懸浮培養法分離人前列腺癌PC—3細胞系類干細胞的實驗研究

摘要：目的 從人前列腺癌PC-3細胞系中分離鑒定前列腺癌干細胞。方法 分別用含血清及無血清培養基培養前列腺癌細胞系PC-3細胞，采用流式細胞術檢測細胞中前列腺癌類干細胞的比例。結果 PC-3細胞可以在無血清培養液中生存并形成可以穩定傳代的懸浮細胞球，細胞中CD44+、CD133+及SP細胞比例均顯著高于PC-3貼壁細胞的比例。結論 通過無血清懸浮聚球培養可以從PC-3細胞中簡便、高效地分離出前列腺癌類干細胞。

關鍵詞：前列腺癌；懸浮培養法；干細胞

前列腺癌是男性最常見的惡性腫瘤之一，通過手術切除、放療和內分泌治療等。傳統治療手段雖然可以獲得較好的早期療效，但并不能完全阻止前列腺癌的進展和復發。腫瘤干細胞（tumor stem cells，TSC）被認為是腫瘤發生、發展、轉移和復發的根源[1]。已有學者分別從乳腺癌和腦腫瘤等實體瘤中成功分離出相應的TSC。本文采用添加了生長因子的無血清培養基培養前列腺癌類干細胞，再通過流式細胞儀檢測其中具有干細胞特性的陽性細胞比例，并進一步鑒定其增殖等特性，從而為進一步深入研究人前列腺癌干細胞（human prostate cancer stem cell，hPCSC）奠定基礎，為前列腺癌的臨床診治提供新的思路。

1資料與方法

1.1一般資料 人前列腺癌PC-3細胞購自中國科學院昆明細胞庫。含血清培養基（serum-supple-mented medium， SSM）為含10%特級胎牛血清（中國BD公司）的DMEM/F12（1B1，美國Invitrogen/Gibc公司）培養基，并添加2 mmol/L L-谷氨酰胺（美國Sigma公司）；無血清培養基（serum-free medium， SFM）為不含胎牛血清的DMEM/F12（1B1）培養基，并添加2 mmol/L L-谷氨酰胺、人表皮生長因子（human epidermal growth factor，EGF）、人堿性成纖維生長因子（human basic fibroblast growth factor，bFGF）等。……