DNA定量細胞學結合HR—HPV對宮頸病變的研究價值

摘要：目的 探討DNA定量細胞學結合HR-HPV對宮頸病變的研究價值。方法 采取河北省唐山市人民醫院婦科門診2011年～2013年因有臨床癥狀就診的患者8704例，檢查前3d不做陰道沖洗及陰道上藥，24h內禁止性生活，并在非經期檢查，對NDA檢查結果異常的1008例患者作為研究對象，均需由專職醫師行HPV檢查及在陰道鏡下做子宮頸4個點位活檢，進行病理組織學診斷，然后登記、分類、統計、分析。結果 宮頸細胞樣本診斷結果：NILM：7398例（85.00%）；異常：1306例（15.00%）：包括（ASCUS）：636例（7.31%），LSIL：520例（5.97%），HSIL：126例（9.65%），SCC：24例（0.28%）。DNA定量分析系統檢查發現1576例（18.13%）為異常，包括416例1～2個DNA指數（DI）≧2.5的細胞，310例增生細胞數在5%～10%之間的細胞，626例3個或3個以上DNA指數（DI）≧2.5的細胞，104例具有異倍體細胞峰的細胞，120例增生細胞數〉10%的細胞。HR-HPV感染病例2689例，占30.89%（2689/8704）。1780例行陰道鏡及活檢，有1354例為低級別及以上病變，其余426例為無上皮內病變或慢性子宮頸炎。以根據TCT結果ASCUS及以上合并HR-HPV感染行活檢的病例陽性檢出率為72.22%（871/1206），根據DNA指數（DI）≧2.5的細胞合并HR-HPV感染行活檢的病例陽性檢出率為81.44%（1128/1385）。結論 HR-HPV感染可能導致DNA異倍體的出現，細胞核DNA倍體分析和HPV檢查結果又均與病變的程度密切相關，二者聯合可為疾病的篩查、預后的判斷提供更多有價值的資料。用于ASCUS分流的診斷，避免過多的陰道鏡活檢。

關鍵詞：DNA定量細胞學；全自動DNA倍體分析系統；宮頸癌；高危型人乳頭瘤病毒；細胞圖像分析

宮頸癌，是發生于子宮頸上皮的惡性腫瘤。近10年來，宮頸癌發病率逐年上升且預后更差的腺癌發生率有所上升，并趨于年青化，已引起人們的廣泛重視。國際醫學權威證實宮頸癌是感染性疾病、可預防的疾病，也是世界目前唯一可以早期發現并治愈的癌癥。

1 資料與方法

1.1一般資料 河北省唐山市人民醫院婦科門診2011年～2013年因有臨床癥狀就診的患者中自愿行宮頸DNA篩查及HPV檢查者8704例，年齡24～69歲，臨床表現多為白帶增多、宮頸糜爛、性交出血、不明原因的陰道流血及外陰贅生物等癥狀。檢查前3d不做陰道沖洗及陰道上藥，24h內禁止性生活，并在非經期檢查，對NDA檢查結果異常的1008例患者作為研究對象，均需由專職醫師行HPV檢查及在陰道鏡下做子宮頸4個點位活檢，進行病理組織學診斷，然后登記、分類、統計、分析。

1.2方法 HPV基因分型檢測試劑盒操步驟：通過提取臨床樣本病毒DNA，經過PCR擴增，利用導流雜交平臺，在已經固定好核酸探針的低密度基因芯片上雜交、顯色，診斷脫落細胞標本中的21種HPV病毒DNA分子的存在。一次取樣就可以檢測出患者是否感染21種HPV病毒，并能夠精確知道患者感染的是何種HPV病毒，從而確定患者感染病毒的危險性。

1.3陰道鏡檢查與活檢 使用PL-9800 電子陰道鏡，由陰道鏡專科醫師進行檢查，對可疑病灶陰道鏡下定位活檢；若鏡下未發現異常或圖像不滿意，則取宮頸多點活檢或行頸管搔刮術。所有活檢標本由我院經驗豐富的病理醫師閱片及作出最后診斷。

1.4統計處理 采用SPSS 13.0統計軟件進行統計學分析，計數資料采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1液基薄層涂片結果 采用液基薄層涂片技術，應用2004版TBS細胞學分級對8704例宮頸細胞樣本診斷結果：NILM：7398例（85.00%）；異常：1306例（15.00%）：包括（ASCUS）：636例（7.31%），LSIL：520例（5.97%），HSIL：126例（9.65%），SCC：24例（0.28%）。

2.2 DNA定量分析系統檢查結果 DNA定量分析系統檢查發現1576例（18.13%）為異常，包括416例1-2個DNA指數（DI）≧2.5的細胞，310例增生細胞數在5%～10%之間的細胞，626例3個或3個以上DNA指數（DI）≧2.5的細胞，104例具有異倍體細胞峰的細胞，120例增生細胞數〉10%的細胞。

2.3 HR-HPV檢測結果 8704例進行了HPV檢測，其中HR-HPV感染病例2689例，占30.89%（2689/8704）。

2.4 組織學診斷結果 根據TCT結果ASCUS及以上、DNA指數（DI）≧2.5的細胞合并HR-HPV感染經建議取活檢后，1780例行陰道鏡及活檢，經病理活檢證實，有1354例為低級別及以上病變，其余426例為無上皮內病變或慢性子宮頸炎。以根據TCT結果ASCUS及以上合并HR-HPV感染行活檢的病例陽性檢出率為72.22%（871/1206），根據DNA指數（DI）≧2.5的細胞合并HR-HPV感染行活檢的病例陽性檢出率為81.44%（1128/1385）。

3 討論

正常細胞（即DNA二倍體細胞，2C細胞）及腫瘤細胞在生長增殖時，細胞核內DNA結構及含量都會發生變化。DNA含量的變化可作為直接反映腫瘤增殖的重要生物學指標。通過對細胞核內DNA含量的測定及特征的分析能了解正常細胞周期變化及發現惡性增殖的腫瘤細胞。人乳頭瘤病毒是一種可引起人類黏膜組織良性及惡性腫瘤的病毒。HPV在感染細胞中以二種形式存在：一種是病毒DNA游離于宿主細胞染色體外，常見于低危型HPV6、11感染，另一種是病毒DNA與宿主細胞染色體相整合，常見于高危型HPV16、18感染。在宮頸病變的篩查中，聯合應用DNA定量細胞學技術和高危型人乳頭瘤病毒（HR-HPV）檢測，分析兩者與臨床病理因素的關系，評價DNA定量細胞學結合高危型人乳頭瘤病毒檢查在宮頸癌及癌前病變篩查中的價值、宮頸癌惡性程度的評估及對宮頸疾病發展趨向的預測價值。

綜上所述，三種方法單獨使用，DNA定量分析敏感性最高，但特異性較低，TCT診斷特異性最高，但敏感性較低，HPVl6/18DNA檢測敏感性和特異性均較低，說明每種方法單獨使用會降低普查的效率。TCT或DNA定量分析結合HPVl6/18DNA檢測都可提高敏感性。對TCT診斷為ASCUS的患者，結合HPVl6/18DNA檢測或DNA定量分析進行分流是行之有效的辦法。

編輯/哈濤