大鼠腎移植術中血管吻合技術的體會

摘要：大鼠腎移植模型是腎臟相關疾病研究中常用的動物模型，目前已有多種建模方式，但最主要的問題是術中血管吻合技術。目的 總結大鼠腎移植術后預防血栓形成的手術經驗，減少術后血管并發癥的發生。方法 回顧性分析2010年1月~2013年12月60例大鼠腎移植手術，術中通過改進血管游離等方面的手術技巧來預防移植腎血管并發癥的發生。結果60例大鼠腎移術后無1例出現吻合口狹窄及腎動脈血栓形成或栓塞。結論 采用適當、熟練的手術技巧可以減少大鼠腎移植術后血管并發癥的發生。

關鍵詞：大鼠腎移植；血栓形成；血管吻合；血管并發癥1資料與方法

1.1一般資料實驗手術過程中對動物的處置符合《貴陽醫學院實驗動物研究所倫理審查指南》。供受體均選用成年SD2大鼠各60只，鼠齡2~3個月，所有大鼠均為成年雄性，體重200~250g，由貴陽醫學院動物實驗研究所提供。

1.2藥品、器械肝素、生理鹽水（500/mL）、平衡液、自助置腎袋、8-0 無損傷縫線5-0 無損傷縫線、自制腹腔、血管拉鉤。

1.3方法供、受體大鼠均在移植前禁飲食6h，可以飲水，行（經腹腔注射Nacroren、肌肉注射Ketanest）麻醉。

1.4供鼠移植行（經腹腔注射Nacroren、肌肉注射Ketanest）麻醉。常規剔除腹部鼠毛并盡量不傷及皮膚，如果皮膚有傷口會會引起術后傷口感染。將大鼠除頭部以外，絡合碘消毒全身手術區域，鋪無菌巾，手術洞巾。取SD大鼠腹部皮膚正中作為手術切口。以回形針拉直后自制的腹腔拉鉤，將腹壁垂直傷口拉開，充分顯露腹部內臟器官及左腎，避免周圍臟器（肝、脾）損傷，不損傷胸膜腔。以0.9%生理鹽水紗布將腹部腸管包裹推向右側以傷口減少大鼠體液喪失。供體大鼠在分離左腎及腎靜脈及周圍組織時要輕柔，避免損傷腎靜脈血管鞘。游離左腎動脈時，臨近腹主動脈一定要用5-0帶針縫合線逐一縫在、結扎各個分支血管，避免因出血而造成血管痙攣、大出血、血栓形成等不可逆性損傷導致大鼠死亡。游離腎臟時，應緊貼腎臟避免周圍脂肪過度牽拉，操作粗暴會導致腎血管痙攣、大出血致腎缺血而壞死。處理腎上腺血管時，盡量帶一點腎上腺組織并作為其腎上的標記，避免在受體腎移植時腎上極顛倒導致手術失敗。總的來講游離大鼠左側腎上腺動、靜脈、左側精索動、靜脈、應逐個結扎、切斷。鈍性游離腎臟的背側、上極、下極； 游離腹主動脈，特別要注意其后方存在1-2根椎動脈，應予以一并結扎切斷。將此段腹主動脈與下腔靜脈及左腎靜脈完全分離；左輸尿管應從大鼠腹主動脈游離并切斷，以5-0帶針可吸收線結扎備用。輸尿管周圍的脂肪組織是維持輸尿管血供的主要來源，在游離輸尿管時這些脂肪組織應盡量多保留，以免術后輸尿管壞死。用文氏鉗在左腎動脈上方（離腎動脈約0.5cm）阻斷大鼠腹主動脈，迅速以0℃~5℃肝素鈉生理鹽水2mL低壓、勻速灌洗大鼠左腎，可見左腎色澤逐漸轉為均勻的淺淡黃色時切斷左腎靜脈，再以0℃~5℃肝素鈉生理鹽水2mL低壓、勻速灌洗腎臟，以去除左腎靜脈內殘留血液。于左腎動脈上方緊貼腹主動脈處5-0帶針可吸收線結扎、縫扎腎動脈，這時供腎切取完成。切取的腎臟立即放入0℃~5 ℃平衡液中。在取供體大鼠左腎時，冷缺血時間、熱缺血時間應縮短。本組60例大鼠腎移植實驗表明，供體腎當溫度大于5℃，冷藏時間在大于12h時，大鼠腎移植術后會產生少尿、腎功能衰竭；大于16 h 移植腎喪失功能，受體死亡。

