130株肺炎克雷伯菌感染的臨床分布及耐藥分析

摘要：目的 分析肺炎克雷伯菌感染的臨床分布及耐藥情況，為臨床合理使用抗生素提供依據。方法 從2009年7月～2011年1月臨床送檢標本中分離出130株肺炎克雷伯菌分析其分布及耐藥性，細菌鑒定采用英國先德全自動細菌鑒定儀及法國梅里埃API手工板條，藥敏試驗用傳統的紙片擴散法（K-B法），雙紙片協同試驗進行超廣譜β-內酰胺酶（ESBLs）監測。結果 130株肺炎克雷伯菌主要來源于痰（60.77%）、中段尿（16.15%）等，來源科室主要有ICU（29.23%）、呼吸內科（19.23%）、腫瘤中心（12.31%）等。檢出ESBLs陽性43株占33.08%。結論 肺炎克雷伯菌檢出率較高，產ESBLs菌株對β內酰胺類藥物普遍耐藥，且其耐藥率普遍高于非產酶株。臨床應合理選用敏感的抗生素，有效控制肺炎克雷伯菌的感染。

關鍵詞：肺炎克雷伯菌；超廣譜β-內酰胺酶；耐藥性；合理用藥

肺炎克雷伯菌是腸桿菌科中除大腸埃希菌以外最重要的條件致病菌，廣泛存在于各種環境，通常攜帶于人體皮膚、鼻咽部、腸道等，目前已成為醫院感染的主要病原菌之一，隨著抗菌藥物的廣泛應用，尤其是三代四代頭孢菌素的大量使用，其耐藥性日趨嚴重[1-3]，本研究對2009年7月～2011年1月山東大學齊魯醫院各類臨床樣本中分離到的130株肺炎克雷伯菌感染的臨床分布及耐藥情況進行了總結分析，對合理使用抗菌素，有效控制耐藥菌株的產生和傳播，提高臨床治愈率有重要意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 菌株來源齊魯醫院2009年7月～2011年1月各類臨床樣本中分離到的130株肺炎克雷伯菌。

1.2細菌的分離與鑒定 試劑采用杭州天和微生物試劑有限公司產品，按常規方法分離細菌，采用英國先德全自動細菌鑒定儀及法國梅里埃API手工板條進行細菌鑒定。

1.3藥敏試驗 藥敏試驗采用紙片瓊脂擴散法（K-B法），結果按照美國臨床實驗室標準化研究所（CLSI）2009年版的標準判定。抗菌藥物有阿米卡星、慶大霉素、環丙沙星、左氧氟沙星、氨芐西林、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢唑林、頭孢曲松、頭孢他啶、頭孢噻肟、頭孢吡肟、頭孢哌酮/舒巴坦、妥布霉素、亞胺培南、復方新諾明、氨曲南。質控菌株為肺炎克雷伯菌ATCC700603，大腸埃希菌ATCC25922，均購自衛生部臨床檢驗中心。

1.4超廣譜β-內酰胺酶（ESBLs）的檢測，按照CLSI推薦的ESBLs初步篩選和表型確證試驗檢測ESBLs。初篩試驗為頭孢噻肟、頭孢他啶、氨曲南（均為30μg/片）的K-B藥敏紙片試驗，凡頭孢他啶的抑菌圈直徑≤22mm，頭孢噻肟或氨曲南的抑菌圈直徑≤27mm，即懷疑為ESBLs產酶株，進行ESBLs確證試驗？即進一步測定菌株對頭孢他啶（30μg/片）和頭孢他啶/克拉維酸（30μg/10μg/片），頭孢噻肟（30μg/片）和頭孢噻肟/克拉維酸（30μg/10μg/片）的抑菌環直徑？當兩種藥物中任意一種加克拉維酸的與不加克拉維酸的抑菌圈直徑差≥5mm時，可確認為產ESBLs株。

1.5數據分析 用WHONET5軟件進行數據分析。

2 結果

2.1標本來源與分布 2009年7月～2011年1月臨床分離的130株肺炎克雷伯菌主要來源于痰液（60.77%）、中段尿（16.15%）、分泌物（10%）、穿刺液（5.38%）、血液（3.08%）、其它（4.60%），科室分布ICU（29.23%）、呼吸內科（19.23%）、腫瘤中心（10%）、泌尿科（9.23%）、普外科（8.46%）、感染科（6.92%）、保健科（4.62%）、其它（10%）。

2.2肺炎克雷伯菌的耐藥性 肺炎克雷伯菌對常用抗菌藥物耐藥率最低的是亞胺培南，分離到耐亞胺培南株1株（0.78%），對阿米卡星、環丙沙星、頭孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦耐藥率較低，小于20%，對左氧氟沙星、頭孢吡肟、頭孢他啶、妥布霉素、慶大霉素的耐藥率介于20%～30%，對其他抗菌素普遍耐藥。肺炎克雷伯菌的耐藥率見表1。

2.3ESBLs陽性肺炎克雷伯菌耐藥率 130株肺炎克雷伯菌中共檢出43株ESBLs菌株，ESBLs檢出率為33.08%，ESBLs陽性菌株除了亞胺培南、氨芐西林、哌拉西林/他唑巴坦以外，對其他抗菌藥物的耐藥率明顯高于ESBLs陰性菌株。ESBLs陽性菌株對亞胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、環丙沙星、頭孢哌酮/舒巴坦耐藥率較低，對其他檢測的抗菌藥物耐藥率較高，而肺炎克雷伯菌無論產酶與否對氨芐西林的耐藥率都很高（見表1）。

3 討論

肺炎克雷伯菌對常用抗菌藥物的耐藥率最低的是亞胺培南，但并不是全部敏感，仍檢出了一株耐亞胺培南菌株，可能是與泛耐藥肺炎克雷伯菌株的出現有關，應該引起我們的高度重視。

研究結果顯示，凡產ESBLs菌株，對青霉素類、頭孢菌素類、單環β-內酰胺類耐藥，對碳青霉烯類敏感，這些抗生素有相同的化學結構，ESBLs能分解這類結構，使抗生素失去活性產生耐藥，此類菌株的出現，與抗菌藥物的過度使用負有不可推卸的責任，三、四代頭孢菌素的使用及碳青霉烯類抗菌藥物的使用明顯增多的科室，導致耐藥菌株的不斷增多，給臨床上治療此類菌株引起的感染帶來困難，因此，臨床上應加強對肺炎克雷伯菌感染的的監測力度，同時檢測ESBLs陽性菌株，根據藥敏結果合理選用抗菌藥物，控制ESBLs陽性菌株的擴散和醫院感染的發生，以延緩細菌耐藥的產生。

參考文獻：

[1]翁幸鐾，糜祖煌.多耐藥肺炎克雷伯菌獲得性耐藥基因及ompK36突變研究[J].中華醫院感染學雜志，2010，20（17）： 2545-2548.

[2]蘇兆亮，糜祖煌，孫光明，等.多藥耐藥肺炎克雷伯菌β-內酰胺酶基因及膜孔蛋白基因研究[J].中華醫院感染學雜志，2010，20（22）：3449-3451

[3]肖永紅，王進，朱燕，等.Mohnarin 2008 年度全國細菌耐藥監測[J].中華醫院感染學雜志，2010，20 （16）：2377-2383.

編輯/王敏