EMT在宮頸癌轉移復發中的作用

摘要：上皮間質轉化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）是指上皮細胞在特定的生理和病理情況下向間充質細胞分化的現象，EMT在胚胎發育、組織損傷修復以及腫瘤細胞侵襲、轉移過程中起重要作用。近年發現，上皮間質轉化（EMT）與腫瘤細胞侵襲、轉移等密切相關。現就EMT與宮頸癌侵襲、轉移的相關研究做一綜述。

關鍵詞：上皮間質轉化；宮頸癌；轉移復發

宮頸癌是女性第二大常見惡性腫瘤，發病率僅次于乳腺癌、肺癌，位居第3位[1]，嚴重危害著女性健康。每年我國宮頸癌發病患者超過13.1萬例，80%的患者確診時已發展為浸潤癌，每年超過5萬例死于宮頸癌（數據來源中國宮頸癌防治網）。宮頸癌侵襲、轉移是嚴重影響患者生活質量并最終導致死亡的主要原因。腫瘤細胞存在上皮間質轉化（epi-thelial-mesenchymal transition，EMT），并且被認為是腫瘤細胞發生浸潤轉移的第一步。現就EMT調控以及與宮頸癌侵襲、轉移的相關研究進展綜述如下。

1 EMT概念及調控機制

上皮間質轉化（EMT）是指上皮細胞在特定的生理和病理情況下向間充質細胞分化的現象，即由有極性分布、靜止的上皮細胞轉化為無極性分布、運動活躍的間質樣細胞的過程。EMT在胚胎發育、組織損傷修復以及腫瘤細胞侵襲、轉移過程中起重要作用。上皮間質轉化表現為上皮標記物（如E-cadherin、角蛋白、Ep-CAM等）表達降低；立方上皮細胞的細胞角蛋白結構改變，外形演變為紡錘形纖維細胞形態；間質標記物（如波形蛋白、纖維連接素、N-cad等）表達增加。EMT受一組轉錄阻礙蛋白（ZEB-1、ZEB-2、Twsit、Snail、Slug）調控，后者作用于E-cad啟動子，通過一系列表觀遺傳學改變，抑制E-cad轉錄及表達。細胞表面E-cad分子低表達及失表達，引起細胞間黏附減少，同時導致胞漿內游離β-catenin升高，并進入細胞核與轉錄因子LEF（lymphoid enhancer binding factor，LEF）形成復合體，激活間質細胞相關基因的轉錄及表達。TGF-β、Notch、Wnt、Hedgehog等信號分子都可以通過相應途徑激活轉錄阻遏蛋白（ZEB-1、ZEB-2、Twist、Snail、Slug）表達，誘導EMT形成。體外試驗表明，尼古丁、酒精等可誘導腫瘤細胞發生EMT，異黃酮等則可阻斷EMT形成[2]。

2 EMT對其他腫瘤的影響

2.1對大腸癌肝轉移的影響 大腸癌目前證實是一個很好的模型，用來研究EMT在一般實體腫瘤中的角色。部分原因是它廣為人知地轉移至肝臟和其他的致命部位[8]。事實上，最近一項采用了轉錄分析技術分析報道的研究表明，326例結腸癌患者的微點陣數據與EMT信號的結腸癌基因表達模式有緊密聯系[9]。TGF-β和腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）能誘導EMT已經被證實。整合素αvβ6表達的增加伴隨著EMT。在異種移植的研究中，進一步說明在腫瘤細胞侵犯的周圍間質組織中，鈣黏素E的缺失與整合素αvβ6表達的增加有密切聯系。重要的是，對那些臨床患者組織的研究中，研究顯示這些數據標志著患者不良的預后。免疫組化研究顯示，FLH2（four-and-a-half LIM protein2）在轉移的大腸癌組織中的高度表達，進一步證明了TGF-β1誘導的EMT在大腸癌的進展、侵襲及轉移的重要性。

2.2 EMT與乳腺癌轉移的關系 研究發現，從人類乳腺癌組織中提取的成纖維細胞可以誘導EMT，并增加體外直接共同培養癌細胞模型的遷移能力[10]。乳腺癌細胞系全基因組轉錄譜的鑒定結果顯示，EMT相關標志物的表達與其侵襲轉移顯著相關[11-12]。研究表明，基底型乳腺癌更易發生EMT。具有更高的侵襲轉移能力[13]。從骨髓微轉移灶分離的乳腺癌細胞也顯示與侵襲轉移相關的EMT特征[4]。研究還發現，在原發性乳腺癌中常出現細胞角蛋白缺失，這與EMT在促使癌細胞擴散至周圍基質的機制相一致[14]。研究還表明，E-鈣黏蛋白的表達下調能夠明顯增強乳腺癌侵襲轉移能力[15]，而給予外源性E-鈣黏蛋白盡管并不足以使間質細胞表型逆轉，但能夠抑制乳腺癌轉移[16-17]。

