73例孕早期婦女紅細胞葉酸水平檢測分析

摘要：目的 檢測本地區73例孕早期婦女的紅細胞葉酸水平，為本地區制定育齡及孕期婦女增補葉酸預防NTDs的方案提供依據。方法 隨機抽取2012年1月～2013年6月于我院進行產前診斷及產前篩查的孕早期婦女73例，孕15～42d。抽取靜脈血4ml，化學發光免疫分析儀檢測紅細胞葉酸水平。結果 73例孕早期婦女的平均紅細胞葉酸水平為（780.5±194.2） nmol/L，有52例濃度低于預防NTDs的最低水平906 nmol/L。不同年齡組間的紅細胞葉酸水平沒有明顯差異，文化程度越高，紅細胞葉酸水平越高，濃度達到906 nmol/L的比例數也越高。結論 本地區孕早期婦女紅細胞葉酸水平大多低于預防NTDs的最低水平，應加強對孕前增補葉酸相關知識的宣教。

關鍵詞：葉酸；孕早期婦女；紅細胞；神經管畸形

葉酸是一種水溶性B族維生素，對細胞的分裂生長及核酸、氨基酸、蛋白質的合成起著重要的作用。孕早期是胎兒器官系統分化，胎盤形成的關鍵時期，細胞生長、分裂旺盛，因而孕婦對葉酸的需求量比正常人高[1]。研究表明，孕早期婦女葉酸缺乏是胎兒神經管畸形（Neural tube defects，NTDs）發生的主要原因，新生兒唇腭裂、先天性心臟病等出生缺陷也可能與葉酸缺乏相關[2]。葉酸水平的個體差異大，各地婦女紅細胞葉酸水平現狀不一。本研究通過檢測本地區73例孕早期婦女的紅細胞葉酸水平，觀察其低于預防NTDs最低水平（906 nmol/L）的人群比例，分析影響個體紅細胞葉酸水平的因素，為江門地區育齡婦女葉酸水平調查，以及制定育齡及孕期婦女增補葉酸預防NTDs等出生缺陷的方案提供依據。

1資料與方法

1.1一般資料 隨機抽取2012年1月～2013年6月于我院進行產前診斷及產前篩查的孕早期婦女73例，孕15～42d；年齡20～35歲，平均（26.7±3.4）歲；排除慢性肝、腎疾病及血液病等。

1.2方法

1.2.1儀器與試劑 DPC Immulite 2000全自動化學發光免疫分析儀（德國Siemens），全自動血細胞分析儀（法國Horiba ABX），葉酸測定試劑盒（化學發光法，包括檢測試劑、葉酸定標品、沖洗緩沖液、紅細胞緩沖液、底物和質控品）（美國Beckman）。

1.2.2 樣品收集與處理 使用肝素抗凝真空管采集空腹靜脈血4ml，溶血前取適量于全自動血細胞分析儀檢測紅細胞壓積（HCT/%）并記錄。全血樣本溶血檢測前可于2～8°C最多保存4h。將紅細胞葉酸溶血劑用25mL去離子水復溶，放置至少40min，直到完全溶解。慢慢的顛倒混勻全血標本數次以確定完全混勻后，吸取50μl全血加入到1mL溶血劑中進行溶血。慢慢的顛倒混勻數次并在室溫下避光保存至少90min以使其穩定，此溶血液可在3 h內使用全自動化學發光免疫分析儀檢測葉酸含量或在-20°C下保存30d。

1.2.3檢測方法 準備葉酸定標品S0、S1、S2、S3、S4和S5，濃度分別約為0、2.3、5.7、11.3、22.7和45.3 nmol/L，根據說明書進行設置定標、定標要求的輸入和回顧定標數據等內容，檢測各定標品的光量子值，根據光量子值和已知濃度之間的數學關系建立定標曲線。葉酸檢測試劑于2～10°C下保存2 h后才置于儀器使用，每個血液樣品設置三個復孔，根據儀器操作指南設置參數，檢測各樣品孔的光量子值，并根據存儲的定標曲線自動計算葉酸含量。

紅細胞葉酸含量（RBC Folate/nmol·L-1）：檢測結果乘以溶血液制備時的稀釋倍數21，將此結果除以該樣品的紅細胞壓積。

1.3統計學方法 用SPSS13.0統計軟件進行統計學的分析；計量資料用均值±標準差（x±s）表示，組間比較用t檢驗，數據處理前經正態性檢驗及方差齊性檢驗，顯著性水平定為雙側P<0.05。

2結果

2.1不同年齡組孕早期婦女紅細胞葉酸水平見表1 73例孕早期婦女中，年齡組20～30歲有55例，年齡超過30歲的有18例，兩年齡組的紅細胞葉酸含量相比沒有顯著性差異，但20 ～30歲年齡組的平均紅細胞葉酸含量較大于30歲年齡組的高。年齡組20～30歲的55例中，有40例濃度低于預防胎兒神經管畸形的最低水平906 nmol/L，比例為72.7%。年齡超過30歲的18例中，有12例濃度低于906 nmol/L，比例為66.7%。

