攀枝花煙草病毒病檢測與防治對策

摘要 采用酶聯免疫反應檢測技術（ELISA）對攀枝花煙區煙草病毒病發生情況進行檢測，分析了該次病毒病發生原因，并有針對性地提出了綜合防治措施。結果表明，從74份采集樣品中檢出煙草普通花葉病毒?。═MV）53份，檢出率71.62%；黃瓜花葉病毒?。–MV）41份，檢出率55.41%；馬鈴薯Y病毒?。≒VY）37份，檢出率50.00%；番茄花葉病毒病（ToMV）8份，檢出率10.81%。74份檢測樣品中受2種或2種以上病毒復合侵染的樣片有68份，檢出比91.89%。該次病毒病發生原因主要包括氣候因素、品種因素、病原因素和栽培管理因素；綜合防治措施包括控制傳染源、切斷傳播途徑、選種抗性品種、加強田間管理和藥劑防治。

關鍵詞 煙草；病毒病；酶聯免疫；防治措施

中圖分類號 S572 文獻標識碼 A 文章編號 0517-6611（2014）25-08600-03

Abstract The occurrence of tobacco virus diseases in Panzhihua was detected by enzymelinked immunoassay （ELISA）； the causes of viral disease were analyzed； and specific measures were put forward to control virus disease. Results showed that among 74 collected samples， 53 TMV samples were detected， with detection rate of 71.62%； 41 CMV samples， with detection rate of 55.41%； 37 PVY samples， with detection rate of 50.00%； 8 ToMV samples， with detection rate of 10.81%. 68 samples contained two or more viruses， and the detection ratio was 91.89%. The causes of viral disease concluded climatic factors， variety factors， pathogenic agent， cultivation and management. Some measures were put forward to control the occurrence of tobacco virus， such as controlling infection， cutting off the routes of transmission， selecting resistant varieties， strengthening field management and chemical control.

Key words Tobacco； Virus； ELISA； Prevention measures

煙草是攀枝花市主要經濟作物之一[1-2]。隨著近年全球氣候的變化，輪作制度得不到完全實施，抗病品種推廣面積有限，使得攀枝花市煙草病毒病發生有加重趨勢。病毒病被稱為植物的“癌癥”，沒有有效的防治措施，且易“一病多癥或多病一癥”，不易辨識。目前針對煙草病毒病的檢測方法主要有指示植物法、電鏡檢測法、血清學檢測法和分子生物學檢測技術[3]。筆者采用靈敏度高、準確性好、操作快速方便的酶聯免疫吸附法（ELISA）對攀枝花煙區煙草病毒病發生情況進行檢測，分析了病毒病發生原因，并提出了綜合防治措施，以期為控制煙草病毒病發生提供借鑒。

1 攀枝花煙草病毒病的檢測

1.1 材料與方法

2 攀枝花煙草病毒病的發生原因

2.1 氣候因素

全球氣候變化可能會導致病毒種群結構、介體昆蟲種類及數量和煙草自身抗性的改變，從而影響煙草病毒病發生情況[2]。例如暖冬的氣候特征使得越冬蚜蟲基數增大，導致TMV、CMV、TEV等蚜傳病毒病大規模發生[5]。旺長期至打頂期天氣多變，降溫導致寄主抵抗力降低，加重病毒病發生情況；大風天氣葉片相互摩擦，增加病毒病田間傳播機會；降雨使得土壤板結，透氣性變差，煙株生長勢和抵抗力減弱都會加重病毒病的發生[6]。

2.2 品種因素

目前四川煙區種植面積最大的云煙85、云煙87、紅花大金元等品種煙葉品質好、產值高，但都是較感病品種，一旦受到病毒病的侵染將會給產量、品質等帶來嚴重影響。據李斌等[7]的測算，當病情指數達到30以上時，產量損失可達50%，產值損失可達70%。中煙90、K326、NC82、CV91等品種也只是對某一種病毒病表現中抗，對2種及以上病毒病具有抗性的品種很少，目前從種質資源庫中僅鑒定出10余種[8]。種植品種結構單一、抗源遺傳基礎狹窄、抗性與品質兼優品種少、缺乏廣譜抗性品種都是導致攀枝花煙草病毒病嚴重發生的重要因素。

2.3 病原因素

隨著病毒病發生日趨嚴重，主要病毒病株系分化越來越復雜，目前已鑒定出TMV 4個株系，CMV至少3個株系[2]。不同株系在煙草上表現癥狀不盡相同，這是產生一病多癥的原因，增加了病毒病鑒別難度。在該次調查中發現攀枝花煙區TMV主要有2種表現癥狀，一是單純花葉，葉片顏色不均，厚薄不一形成泡狀；二是在葉面上產生不規則褐色壞死斑，從而使葉片畸形、皺縮。調查中發現CMV也有不同的表現癥狀，有的表現為沿葉脈兩側產生閃電狀壞死斑紋；有的則葉片葉基拉長，側翼拉緊，葉片革質化沒有油分，嚴重者呈鼠尾狀。另外，田間發病煙株往往是2種或多種病毒復合侵染，有的還與真菌和細菌性病害同時發生，不僅難以鑒定病原，更加重病害危害。