2.3 EMT及其轉錄因子在口腔鱗癌中的作用 體內口腔鱗癌細胞往往通過淋巴系統向遠處轉移。在口腔鱗癌細胞系43A（原發腫瘤細胞系）和43B（復發腫瘤細胞系）研究EMT的發生機發現，43A表達典型的上皮細胞表型，主要表現在E-cadherin和laminin-332（laminin-5）的表達。此外，還有Vimentin filaments和N-cadherin表達；反而，已經歷EMT轉變的復發腫瘤細胞43B表達特征。在2種口腔鱗癌細胞系中，Snail、Slug及Twist都可以單獨直接抑制E-cadherin表達，并高表達誘導產生的EMT，使上皮細胞表現纖維原細胞表型并獲得轉移性[18]。

3 EMT與宮頸癌侵襲、轉移

EMT在宮頸癌細胞的侵襲、轉移中起重要作用。Lee等[3]發現宮頸癌細胞發生EMT時，細胞呈長形，細胞表面E-cad表達下調，波形蛋白表達上調，癌細胞擴散、侵襲能力增強，并認為，在EMT過程中Snai1上調起重要作用。通過轉染技術，使宮頸癌細胞高表達Snai1，可以誘導宮頸癌上皮細胞發生間質轉化，E-cad表達顯著下降，同時發現癌細胞對劃痕愈合及侵襲能力顯著提高[4]。后來研究發現Notch1和RhoC激活同樣可以導致宮頸癌細胞發生EMT[5]。

研究表明，E-cad分子表達的改變與腫瘤的侵襲及轉移密切相關。1997年就有學者發現，在宮頸癌轉移瘤中E-cad及a/β-catenin mRNA的表達顯著低于原發瘤。Yaldizl等[6]通過分析24例侵襲型宮頸癌，發現超過50%（13例）的宮頸癌組織E-cad表達減少，而在E-cad表達減少的宮頸癌患者中11例存在著淋巴結的轉移（11/13），提示E-cad低表達與宮頸癌淋巴結轉移密切相關。Dursun等[7]發現宮頸癌細胞E-cad表達與宮旁侵襲的發生顯著相關（P=0.024），E-cad低表達導致總體生存率下降。應用COX回歸分析發現，剔除干擾因素后E-cad低表達與總體生存率、疾病復發率明顯相關（生存率相關性，P=0.004，RR=6.08，95%CI 1.75～21.1；復發率相關性，P=0.027，RR=1.75，95%CI 1.06～2.88）。E-cad低表達可以作為預測宮頸癌患者預后的指標，而E-cad低表達是上皮癌發生間質性轉化的特征性改變。可見EMT不僅在宮頸癌中是普遍存在的現象，而且與宮頸癌侵襲轉移密切相關，從而與患者的預后密切相關。

4問題與展望

宮頸癌的侵襲、轉移是影響宮頸癌預后的主要因素。早期宮頸癌無論手術還是放療都可以取得非常好的療效，然而一旦發生局部侵襲，患者不僅并發癥增加，生存率也顯著降低，嚴重影響患者的生活質量；若存在遠處轉移則喪失了根治的機會，患者的生存率更低。如果能抑制腫瘤細胞侵襲，減少轉移的機會，就會改善患者預后，提高患者的生存率及生活質量。同時，一些研究者發現腫瘤的遠處轉移與EMT的逆轉移方向有關，這種現象稱作間質細胞上皮轉移。比如，在大腸癌中，發現肝轉移與miR-200C表達的增加和特征性EMT的增加密切相關[19]。MET在癌癥轉移中的確切作用存在爭議，因為在一些癌癥的數據中表明MET起到反腫瘤轉移的作用[20]。

總之，哪些分子標志物可以作為腫瘤治療的靶點？EMT是腫瘤細胞侵襲轉移的重要過程，但EMT與鈣調蛋白結合蛋白的表達及磷酸化的關系尚不清楚。隨著對宮頸癌侵襲、轉移過程認識的深入，將有可能尋找到可以抑制甚至阻斷宮頸癌侵襲、轉移的靶點，為探索宮頸癌新的治療模式提供理論依據。

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編輯/肖慧