頭孢西丁與苯唑西林檢測耐甲氧西林金葡菌的比較

摘要：目的 比較頭孢西丁紙片擴散法檢測耐甲氧西林金葡菌（ MRSA） 的可靠性。方法 分別采用頭孢西丁與苯唑西林紙片擴散法檢測臨床分離的132種金黃色葡萄菌株，采用mecA 基因方法為檢測標準，比較兩種方法的準確性。結果 頭孢西丁紙片擴散法與mecA基因檢測高度一致為100%，苯唑西林檢測的敏感性和特異性分別明顯低于頭孢西丁。結論 頭孢西丁紙片擴散法是篩選和確認MRSA 的一種可靠的試驗方法。

關鍵詞：耐甲氧西林金葡菌；頭孢西丁；紙片擴散法

耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（ meticillin-resistantStaphylococcus aureus，MRSA） 是醫院感染和社區感染的主要病原菌， 其有效的治療和預防有賴于快速準確的實驗診斷，本研究以mecA基因為標準，對頭孢西丁和苯唑西林紙片擴散法檢測MRSA的結果進行了比較。

1資料與方法

1.1一般資料 129株臨床分離金黃色葡萄球菌株，耐甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌ATCC25923，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌ATCC25923，30 μg頭孢西丁藥敏紙片、1 μg苯唑西林藥敏紙片、M-H瓊脂，mecA基因擴增引物：引物序列上游F：5-' AAAATCGATGGTAAAGGTTGGC-3'引物序列下游R：5-' AGTTCTGCAGTACCGGATTT GC-3'。

1.2方法

1.2.1紙片擴散法 將臨床分離得到的金黃色葡萄球菌取經35℃孵育18～24 h的單個菌落，用無菌生理鹽水配制成0.5麥氏單位的菌懸液，分別涂布含有4% NaCl 的M-H 瓊脂表面上，將苯唑西林和頭孢西丁藥敏紙片放在瓊脂表面，35℃孵育24 h 后閱讀結果，執行NCCLS 2004[1]最新的標準：頭孢西丁紙片擴散法抑菌圈直徑≤19 mm為耐藥、≥20 mm為敏感；苯唑西林紙片擴散法抑菌圈直徑≤10 mm為耐藥、11～12 mm為中介、≥13 mm為敏感。

1.2.2 PCR反應檢測mecA基因 ①制備DNA模板 挑取平板上的的單個菌落，混懸于0.5 mL pH 8.0的T E中煮沸10 min，以7 000 r/min 的速度離心10 min后取上清液。……