摘要:目的 通過硼替佐米作用于前列腺癌細胞體外增殖及凋亡的實驗研究,初步探討硼替佐米治療前列腺癌的機制。方法 體外培養DU145細胞,使用不同濃度硼替佐米分別作用于DU145細胞24、48、72 h,CCK-8法檢測腫瘤細胞的增殖,Annexin-V/PI法檢測細胞凋亡率。流式細胞術檢測DR5、Fas蛋白的表達。結果 硼替佐米作用后,隨劑量增加,DU145細胞存活率逐漸下降,凋亡細胞逐漸增多,與對照組相比,至藥物濃度為15 nmol/L 時有顯著差異(P<0.05),同時硼替佐米處理細胞后,DR5、Fas蛋白的表達明顯增加(P<0.05)。結論 硼替佐米能夠有效抑制前列腺癌細胞增殖并促進其凋亡,且這種作用可能與增加DR5、Fas蛋白的表達有關。
關鍵詞:硼替佐米;DU145細胞;人類前列腺癌;DR5;Fas
前列腺癌是一種極易發生侵襲和轉移的男性泌尿生殖系統腫瘤。激素非依賴性前列腺癌臨床上尚無一種有效的治療手段,現在正期待著有效的治療藥物的產生[1]。硼替佐米是一種蛋白酶體抑制劑,曾有研究也驗證了硼替佐米在實體瘤的應用[2],但硼替佐米對激素非依賴性前列腺癌細胞的增殖和凋亡的影響的研究較少,本文擬用激素非依賴性前列腺癌細胞系DU145驗證硼替佐米對前列腺癌細胞增殖和凋亡的影響,并探討其可能機制。
1資料與方法
1.1一般材料 硼替佐米(Millennium Pharmaceuticals,USA),細胞毒性檢測CCK-8試劑盒(Dodindo,Japan);Annexin V/PI凋亡試劑盒(南京凱基試劑公司,China)。
1.2方法
1.2.1細胞培養方法及條件 DU145細胞用含10%的FBS的RPMI 1640培養基,在37℃、5% CO2的培養箱中培養,細胞呈單層貼壁。
1.2.2 CCK-8法檢測細胞增殖 DU145細胞37℃,5% CO2條件下培養24h。細胞貼壁后,各實驗組分別加入不同濃度(0、5、10、15、20、25 nmol/L)硼替佐米?!?br>