2.2不同居住地孕早期婦女紅細胞葉酸水平見表2 73例孕早期婦女中，22例居住地為農村，51例居住地為城市，前者的平均紅細胞葉酸含量較后者低，且兩組間存在顯著性差異（P<0.05）。農村組中紅細胞葉酸含量低于906 nmol/L的有18例，比例為81.8%，明顯高于城市組的66.7%。

2.3不同文化程度孕早期婦女紅細胞葉酸水平見表3 文化程度在初中及以下的孕早期婦女有13例，高中組的有22例，兩組的紅細胞葉酸含量沒有顯著性差異，但高中組中紅細胞葉酸含量低于906 nmol/L的有17例，占77.2%，明顯比初中及以下組的84.6%要低。大專組和本科及以上組的平均紅細胞葉酸含量比前兩組高，具有顯著性差異（P<0.05）。本科及以上組和大專組中紅細胞葉酸含量低于906nmol/L的比例分別為54.5%和66.7%，明顯比前兩組低。

3討論

NTDs主要表現為無腦兒、腦膨出、腦脊髓膜膨出、隱性脊柱裂、唇腭裂等，但其發生機制仍不明確，可能的病因主要包括葉酸缺乏、葉酸代謝路徑發生異常、胚胎生長發育環境發生變化等[3]。研究發現，葉酸對NTDs具有很好的預防作用，通過檢測體內紅細胞葉酸水平，可了解地區育齡及孕期婦女的優生優育狀況，并指導增補葉酸預防NTDs的方案制定。

3.1本地區孕早期婦女紅細胞葉酸水平現狀 本研究73例孕早期婦女的平均紅細胞葉酸水平為（780.5±194.2）nmol/L，有52例濃度低于預防NTDs的最低水平906 nmol/L，高達71.2%。結果顯示，不同年齡組間的紅細胞葉酸水平沒有明顯差異，但30歲以上者只有66.7%濃度不足906 nmol/L，明顯低于30歲以下者；這可能是由于本研究中的18例30歲以上者多為學歷較高，對增補葉酸的認知程度深。Pfeiffer等人對1988～2010年間美國人口的葉酸水平進行調查，發現年齡高者葉酸水平更有可能偏高，尤其是60歲以上者[4]。此外，本研究中農村孕早期婦女的紅細胞葉酸水平明顯比城市孕早期婦女的低，與以往研究結果相符[5]。膳食結構、生活習慣以及對孕期保健知識的認知程度等的不同，可能是導致該結果的主要原因。文化程度越高，紅細胞葉酸水平越高，濃度達到906 nmol/L的比例數也越高，其中農村孕產婦文化程度較低者居多，主要原因可能是不同文化程度孕產婦的保健知識水平、來源途徑不同，從而對葉酸知識的掌握程度不同。

3.2本地區育齡及孕期婦女增補葉酸方案 含葉酸的食物很多，但葉酸極易被光、熱破壞，在食物貯存加工過程中損失率達80%，且生物利用率僅為45%左右，因此育齡婦女除了日常生活注重膳食結構外，還須通過口服葉酸制劑，體內的紅細胞葉酸水平才可達到預防NTDs的最低水平[6]。本研究中71.2%孕早期婦女體內紅細胞葉酸水平都低于預防NTDs的最低水平，尤其是文化水平低者及農村婦女，因此，須加強葉酸預防NTDs的宣教，將優生知識普及到基層。

研究發現，增補葉酸0.4 mg/d，8～12w后紅細胞葉酸平均濃度可超過906 nmol/L；增補葉酸0.8 mg/d，4w后紅細胞葉酸平均濃度可超過906 nmol/L[7]。孕3～6w是NTDs發生的高度敏感時期，因此，衛婦社于2009年發布的《增補葉酸預防神經管缺陷項目管理方案》中提出，一般待孕婦女從懷孕前3個月～懷孕后3個月以0.4 mg/d的劑量增補葉酸。墨西哥的一項研究顯示，育齡婦女連續3個月以5 mg/d的劑量補充葉酸，NTDs發生風險可降低50%，且療程結束1w后，其紅細胞葉酸水平仍處于較高水平[8]。

從本研究結果可看出，大多婦女體內紅細胞葉酸水平無法在NTDs發生的高度敏感時期達到最低預防水平，尤其是進行孕早期檢查后才開始按0.4 mg/d的劑量增補葉酸的婦女，因此，可考慮增大初始劑量，縮短葉酸水平提高的時間，但目前仍沒有相關的臨床研究數據，有待進一步驗證。

參考文獻：

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編輯/申磊