PCR檢驗法用于細菌檢驗的效果評價

摘要：目的探討PCR檢驗法用于細菌檢驗的臨床效果。方法疑似陰道炎患者110例，分別用革蘭染色檢驗法、PCR 檢驗法和細菌培養法做陰道細菌檢查。結果細菌培養法陽性檢出率高于革蘭染色檢驗法陽性檢出率，差異有統計學意義(P<0.01)。PCR 檢驗法陽性檢出率高于革蘭染色檢驗法陽性檢出率，差異有統計學意義(P<0.01)。結論PCR 檢驗法用于細菌檢驗敏感性及特異性高，且操作過程簡便、快捷，臨床意義顯著。

關鍵詞：PCR檢驗法；細菌檢驗；革蘭染色檢驗法；細菌培養法

The Evaluation of the Effect of the PCR Inspection Method for Bacterial Inspection

LIU Xi-ping

(Promotion of Family Planning Technical Guidance Station in Kuitun City， Kuitun 883200， Xinjiang，China)

Abstract：ObjectiveTo evaluation of the effect of the PCR inspection method for bacterial inspection. Methods110 suspected patients with vaginitis， vaginal bacteria were examined， using gram stain test， PCR test， bacterial culture method. ResultsThe positive detection rate， bacterial culture method is higher than that of Gram staining method， the difference was statistically significant (P<0.01). The positive detection rate， PCR test method is higher than that of Gram stain test， the difference was statistically significant (P<0.01). ConclusionPCR test method for bacteria detection， high sensitivity and specificity， and the operating process is simple， fast， clinical significance.

Key words：Method of test for PCR;Bacteriological examination;Gram stain test; Germiculture陰道炎為婦科疾病中最為常見、多發的一種炎癥感染性疾病[1]。可導致患者發生急慢性盆腔炎、異位妊娠或不孕等[2]。陰道炎患者常常由于不能及時和對癥治療而反復發作，因此早期明確致病菌對患者的康復尤為重要。為此，本研究觀察了PCR檢驗法用于陰道細菌檢驗的效果。現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料選擇2010年3月~2013年8月在我單位就診的疑似陰道炎患者110例為研究對象，年齡18~48歲。

1.2方法革蘭染色檢驗法及細菌培養法，嚴格按照標準執行[3]。PCR 檢驗法：取陰道分泌物 500μl 于生理鹽水中，12 000 r/min 離心 10 min，棄上清液后加入堿性裂解液， 98℃下加熱 10min， 12 000 r/min 離心 5 min， 取部分上清液做模板。取包含緩沖液 、 引物、 無菌去離子水和模板等總體積為25 μl， 以無菌石蠟油 30ul 覆蓋后進入 PCR循環。循環參數為：95℃ 下 5 min， 94℃下1 min，58℃下1min，72℃ 下 1 min，共 32 個循環，最后 72℃ 下延伸 5 min。設置PCR 檢測細菌的陽性及陰性對照：在進行陰道分泌物樣本DNA 擴同時，采用同一批 PCR 反應試劑， 將不加模板DNA 的作為陰性對照。將加入分離提純的標準菌株 DNA 模板的PCR 擴增作為陽性對照。

1.3統計學處理研究數據采用SPSS 13.0統計學軟件處理。組間比較，采用χ2檢驗。以P<0.05表示差異有統計學意義。

2結果

細菌培養法和PCR 檢驗法檢驗結果對比，差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。細菌培養法陽性檢出率高于革蘭染色檢驗法陽性檢出率，差異有統計學意義(P<0.01)，見表2。PCR 檢驗法陽性檢出率96.43%高于革蘭染色檢驗法陽性檢出率40.48%，差異有統計學意義(P<0.01)，見表3。

3討論

陰道炎臨床上以白帶的性狀發生改變以及外陰瘙癢灼痛為主要臨床特點[4]，其主要是由于陰道內寄生菌群的失衡引起[5]。正常情況下，陰道內寄居的各種菌群相互平衡，分泌各種物質共同維護著陰道內的菌群穩定，特別是陰道桿菌以及陰道上皮細胞在其中起到關鍵性的作用[6]。陰道分泌物檢查是臨床婦科醫生診斷婦科炎癥最常用的輔助檢查方法之一[7]。該檢查能直接地反應陰道內是不是存在菌群失調，是否存在炎性感染以及所受感染的嚴重程度如何。

革蘭染色檢驗法在陰道細菌檢驗中，曾被多數學者人為其是首選方法[8]。不過由于多種因素的存在，革蘭染色法檢驗過程中也存在很大的誤差。細菌培養檢驗是臨床診斷細菌感染的金標準，不過其檢驗過程復雜、費力，特別是很難在基層醫院開展。在本次研究中，筆者分別用革蘭染色檢驗法、PCR 檢驗法和細菌培養法做陰道細菌檢查。結果細菌培養法和PCR 檢驗法檢驗結果對比，差異無統計學意義；PCR 檢驗法檢出率高于革蘭染色檢驗法檢出率；而細菌培養法檢出率高于革蘭染色檢驗法檢出率，差異有統計學意義。提示PCR 檢驗法檢驗敏感性及特異性高。

參考文獻:

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編輯/申磊