攀枝花煙草病毒病檢測與防治對(duì)策

摘要 采用酶聯(lián)免疫反應(yīng)檢測技術(shù)（ELISA）對(duì)攀枝花煙區(qū)煙草病毒病發(fā)生情況進(jìn)行檢測，分析了該次病毒病發(fā)生原因，并有針對(duì)性地提出了綜合防治措施。結(jié)果表明，從74份采集樣品中檢出煙草普通花葉病毒病（TMV）53份，檢出率71.62%；黃瓜花葉病毒病（CMV）41份，檢出率55.41%；馬鈴薯Y病毒病（PVY）37份，檢出率50.00%；番茄花葉病毒病（ToMV）8份，檢出率10.81%。74份檢測樣品中受2種或2種以上病毒復(fù)合侵染的樣片有68份，檢出比91.89%。該次病毒病發(fā)生原因主要包括氣候因素、品種因素、病原因素和栽培管理因素；綜合防治措施包括控制傳染源、切斷傳播途徑、選種抗性品種、加強(qiáng)田間管理和藥劑防治。

關(guān)鍵詞 煙草；病毒病；酶聯(lián)免疫；防治措施

中圖分類號(hào) S572 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611（2014）25-08600-03

Abstract The occurrence of tobacco virus diseases in Panzhihua was detected by enzymelinked immunoassay （ELISA）； the causes of viral disease were analyzed； and specific measures were put forward to control virus disease. Results showed that among 74 collected samples， 53 TMV samples were detected， with detection rate of 71.62%； 41 CMV samples， with detection rate of 55.41%； 37 PVY samples， with detection rate of 50.00%； 8 ToMV samples， with detection rate of 10.81%. 68 samples contained two or more viruses， and the detection ratio was 91.89%. The causes of viral disease concluded climatic factors， variety factors， pathogenic agent， cultivation and management. Some measures were put forward to control the occurrence of tobacco virus， such as controlling infection， cutting off the routes of transmission， selecting resistant varieties， strengthening field management and chemical control.

Key words Tobacco； Virus； ELISA； Prevention measures

煙草是攀枝花市主要經(jīng)濟(jì)作物之一[1-2]。隨著近年全球氣候的變化，輪作制度得不到完全實(shí)施，抗病品種推廣面積有限，使得攀枝花市煙草病毒病發(fā)生有加重趨勢(shì)。病毒病被稱為植物的“癌癥”，沒有有效的防治措施，且易“一病多癥或多病一癥”，不易辨識(shí)。目前針對(duì)煙草病毒病的檢測方法主要有指示植物法、電鏡檢測法、血清學(xué)檢測法和分子生物學(xué)檢測技術(shù)[3]。筆者采用靈敏度高、準(zhǔn)確性好、操作快速方便的酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）對(duì)攀枝花煙區(qū)煙草病毒病發(fā)生情況進(jìn)行檢測，分析了病毒病發(fā)生原因，并提出了綜合防治措施，以期為控制煙草病毒病發(fā)生提供借鑒。

1 攀枝花煙草病毒病的檢測

1.1 材料與方法

2 攀枝花煙草病毒病的發(fā)生原因

2.1 氣候因素

全球氣候變化可能會(huì)導(dǎo)致病毒種群結(jié)構(gòu)、介體昆蟲種類及數(shù)量和煙草自身抗性的改變，從而影響煙草病毒病發(fā)生情況[2]。例如暖冬的氣候特征使得越冬蚜蟲基數(shù)增大，導(dǎo)致TMV、CMV、TEV等蚜傳病毒病大規(guī)模發(fā)生[5]。旺長期至打頂期天氣多變，降溫導(dǎo)致寄主抵抗力降低，加重病毒病發(fā)生情況；大風(fēng)天氣葉片相互摩擦，增加病毒病田間傳播機(jī)會(huì)；降雨使得土壤板結(jié)，透氣性變差，煙株生長勢(shì)和抵抗力減弱都會(huì)加重病毒病的發(fā)生[6]。

