人參總皂苷對心理應激高血壓大鼠心肌缺血再灌注損傷的作用

摘要：目的 探討人參總皂苷預適應對慢性心理應激高血壓大鼠I/R損傷的保護作用及機制。方法 將50只SHR大鼠隨機分為5組，每組10只：①SHR組；②假手術組；③ I/R組；④～⑤ GS100mg/kg、200mg/kg組。各組于束縛應激的同時灌胃給藥，SHR組給予等量生理鹽水。①I/R組:行冠脈結扎缺血40 min，再灌30 min；②GS預適應組：冠脈結扎缺血40min，再灌30min；分別記錄實驗前，缺血10，20min，再灌10，20，30min心功能變化；③假手術組：手術步驟同上，以BL-420+生物機能實驗系統記錄上述指標。結果 各組術后各時段LVP、± dp/dt max均隨時間延長而下降，顯著低于SHR對照組和假手術組， I/R組大鼠LVP，±dp/dtmax均顯著低于SHR組和假手術組。與對照組比較，束縛應激后GS組心肌NO活性上升最大幅度分別較I/R組提高1.27、1.66倍; GS組心MT的升高幅度均超過SHR對照組的變化，明顯高于I/R組 (P<0.05-0.01)。結論 應用人參總皂苷預適應可以激發機體內源性保護機制，有益于防治心肌缺血再灌注損傷。

關鍵詞：人參總皂苷；心理應激；缺血再灌注損傷；心肌保護近年來，心理應激因素作為誘發高血壓的重要因素得到廣泛關注 [1]。心理應激可以興奮交感神經系統，刺激機體釋放多種升血壓活性物質，誘發和加重高血壓的發生。應用中藥藥物預適應可以激發機體內源性保護機制，有益于防治心肌缺血再灌注損傷。本文研究人參總皂苷預適應對慢性心理應激高血壓大鼠I/R損傷的保護作用及機制。

1資料與方法

1.1一般資料 藥品:人參總皂苷，黃色粉末，總皂苷含量為90.2%，購自吉林省撫松縣大自然生物工程有限公司， 批號20050615。動物: 自發性高血壓大鼠，SPF級，體重200～250g， 雌雄兼用，北京維通利華實驗動物技術有限公司提供。合格證號2005803。試劑：NO檢測試劑盒購自南京建成生物工程公司。牛血紅蛋白購自Sigma公司。其余試劑均為市售分析純產品。儀器：BL-420+生物機能實驗系統，四川省成都泰盟科技有限公司產品；動物人工呼吸機，DH-150型，浙江大學醫學儀器廠；RM－6000型四道生理多導儀，日本光電公司產品。

1.2實驗分組和給藥方法將50只SHR大鼠隨機分為5組，每組10只：①SHR組；②假手術組；③I/R組；④~⑤GS100mg/kg、200mg/kg組。各組于束縛應激的同時灌胃給藥，SHR組給予等量生理鹽水。

1.3心理應激大鼠模型的建立參照文獻方法進行[2]。每天上午9:00~下午15:00將各組大鼠束縛1次，持續3w。

1.4 I/R方法將大鼠全身麻醉，切開氣管，右側頸總動脈插管與壓力換能器相連，經放大器測量外周動脈血壓。標準II導程導聯生物電放大器相連，記錄心電圖。①I/R組:行冠脈結扎缺血40min，再灌30min；②GS預適應組：冠脈結扎缺血40min，再灌30min；分別記錄實驗前，缺血10、20min，再灌10、20、30min心功能變化；③假手術組：手術步驟同上，以BL-420+生物機能實驗系統記錄上述指標。

1.5心功能與心臟血流動力學指標測定于缺血前10、20、30、40min和再灌注后10、20、30min分別記錄左室內壓峰值（LVP）、左室內壓上升、下降最大速率（±dp/dtmax）。

1.6心肌NO、MT測定按試劑盒說明進行。

1.7統計學處理全部數據均以（x±s）表示，作兩樣本均數差異的t檢驗。

2結果

2.1對大鼠心功能、血流動力學指標的影響表1~表2可見，各組術后各時段LVP、± dp/dt max均隨時間延長而下降，顯著低于SHR對照組和假手術組， I/R組大鼠LVP，±dp/dtmax均顯著低于SHR組和假手術組。GS組在缺血期間雖略有降低，但再灌注末時各項指標均顯著高于I/R組(P<0.05-0.01)， 在再灌注20、30min時GS理組的保護作用顯著，說明GS顯著促進大鼠心功能、心臟血流動力學指標的恢復。

與對照組比較，束縛應激后GS組心肌NO活性上升最大幅度分別較I/R組提高1.27、1.66倍; GS組心MT的升高幅度均超過SHR對照組的變化，明顯高于I/R組 (P<0.05~0.01)。見表3。

3討論

本研究證實了人參總皂苷對慢性心理應激高血壓大鼠心肌缺血再灌注損傷的改善作用，文獻報道人參可提高機體抗應激反應能力，減少大鼠缺血再灌注損傷所致的氧化損傷，降低MDA含量，升高心肌酶活性，均是其心肌保護作用的重要作用機制[3]。有研究表明NO/NOS系統功能低下可能參與了自發性高血壓與慢性應激性高血壓的發生和發展以及SHR心肌肥厚的發生和發展，本文結果可見人參總皂苷組能顯著增加NO含量說明GS增加NO是其減輕I/R損傷作用的機理之一。研究表明，急性或慢性心理應激可誘發或促進高血壓的形成和發展，通過心理應激引出心血管系統的軀體癥狀以及植物神經功能紊亂與內皮系統功能障礙。研究證實，在束縛實驗中MT含量明顯升高，推測可能與皮質醇發揮的誘導作用以及MT對鋅代謝穩態的調控有重要關系[4]，而鋅與NO、MT、糖皮質激素之間也有密切關系，可直接誘導MT的表達[5]。本文結果同時說明了人參總皂苷預適應對束縛應激大鼠I/R損傷的保護作用與金屬硫蛋白含量的升高有密切關系。已知人參總皂苷具有廣泛的生物學效應[3]，因此推測GS預適應抗應激SHR大鼠I/R損傷作用可能是復雜而多途徑的，而人參總皂苷的抗應激、抗心肌缺血的適應性反應機制與其心臟保護作用的關系尚需進一步深入研究。

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