1.5受體移植大鼠麻醉行經腹腔注射Nacroren、肌肉注射Ketanest， 常規剔除腹部鼠毛并盡量不傷及皮膚，如果皮膚有傷口會會引起術后傷口感染。將大鼠除頭部以外，絡合碘消毒全身手術區域，鋪無菌巾，手術洞巾。取SD大鼠腹部皮膚正中作為手術切口。以回形針拉直后自制的腹腔拉鉤，將腹壁垂直傷口拉開，充分顯露腹部內臟器官及左腎，避免周圍臟器（肝、脾）損傷，不損傷胸膜腔。以0.9%生理鹽水紗布將腹部腸管包裹推向右側以傷口減少大鼠體液喪失。游離大鼠左腎及腎臟周圍組織，游離左側輸尿管，游離暴露左腎靜脈下方的腹主動脈和下腔靜脈，血管鉗阻斷約1.5cm的該段動靜脈取出供腎，置于自制腎袋內。以往手術證明，端側吻合腎動脈時，手術時間會明顯延長，大鼠腹主動脈和下腔靜脈被夾閉，會導致受體器官缺血再灌注損傷。夾閉時間越長會導致供腎缺血再灌注損傷增大。相反，腎動脈血管的端端吻合對受體器官的損傷較小，明顯縮短手術時間。本人認為使用保留盡可能長的供腎動脈于腹主動脈端端吻合、供腎靜脈與受體大鼠腔靜脈端側的吻合，術后效果最好，是一種最穩定的腎移植模型。

1.6吻合方法在雙人顯微鏡下，用8-0無損傷縫線縫合供腎動脈兩個點(3，9點），助手牽拉兩條縫合線，前后面8-0無損傷縫線連續縫合行腎動脈和腹主動脈殘端，端端吻合。縫合時血管夾夾閉腹主動脈防止管腔狹窄，漏血形成血栓。 然后用0℃~5℃肝素鈉生理鹽水沖洗供腎腎靜脈，使腎靜脈置入自然位置再行吻合，以免誤縫前后壁。剪開受體大鼠腔靜脈，盡量離供腎腎靜脈位置旁邊，8-0無損傷縫線縫合腎靜脈兩個點(3，9點）和腔靜脈端側吻合。吻合靜脈時助手牽拉兩點鋒線，不要牽拉過猛。牽拉過猛會導致縫線滑脫造成手術和腎缺血時間過長影響腎功能的恢復。不要反復牽拉血管以免內膜損傷造成術后血栓形成。牽拉兩點血管后，8-0無損傷縫線連續縫合牽拉點的前后血管。吻合血管時不要將血管前后壁夾閉導致手術失敗。

1.7尿路重建使用5-0 無損傷縫線輸尿管端端吻合，間斷吻合4～6針。

1.8摘除受體原右側腎臟方法同供體左腎切除術，游離受者右腎時5-0 無損傷縫線結扎腎蒂，不用考慮輸尿管的血供及腎臟周圍血管的分離。較為簡單，切除時間較短。

2結果

60例大鼠腎移植術后均未出現血管吻合口處狹窄及腎動脈血栓形成，腎動脈栓塞等血管并發癥。術后每天監測大鼠受體腎功均在正常范圍。受體及供體傷口按時換藥1次/d，均未出現傷口感染。采用適當的手術技巧和熟練的外科手術技能，可以大大減少大鼠腎移植術后血管并發癥的發生。

參考文獻：

[1]Ding R，Xie YS，Chen XM[J]．Zhonguo Zhongxiyi Jiehe Shenbing Zazhi，2008，9(4):365-367.

[2]Zhang JP， Zhang HJ， Wang X， et al[J]．Fudan Xuebao: Yixue Ban，2007;34(4):595-598.

[3]Wang K， Dai Y， Li DP， et al.Zhonghua Qiguan Yizhi Zazhi，2006，27(1):54-56.

[4]李默生，曹偉，靳風爍.臨床腎移植圍手術期治療學[M].軍事醫學科學出版社， 2006: 197-198.

[5]李嫣唐，張玉梅. 新世紀腎臟移植學[M]. 軍事醫學科學出版社，2001:288.

[6]李定憲，祝峰，胡有根.大鼠原位腎移植模型血管吻合方法的改進[J].中華實驗外科雜志， 2012，8:1635-1636.

[7]麥海星．大鼠腎移植模型建立方法的探討[J]．第四軍醫大學學報，2007，23：2202-2203．

編輯/哈濤