金標法與酶聯免疫法在抗—HIV測定中的應用

【摘 要】目的：比較分析金標法和酶聯免疫法在抗-HIV測定中的應用。方法：我院2013年1月至2013年12月間的血標本8645份，均采用金標法和酶聯免疫法進行HIV抗體檢驗，比較分析兩種方法的檢驗結果。結果：初次檢測中金標法陽性率0.46%（40/8645），酶聯免疫法0.40%（35/8645）；確認試驗后金標法陽性率0.42%（36/8645），酶聯免疫法0.31%（27/8645），經免疫印跡法檢測最終確診抗-HIV陽性率0.24%（21/8645），金標法假陽性率0.17%（15/8624），酶聯免疫法假陽性率0.07%（6/8624），金標法假陽性率高于酶聯免疫法，但差異無統計學意義（P>0.05）。結論：金標法和酶聯免疫法均可用于抗-HIV測定中，兩種方法各有特點，臨床中應根據具體情況選擇使用。

【關鍵字】金標法；酶聯免疫法；抗-HIV

【中圖分類號】R426 【文獻標識碼】A 【文章編號】1004-7484（2014）07-4063-02

艾滋病是當前死亡率較高的疾病，且有很長的潛伏期，在短時間內是不會出現一些明顯臨床癥狀，現階段艾滋病治療并沒有有效的措施，及早檢測提前預防是主要的防治措施對HIV抗體進行的檢測，可以有效的控制艾滋病患者病情的惡化，降低其他人艾滋病的感染幾率[1]。當前臨床中檢測HIV抗體的方法主要有金標法和酶聯免疫法，為探討兩種方法的應用效果，特選取我院血標本行抗-HIV測定，現報告如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料

我院2013年1月至2013年12月間的血標本8645份，血標本來源于在我院行健康體檢或治療的患者，其中男性5364例，女性3281例，年齡14～86歲，平均年齡（36.5±4.3）歲。采用靜脈采血的方法，采集患者的血樣4～5ml，在進行血樣檢測前所有血樣均沒有被污染，也沒有發生溶血。

1.2 檢測方法

金標法：采用金標法試劑（北京金豪有限工資生產，批號000101），分別加50μL和80μL血清，在放置25min之后，進行肉眼觀察，如果試紙上出現2條紅線，則將這個血樣檢測判定為陽性，出現1條紅線，將血樣的檢測，判定為陰性，同時對紅線出現的時間進行記錄。

酶聯免疫法：使用酶聯免疫試劑（上海科華生物工程有限公司生產，批號2000706）以及相應的儀器（TECAN酶標儀，PW-960酶標洗板機），酶標儀對檢測結果進行判斷，以波長（檢測波長450nm，參考波長630nm）A值作為檢測標準，當A值≥1時，說明血樣檢測呈現陽性，當A值<1時，說明血樣檢測呈現陰性。

兩種檢測方法中初次檢驗確定為陽性的血樣，再次進行確診實驗，將再次檢測確診的陽性血樣，送往疾病控制中心進行免疫印跡檢測；酶聯免疫法檢測血樣中，實驗儀器、實驗操作過程等需要完全的按照相關的操作進行，并且由相同的血樣檢測人員在同一個血樣檢測實驗室完成血樣的檢測。

1.3 統計學處理

采用統計學軟件SPSS17.0對數據進行處理，檢測結果以構成比表示，比較采用χ2檢驗，P<0.05時表示差異具有統計學意義。

3 討論

對患者的血樣進行檢測，是對病毒檢測的一種手段，其中對HIV抗體進行篩查，是發現HIV病毒攜帶者以及患者的重要方法，在HIV抗體檢測中，現在出現了多種檢測方法，其中的酶聯免疫檢測的方法在HIV抗體檢測中有較長的使用時間，在HIV抗體檢測中已經擁有了一定的地位[2]，從本次研究結果來看，酶聯免疫法假陽性率低于金標法，但是酶聯免疫檢測方法，需要使用到精密的檢測儀器酶標儀，對檢測實驗中的儀器精度、操作人員專業知識等均有一定的要求，儀器的使用環境、操作過程、操作人員等都會對其靈敏度性能產生影響[3]。且在檢測中需要花費大量的時間，用于急診患者中可能會延誤患者的病情治療。金標法是一種新型的快速診斷技術，其在血樣HIV抗體等檢測中，只需要使用一種金標診斷試劑，就可以完成血樣的檢測，在金標法最初形成時期，因為相關的技術還沒有成熟和穩定，進行使得金標法的靈敏度和特異性較差，在臨床血樣檢測中并沒有廣泛的使用金標法，依然采用的是酶聯免疫法[4]。隨著金標法技術的不斷完善和改進，在金標法血樣檢測中使用的金標試劑質量得到較大的提升和改進[5]。從本次研究結果來看，金標法確診試驗陽性率為0.42%，酶聯免疫法為0.31%，與免疫印跡法檢測結果比較兩組的陽性符合率均達到100.0%，兩種方法的假陽性率分別為0.17%和0.07%，金標法假陽性率高于酶聯免疫法，但二者差異并無統計學意義，表明兩種方法均可用于抗-HIV測定中，而由于金標法簡單便捷，適用于病情緊急的患者，酶聯免疫法則更適用于大批量標本及常規患者的檢測中。

綜上所述，金標法和酶聯免疫法均可用于抗-HIV測定中，金標法更為方便快捷，適用于急診患者血標本檢測中，酶聯免疫法更適用于大批量血液標本檢測中，臨床中應根據具體情況選擇使用。

參考文獻：

[1] 張加亮，周盛.金標法與酶聯免疫法測定抗-HIV的效果分析[J].當代醫學 ，2013，（20）：69-70.

[2] 馬碧藍.金標法與酶聯免疫法（ELISA）在篩選HIV患者的應用效果比較[J].現代診斷與治療，2012，23（12）：2262-2263.

[3] 史瓊英，陳春華.探討影響HIV抗體初篩檢測結果的因素[J].大家健康（中旬版），2013，7（7）：64-65.

[4] 陳邁，楊金桂.金標法在抗-HIV篩查中的應用分析[J].當代醫學，2013， （18）：21-21.

[5] 胡冬梅.檢測受血者HIV抗體酶聯免疫法和金標法的臨床分析[J].吉林醫學，2011，32（24）：5000.