin和p53陽性表達率在淋巴結轉移中表達是呈負相關的，而在組織學分級中E-cadherin陰性表達率和p53陽性表達率呈正相關。因此E-cadherin和p53的聯合檢測可作為篩選乳腺癌高危患者的手段之一。

參考文獻：

[1]姜達.乳腺癌內分泌治療研究進展[J].腫瘤基礎與臨床，2012，25（1）：84-88.

[2]Siegel R，Ward E，Brawley O，et al.Cancer statistics，2011：the impact of eliminating socioeconomic and racial disparities on premature cancer deaths[J].CA Cancer J Clin，2011，61（4）：212-236.

[3]Giuliano AE，Hawes D，Ballman KV，et al.Association of occult metastases in sentinel lymph nodes and bone marrow with survival among women with early-stage invasive breast cancer[J].JAMA，2011，306（4）：385-393.

[4]Cheng X，Hung MC.Breast cancer brain metastases[J].Cancer Metastas is Rev，2007，26（3-4）：635-643.

[5]Nijkamp MM，Span PN，Hoogsteen IJ，et al.Expression of E-cadherin and vimentin correlates with metastasis formation in head and neck squamous cell carcinoma patients[J].Radiother Oncol，2011，99（3）：344-348.

[6]趙衛，陳芙蓉，任宏政等.E-cadherin蛋白在乳腺導管癌中的表達及意義[J].臨床醫學，2012，32（1）：28-30.

[7]林黎娟，林貞花，張錦輝等.乳腺浸潤性導管癌p53表達與腋窩淋巴結轉移的相關性分析[J].遼寧學院學報，2010，17（1）：31-33.

[8]任秋華，肖明明，侯慧等.ER、PR、C-erbB2、P53和ki-67蛋白在乳腺癌中的表達及其意義[J]中國腫瘤臨床與康復.2010，17（1）13-15.

編輯/蘇小梅