2.2 品種因素

目前四川煙區(qū)種植面積最大的云煙85、云煙87、紅花大金元等品種煙葉品質(zhì)好、產(chǎn)值高，但都是較感病品種，一旦受到病毒病的侵染將會(huì)給產(chǎn)量、品質(zhì)等帶來嚴(yán)重影響。據(jù)李斌等[7]的測算，當(dāng)病情指數(shù)達(dá)到30以上時(shí)，產(chǎn)量損失可達(dá)50%，產(chǎn)值損失可達(dá)70%。中煙90、K326、NC82、CV91等品種也只是對(duì)某一種病毒病表現(xiàn)中抗，對(duì)2種及以上病毒病具有抗性的品種很少，目前從種質(zhì)資源庫中僅鑒定出10余種[8]。種植品種結(jié)構(gòu)單一、抗源遺傳基礎(chǔ)狹窄、抗性與品質(zhì)兼優(yōu)品種少、缺乏廣譜抗性品種都是導(dǎo)致攀枝花煙草病毒病嚴(yán)重發(fā)生的重要因素。

2.3 病原因素

隨著病毒病發(fā)生日趨嚴(yán)重，主要病毒病株系分化越來越復(fù)雜，目前已鑒定出TMV 4個(gè)株系，CMV至少3個(gè)株系[2]。不同株系在煙草上表現(xiàn)癥狀不盡相同，這是產(chǎn)生一病多癥的原因，增加了病毒病鑒別難度。在該次調(diào)查中發(fā)現(xiàn)攀枝花煙區(qū)TMV主要有2種表現(xiàn)癥狀，一是單純花葉，葉片顏色不均，厚薄不一形成泡狀；二是在葉面上產(chǎn)生不規(guī)則褐色壞死斑，從而使葉片畸形、皺縮。調(diào)查中發(fā)現(xiàn)CMV也有不同的表現(xiàn)癥狀，有的表現(xiàn)為沿葉脈兩側(cè)產(chǎn)生閃電狀壞死斑紋；有的則葉片葉基拉長，側(cè)翼拉緊，葉片革質(zhì)化沒有油分，嚴(yán)重者呈鼠尾狀。另外，田間發(fā)病煙株往往是2種或多種病毒復(fù)合侵染，有的還與真菌和細(xì)菌性病害同時(shí)發(fā)生，不僅難以鑒定病原，更加重病害危害。

2.4 栽培管理因素

隨著農(nóng)村種植結(jié)構(gòu)的調(diào)整，設(shè)施蔬菜、花卉等經(jīng)濟(jì)作物種植面積增加為病原及介體昆蟲提供了越冬場所，是導(dǎo)致病毒病連年發(fā)生的因素之一。常年連作病毒病源積累也使病毒病害逐年加重[9]。育苗及農(nóng)事操作管理過程中規(guī)范化栽培措施得不到落實(shí)，增加了病毒病傳播的機(jī)會(huì)。

3 攀枝花煙草病毒病的防治措施

針對(duì)病毒病害應(yīng)以預(yù)防為主，采取綜合防治措施，將損失控制在最低限度。

3.1 控制傳染源

研究表明，除TMV病原可在土壤中病株殘?bào)w上存活過冬外，CMV、PVY、TEV、PVX等多種病毒均需在活體寄主內(nèi)越冬。寄主種類主要包括蔬菜、雜草、多年生樹木活體及繁殖體[10-11]，因此，煙田選地應(yīng)遠(yuǎn)離設(shè)施保護(hù)地和村莊，及時(shí)將病株殘?bào)w帶出煙田并集中焚毀處理，防除田間雜草，不與十字花科、茄科及葫蘆科作物輪作、鄰作、間作。

