楊志清,王 碩,張世鮑,張魚雷,何金寶*
(1.云南農業大學,云南省優勢中藥材規范化種植工程研究中心,云南 昆明 650201;2.保山市農業科學研究所,云南 保山679100;3.文山州農業科學院,云南 文山 663000)
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15種薏苡仁中多糖含量測定
楊志清1,王 碩2,張世鮑3,張魚雷1,何金寶3*
(1.云南農業大學,云南省優勢中藥材規范化種植工程研究中心,云南 昆明 650201;2.保山市農業科學研究所,云南 保山679100;3.文山州農業科學院,云南 文山 663000)
薏苡仁是我國傳統中藥,含有豐富的營養成分和特殊的藥用成分,具有多種藥理活性。采用回流提取儀提取薏苡仁多糖,以葡萄糖為標準曲線,采用苯酚-硫酸法對15個不同種源薏苡仁中多糖含量進行了測定,結果表明:不同種源薏苡仁中多糖含量存在較大差異,多糖含量最高的為德宏梁河種,達2.3%,最低的為老撾種,只有1.0%,為充分開發利用薏苡資源提供了理論依據。
薏苡仁;多糖;含量測定
薏苡(Coixlacryrna-jobi L.)為禾本科薏苡屬(CoixL.)植物,又名米仁、六谷子、苡米、菩提子等,是中國傳統藥食兼用作物。薏苡仁(Semen Coicis)英文名Coix Seed,性味甘、淡、微寒, 入脾、胃、肺,經常見的中藥薏苡仁即為薏苡的成熟種仁,具有健脾利濕、除痹止瀉、清熱排膿、健胃解痙等功效[1-2]。 薏苡仁含有多種活性成分,如脂類、多糖類、木脂素類、酚類和腺苷等化合物,其中薏苡仁中含有豐富的多糖,具有顯著降糖作用[3]。徐梓輝等[4]研究發現,薏苡仁多糖可能有抑制肝糖原分解、肌糖原酵解,抑制糖異生作用,從而達到血糖水平降低的目的。
薏苡屬不同種質之間在薏苡仁脂和多糖的含量上存在著顯著差異。呂峰等[5]報道不同產地薏苡仁的功能成分含量差異明顯,特別是薏苡仁多糖的含量差異極為顯著,但對云南不同生境下的薏苡居群的薏苡仁脂和薏苡仁多糖的含量進行系統的比較測定,目前尚未見報道。本研究通過對不同地區薏苡多糖含量的分析比較,為云南薏苡優良品種的選育提供依據。
1.1 材料
選取來自老撾、越南、陜西省農科院、中國農科院品質所、廣西省農科院及云南的文山、德宏、版納、普洱、曲靖并保育在文山州農業科學院試驗基地的15個薏苡仁種質資源,帶回云南農業大學實驗室烘干備用。
1.2 試劑與儀器
葡萄糖標準品、苯酚純品、5%苯酚、濃硫酸。T-6紫外可見分光光度計、回流提取儀。
1.3 葡萄糖標準曲線繪制方法
采用苯酚-硫酸法測定多糖含量[6-7]。先用葡萄糖標準品0.1g置于100mL容量瓶中,加入蒸餾水至刻度(1mg/mL)配制葡萄糖對照品溶液備用;再用葡萄糖對照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL置于100mL容量瓶中,分別加入蒸餾水定容,得標準曲線系列溶液;最后吸取標準曲線系列溶液0.5mL于25mL試管,對照管加入蒸餾水0.5mL,在各管中加入0.5mL的5%苯酚溶液搖勻后,迅速加入濃硫酸3mL,搖勻后置冷水浴中10min,置沸水浴加熱16min,然后在冷水浴中冷卻10min,再用分光光度計于490nm處測定吸光度,以吸光度(Z)為縱坐標,葡萄糖標準溶液的濃度(C)為橫坐標,得葡萄糖標準曲線。
1.4 薏苡仁多糖含量測定方法[7]

2.1 葡萄糖標準曲線的繪制
從圖1可知,在10~50μg/mL范圍內葡萄糖濃度值與回歸方程y值及吸光度Z值有線性關系。隨著吸光度值(Z)從0.08到0.40不斷增大,各個處理的葡萄糖濃度也從10~50μg/mL范圍內成線性關系變化。

