高效液相色譜法測(cè)定蘆薈苷的方法

摘要：本文研究了用高效液相色譜法測(cè)定蘆薈苷的方法，解決了蘆薈苷不穩(wěn)定的難題，適用于蘆薈及蘆薈制劑，可為分析、檢測(cè)人士提供一些幫助。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜法；蘆薈；蘆薈苷

蘆薈為百合科植物庫(kù)拉索蘆薈Aloe barbadensis Miller葉的汁液濃縮干燥物，功能與主治為\"瀉下通便，清肝瀉火，殺蟲(chóng)療疳。用于熱結(jié)便秘，驚癇抽搐，小兒疳積；外治癬瘡\"[1]。 有關(guān)資料顯示，蘆薈的化學(xué)成分有蘆薈多糖、蘆薈苷、蘆薈大黃素苷、異蘆薈大黃素苷等，其中蘆薈苷是主要生物活性成分之一。蘆薈的瀉下作用主要是蒽醌衍生物的作用，尤其是蘆薈大黃素的作用，因這些蒽醌苷在腸道中釋放出大黃素，在腸腔內(nèi)通過(guò)膽汁變成大黃素，刺激腸道，增強(qiáng)腸蠕動(dòng)功能所致。

經(jīng)查閱有關(guān)資料，蘆薈苷的檢測(cè)方法有高效液相色譜法、紫外分光光度法等，《中國(guó)藥典》2010年版的檢測(cè)方法為高效液相色譜法，但穩(wěn)定性稍差，參考蘆薈苷的穩(wěn)定性研究[2]、2種蘆薈中蘆薈苷含量及穩(wěn)定性研究的相關(guān)資料，經(jīng)實(shí)驗(yàn)研究，本檢測(cè)方法穩(wěn)定性高、可操作性強(qiáng)，希望為業(yè)內(nèi)人士提供更好地幫助。

1 資料與方法

1.1儀器 高效液相色譜儀（UV-200Ⅱ型）；試藥：蘆薈苷對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，批號(hào)：110787-200504，供含量測(cè)定用），乙腈為色譜純，水為純化水，其它試劑為分析純；供試品：庫(kù)拉索蘆薈；色譜條件：C18柱（4.6×250mm，5μm），乙腈-水（25：75）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)355nm。

1.2方法

1.2.1對(duì)照品溶液的制備 精密稱取蘆薈苷對(duì)照品適量，置棕色量瓶中，加稀鹽酸-甲醇（1：1000）混合溶液制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。

1.2.2供試品溶液的制備 取本品1g，研細(xì)，取約0.1g，精密稱定，置50ml量瓶中，加稀鹽酸-甲醇（1：500-2000）混合溶液適量，超聲處理10～20min，加稀鹽酸-甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

1.2.3測(cè)定法 分別吸取上述兩種溶液各20μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。

2 結(jié)果

2.1準(zhǔn)確度試驗(yàn) 精密稱取已知含量的樣品（含量為46.02mg·g-1）0.1g，精密加入蘆薈苷對(duì)照品甲醇溶液（0.4996mg/ml）7.4、9.2、11ml，按樣品測(cè)定項(xiàng)下方法測(cè)定，計(jì)算回收率，結(jié)果回收率為99.97%，RSD為0.71%，表明準(zhǔn)確度良好。

2.2重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批樣品，精密稱定樣品0.1g，重復(fù)進(jìn)樣6次測(cè)定含量，結(jié)果平均含量為45.14mg/g，RSD為0.77%，表明本試驗(yàn)重復(fù)性好。

2.3線性 精密吸取不同濃度的蘆薈苷對(duì)照品溶液，注入液相色譜儀，記錄峰面積，以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，計(jì)算回歸方程為y =38798x+239.96，R2=0.9996。表明蘆薈苷在對(duì)照品濃度在0.02～0.5mg/ml范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.4耐用性

2.4.1供試品溶液穩(wěn)定性 取同一供試品溶液于0h開(kāi)始測(cè)定，以后間隔一定時(shí)間測(cè)定1次，表明供試品溶液至少在24h內(nèi)穩(wěn)定。

2.4.2提取溶劑對(duì)結(jié)果的影響 取本品0.1g，置50ml量瓶中，分別加不同濃度稀鹽酸- 甲醇適量，超聲處理15min，加相應(yīng)溶劑至刻度、搖勻、濾過(guò)、測(cè)定，見(jiàn)表3。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，選取稀鹽酸-甲醇（1：1000）作為提取溶劑。

2.4.3 超聲時(shí)間對(duì)結(jié)果的影響 取本品0.1g，置50ml量瓶中，加稀鹽酸-甲醇（1：1000）混合溶液適量，超聲處理時(shí)間分別為10、15、20min，加混合溶液定容至刻度，濾過(guò)，測(cè)定，含量分別為22.0%、23.1%和23%，故選擇超聲時(shí)間為15min。

2.5檢測(cè)值 供試品庫(kù)拉索蘆薈中蘆薈苷（C21H22O9）含量為22.8%。

3 結(jié)論

本方法專屬性強(qiáng)，穩(wěn)定、科學(xué)、方便經(jīng)濟(jì)，可很好地控制蘆薈的內(nèi)在質(zhì)量，同一蘆薈原料用本方法檢測(cè)的檢測(cè)值較《中國(guó)藥典》2010年版檢測(cè)方法高10%以上。同時(shí)，本方法也適用于蘆薈制劑。

參考文獻(xiàn)：

[1]岳銀屏，吳強(qiáng)，邢旭. 蘆薈苷的穩(wěn)定性研究[J]. 食品工業(yè)科技，2006，10：85-86+95.

[2]吳洪，蔡和意. 2種蘆薈中蘆薈苷含量及穩(wěn)定性研究[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，13：7708-7709.

編輯/哈濤