摘要:通過比較確定合理的木鱉子總生物堿提取方法,為進一步研究提供參考;利用酸水提取、醇提、有機溶劑提取,比較三種方法提取生物堿的產量;比較不同提取方法,發現酸水提取法得到的木鱉子總生物堿含量最高;酸水提取法是提取木鱉子總生物堿的最好方法,并且首次分離出木鱉子總堿。
關鍵詞:木鱉子;總生物堿;木鱉子總堿
木鱉子為葫蘆科植物木鱉Momordica cochinchinensis (Lour.) spreng. 的干燥成熟種子。味苦,微甘,性涼;歸肝、脾、胃經。具有散結消腫、攻毒療瘡的功效,用于瘡瘍腫毒,乳癰,瘰疬,痔瘺,禿瘡的治療[1]。查閱文獻發現木鱉子的研究較少,主要集中在中醫臨床使用、藥材真偽鑒別、化學成分及藥理方面,研究表明木鱉子中主要含有脂肪及脂肪酸、氨基酸及蛋白質、皂苷[2,3]等成分,對生物堿的研究尚未見報到。本文主要概述了不同提取工藝對木鱉子總生物堿產量的影響,為進一步研究提供參考依據。
1 資料與方法
1.1儀器 KQ5200型 超聲清洗器,昆山市超聲儀器有限公司;DHG-9050B型 電熱鼓風干燥箱,上海瑯玕實驗設備有限公司;YP2012電子天平,上海光正醫療儀器有限公司;ACS系列電子稱,中山市衡新電子有限公司;RE-52A旋轉蒸發儀,上海安亭儀器有限公司;蒸發皿;HH-8A型電熱恒溫水浴鍋,北京用光明醫療儀器廠。
1.2試藥 木鱉子,購于西安藥材市場,經鑒定為葫蘆科木鱉的干燥成熟種子;石油醚、鹽酸、冰醋酸、氨水、正丁醇、碘、碘化鉀、硅鎢酸、堿式硝酸鉍均為分析純;實驗用水為飲用水。
1.3試液 0.2%鹽酸溶液,6mol/L鹽酸溶液,硅鎢酸試液,碘化鉍鉀試液,碘碘化鉀試液。
1.4方法
1.4.1木鱉子總生物堿的提取
1.4.1.1酸水提取法 取木鱉子藥材1000g,粉碎,用紗布包裹置大燒杯中,加3倍量石油醚超聲浸提數次,30min/次,直到顏色變淺為止,收集每次浸提液,揮干殘渣中的試劑;再向殘渣中加入3倍量0.2%的鹽酸溶液,超聲浸提3次,合并酸液并過濾,收集酸濾液;將收集的酸液置于旋轉蒸發儀中濃縮至500ml,傾出,;濃縮液用氨水調節PH=10,過濾,濾液用正丁醇萃取2次,收集正丁醇相;水浴揮去萃取液中的正丁醇,得木鱉子提取物A粗品,粗品置鼓風干燥箱中80℃烘40min后,稱重得3.45g。
1.4.1.2醇提取法 取木鱉子藥材500g,粉碎,用紗布包裹置大燒杯中,加3倍量95%乙醇超聲提取30min,直至顏色變淺為止,收集醇提液;提取液用旋轉蒸發儀旋干,殘余物加0.2%鹽酸溶解后,過濾;濾液用氨水調節PH=10,過濾;堿液用正丁醇萃取,收集有機相,有機相水浴蒸干溶劑,得提取物B,稱重得0.19g
1.4.1.3有機溶劑提取法 取木鱉子藥材500g,粉碎,用紗布包裹置大燒杯中,加氨水潤濕藥材后,用正丁醇超聲提取30min,直至顏色變淺為止,收集提取液;提取液用旋轉蒸發儀旋干,殘余物加0.2%鹽酸溶解后,過濾;濾液用氨水調節PH=10,過濾;堿液用正丁醇萃取,收集有機相,有機相水浴蒸干溶劑,得提取物C,稱重得0.25g。
1.4.2試液的配制 0.2%鹽酸溶液:精密量取鹽酸10ml稀釋至2000ml,搖勻即得;6mol/L鹽酸溶液:取1ml鹽酸與等體積水溶解即得;硅鎢酸試液:取硅鎢酸10g,加水使溶解成100ml,即得;碘化鉍鉀試液:取堿式硝酸鉍0.85g,加冰醋酸10ml與水40ml溶解后,加碘化鉀溶液(4→10)20ml,搖勻即得;碘碘化鉀試液:取碘0.5g與碘化鉀1.5g,加水25ml 使溶解即得。
1.4.3生物堿的鑒定 取提取物A少量,用0.2%鹽酸溶液溶解后,分別吸取1ml放入三支試管中;再向三支試管中分別加入2滴硅鎢酸試液、碘碘化鉀試液、碘化鉍鉀試液,觀察。
提取物B、C的鑒別方法同提取物A鑒別方法,結果顯示三種提取物均與三種生物堿指示液反應顯陽性,證明三種提取物均為生物堿。
2 結果
見表1。
3 討論
在木鱉子的研究過程中,首次從木鱉子中分離出木鱉子總堿;并且通過對不同方法的比較,發現酸水提取法提取木鱉子總堿的產量最高。酸水提取的缺點是提取液雜質較多、濃縮麻煩,費時較多;醇提、有機溶劑提取省時省力,且提取液濃縮方便,但生物堿產量較低,而且溶劑相對較貴,有機溶劑提取法所用溶劑污染較大,對人體有害。綜合比較本文認為酸水提取法是木鱉子總堿的最好提取方法。
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編輯/哈濤