圖1 葡萄糖標準曲線
2.2 不同種源薏苡仁多糖含量比較
由表2可知,15種薏苡仁所得到的吸光度值不同,測定得到的多糖含量也各不相同,吸光度值Z從品種文薏1號的0.142到品種YDL的0.869不斷變化,而多糖含量也從老撾品種的最低1.0%到YDL品種的最高2.3%不斷變化,但也有些薏苡種類之間薏苡仁的多糖含量比較相似。
由圖2方差分析中可以看出,在0.05水平上YDL、德宏種與其它品種差異顯著;Y7-1、越南種、Y9-1、版納種之間差異不明顯;Y8-1、Y-11、YGL-12品系、文薏2號、Y12-2之間差異不明顯;老撾種、文薏1號、Y3-6、Y6-2之間差異不明顯。在0.01水平上YDL與德宏種差異顯著,與其它品種差異極顯著;德宏種、Y7-1、越南種、Y9-1、版納種之間差異不明顯;Y8-1、Y-11、YGL-12品系、文薏2號、Y12-2之間差異不明顯;老撾種、文薏1號、Y3-6、Y6-2之間差異不明顯。

表2 不同種源薏苡仁多糖含量的測定結果
15個不同種源的薏苡仁中的多糖含量存在著一些差異,種子來自于同一地區的薏苡仁多糖含量也存在著差異;不同種源薏苡仁中多糖含量最高的為德宏梁河種(YDL),為2.3%,最低的為老撾種,為1.0%;來自文山地區的4個種源中以文薏2號最高,為1.6%,其它3個相同,為1.1%;來自德宏州的3個種源中以德宏梁河種(YDL)最高,為2.3%,最低的為德宏梁河大廣種1.3%。這種差異說明由于每個地方的薏苡經過多年的人工種植,受到各地氣候、土壤及栽培方法等的影響,形成了一些各自不同的特征,包括薏苡仁中化學成分的差異,形成了薏苡種質資源的生物多樣性[8]。

注:小寫字母表示在P<0.05水平差異顯著;大寫字母表示在P<0.01水平差異極顯著。
圖2 不同種源薏苡仁多糖含量(%)方差分析
用熱水浸提薏苡仁多糖時利用了多糖類化合物水溶性好的特點,經研究表明隨著溫度的提高多糖得率也逐漸增加,溫度為100℃時,多糖得率最高,但在實驗過程中采用了75℃的溫度提取多糖,多糖提取不完全,可能會影響實驗結果。
本實驗測定了15個不同種源薏苡仁中多糖的含量,但有資料表明薏苡非種仁部位,如:根、莖、葉中也含有豐富的多糖[9],為了提高薏苡的綜合利用效率,需在今后的實驗中開展薏苡非種仁部位有效成分研究。
[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].2010版.北京:中國醫藥科技出版社,2010:353-354.
[2] 胡軍,金國梁.薏苡仁的營養與藥用價值[J].中國食物與營養,2007,13(6):57-58.
[3] KROTO HW,HEATH JR,O’BRIEN S C,et a1.c60:Buekmin-sterfullerene[J].Nature,1985(318):162-163.
[4] 徐梓輝,周世文,陳衛,等.薏苡仁多糖對糖尿病血管并發癥大鼠NO及主動脈iNOS基因表達的影響[J].第三軍醫大學學報,2007,29(17):1673.
[5] 呂峰,楊彩霞,姜艷梅,等.不同產地薏苡仁的保健與加工品質[J].福建農林大學學報:自然科學版,2008,37(4):433.
[6] 董群,鄭麗伊,方積年. 改良的苯酚-硫酸法測定多糖和寡糖含量的研究[J]. 中國藥學雜志,1996,31(9):550 -553.
[7] 王貞,徐增萊,史云云,等.不同居群薏苡生物學與經濟學性狀分析比較[J].江蘇農業科學,2009(2):148-149.
[8] 王碩,張世鮑,何金寶,等.薏苡資源性狀的主成分分析和聚類分析[J]. 云南農業大學學報,2013,28(2):157-162.
[9] 劉春蘭,周宜君,巴 特.薏苡多糖的提取及其單糖組分的分析[J].中央民族大學學報:自然科學版,2005,14(1):49.
(責任編輯:宋勇剛)
2014-05-27
云南省科技廳基金項目(2011FB055);云南省科技計劃項目(2014RE002)
楊志清(1968-),女,云南農業大學副教授,研究方向為藥用植物栽培與資源評價。
何金寶(1968-),男,云南省文山州農業科學院高級農藝師,研究方向為雜糧作物品種選育。E-mail:wshejinbao@163.com。
R284
A
1673-2197(2014)19-0025-02