3.2 防治介體昆蟲，切斷傳播途徑

在危害煙草的20多種病毒病中，至少有16種病毒病可由介體昆蟲傳播[12-13]。傳播煙草病毒病介體昆蟲有30多種，多為刺吸式口器昆蟲，主要有蚜蟲、葉蟬、飛虱、薊馬、煙盲蝽、粉虱、跳甲等。影響最嚴(yán)重的是蚜蟲，刺吸煙株汁液，危害葉、莖、花和果，降低品質(zhì)和產(chǎn)量，分泌蜜露影響光合作用，傳播TMV、TEV、PVY等多種病毒病，嚴(yán)重影響煙葉生產(chǎn)。防治介體昆蟲是控制煙草病毒病傳播和發(fā)生的有效措施之一，目前針對(duì)媒介昆蟲的防治措施主要有化學(xué)藥劑防治、物理防治、生物防治等。擬除蟲菊酯類、吡蟲啉、啶蟲脒等內(nèi)吸性殺蟲劑對(duì)刺吸性口器昆蟲有良好的防治效果[14-16]，乳油劑型農(nóng)藥在傳毒昆蟲防治中效果更加明顯；利用黃板誘捕煙蚜、銀灰色地膜趨避煙蚜，同時(shí)也能很好地保肥保墑促進(jìn)煙株生長；選擇殺蟲劑時(shí)，注意保護(hù)介體昆蟲天敵資源，在團(tuán)棵到旺長期施藥，重點(diǎn)噴灑幼嫩的葉、莖、葉背面等蚜蟲集中部位；適當(dāng)調(diào)整移栽期，避開蚜蟲向煙田遷飛高峰期，降低介體昆蟲種群密度以減輕病毒病的傳播和發(fā)生。

3.3 選種抗性品種

選擇抗性品種是防治煙草病毒病最經(jīng)濟(jì)有效的方式，根據(jù)往年病毒病發(fā)生情況選擇抗性品種可有效減輕病毒病的發(fā)生。目前國內(nèi)外工作人員針對(duì)發(fā)生嚴(yán)重的病毒病已鑒定出多種抗性品種（表3），同時(shí)通過化學(xué)物理誘變、細(xì)胞工程、轉(zhuǎn)基因技術(shù)等對(duì)種植資源進(jìn)行創(chuàng)新，獲得一些具有穩(wěn)定優(yōu)良抗性的品種，如PVY高抗品種NC744等[17]。

3.4 加強(qiáng)田間管理

苗床期注意環(huán)境衛(wèi)生，對(duì)苗床、種子及操作工具進(jìn)行消毒，及時(shí)清除帶病煙株。有機(jī)肥與化肥合理配比，適當(dāng)提高鉀肥用量，施足底肥，及時(shí)追肥、培土、除草，促進(jìn)煙株成長，增強(qiáng)自身抗病性。調(diào)整種植結(jié)構(gòu)合理輪作，不與茄科、十字花科、葫蘆科作物輪作，與小麥、玉米等十字花科作物輪作或?qū)嵭兴递喿鳌Ｍ茝V使用抑芽劑，也能減輕田間作業(yè)對(duì)病毒病的傳播。

3.5 藥劑防治

目前用于防治煙草病毒病的藥劑主要為營養(yǎng)調(diào)節(jié)劑和保護(hù)劑，包括抗病毒制劑、微量元素和生物活性物質(zhì)等，尚無能夠有效清除煙株體內(nèi)病毒的藥劑。抗病毒病劑、微量元素及生物活性物質(zhì)主要通過誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗病毒活性，或使病毒鈍化，以減弱病毒的侵染和繁殖，提高植物抗病性。相關(guān)研究表明，3.95%病毒必克可濕性粉劑、20%病毒A可濕性粉劑、5%菌毒清水劑、1.5%植病靈水劑、22%金葉寶等抗病毒制劑在生產(chǎn)上具有較好防效[18-21]。談文等[22]研究表明，鋅、銅、錳等微量元素能夠抑制煙草花葉病的發(fā)生，因此可于旺長期葉面噴施0.1%硫酸鋅提高煙株對(duì)病毒病的抵抗性。生物活性物質(zhì)主要包括蛋白、多糖等，目前生產(chǎn)上使用較多的主要有超敏蛋白、氨基寡糖、水楊酸[23]、康壯素、食用菌浸提物[24]、中藥制劑的“除病毒9803”[25]等。

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