2.4 栽培管理因素

隨著農村種植結構的調整，設施蔬菜、花卉等經濟作物種植面積增加為病原及介體昆蟲提供了越冬場所，是導致病毒病連年發生的因素之一。常年連作病毒病源積累也使病毒病害逐年加重[9]。育苗及農事操作管理過程中規范化栽培措施得不到落實，增加了病毒病傳播的機會。

3 攀枝花煙草病毒病的防治措施

針對病毒病害應以預防為主，采取綜合防治措施，將損失控制在最低限度。

3.1 控制傳染源

研究表明，除TMV病原可在土壤中病株殘體上存活過冬外，CMV、PVY、TEV、PVX等多種病毒均需在活體寄主內越冬。寄主種類主要包括蔬菜、雜草、多年生樹木活體及繁殖體[10-11]，因此，煙田選地應遠離設施保護地和村莊，及時將病株殘體帶出煙田并集中焚毀處理，防除田間雜草，不與十字花科、茄科及葫蘆科作物輪作、鄰作、間作。

3.2 防治介體昆蟲，切斷傳播途徑

在危害煙草的20多種病毒病中，至少有16種病毒病可由介體昆蟲傳播[12-13]。傳播煙草病毒病介體昆蟲有30多種，多為刺吸式口器昆蟲，主要有蚜蟲、葉蟬、飛虱、薊馬、煙盲蝽、粉虱、跳甲等。影響最嚴重的是蚜蟲，刺吸煙株汁液，危害葉、莖、花和果，降低品質和產量，分泌蜜露影響光合作用，傳播TMV、TEV、PVY等多種病毒病，嚴重影響煙葉生產。防治介體昆蟲是控制煙草病毒病傳播和發生的有效措施之一，目前針對媒介昆蟲的防治措施主要有化學藥劑防治、物理防治、生物防治等。擬除蟲菊酯類、吡蟲啉、啶蟲脒等內吸性殺蟲劑對刺吸性口器昆蟲有良好的防治效果[14-16]，乳油劑型農藥在傳毒昆蟲防治中效果更加明顯；利用黃板誘捕煙蚜、銀灰色地膜趨避煙蚜，同時也能很好地保肥保墑促進煙株生長；選擇殺蟲劑時，注意保護介體昆蟲天敵資源，在團棵到旺長期施藥，重點噴灑幼嫩的葉、莖、葉背面等蚜蟲集中部位；適當調整移栽期，避開蚜蟲向煙田遷飛高峰期，降低介體昆蟲種群密度以減輕病毒病的傳播和發生。

3.3 選種抗性品種

選擇抗性品種是防治煙草病毒病最經濟有效的方式，根據往年病毒病發生情況選擇抗性品種可有效減輕病毒病的發生。目前國內外工作人員針對發生嚴重的病毒病已鑒定出多種抗性品種（表3），同時通過化學物理誘變、細胞工程、轉基因技術等對種植資源進行創新，獲得一些具有穩定優良抗性的品種，如PVY高抗品種NC744等[17]。

3.4 加強田間管理

苗床期注意環境衛生，對苗床、種子及操作工具進行消毒，及時清除帶病煙株。有機肥與化肥合理配比，適當提高鉀肥用量，施足底肥，及時追肥、培土、除草，促進煙株成長，增強自身抗病性。調整種植結構合理輪作，不與茄科、十字花科、葫蘆科作物輪作，與小麥、玉米等十字花科作物輪作或實行水旱輪作。推廣使用抑芽劑，也能減輕田間作業對病毒病的傳播。

3.5 藥劑防治

目前用于防治煙草病毒病的藥劑主要為營養調節劑和保護劑，包括抗病毒制劑、微量元素和生物活性物質等，尚無能夠有效清除煙株體內病毒的藥劑?？共《静⑽⒘吭丶吧锘钚晕镔|主要通過誘導植物產生抗病毒活性，或使病毒鈍化，以減弱病毒的侵染和繁殖，提高植物抗病性。相關研究表明，3.95%病毒必克可濕性粉劑、20%病毒A可濕性粉劑、5%菌毒清水劑、1.5%植病靈水劑、22%金葉寶等抗病毒制劑在生產上具有較好防效[18-21]。談文等[22]研究表明，鋅、銅、錳等微量元素能夠抑制煙草花葉病的發生，因此可于旺長期葉面噴施0.1%硫酸鋅提高煙株對病毒病的抵抗性。生物活性物質主要包括蛋白、多糖等，目前生產上使用較多的主要有超敏蛋白、氨基寡糖、水楊酸[23]、康壯素、食用菌浸提物[24]、中藥制劑的“除病毒9803”[25]等。

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