玉簪花中一個新的神經鞘苷

解紅霞，薛培鳳

（1.內蒙古醫科大學附屬醫院藥劑部，內蒙古 呼和浩特 010059； 2.內蒙古醫科大學藥學院，內蒙古 呼和浩特 010110)

玉簪花為百合科植物玉簪 Hosta plantaginea(Lam.)Aschers的花，又名內消花、白鶴花等，為多年生草本植物，是常用蒙藥之一，具有清熱、解毒、止咳、利咽喉之功效，主治咽喉腫痛、音啞、肺熱、毒熱[1]。藥理作用研究表明，其醇提物具有鎮痛作用[2]，乙酸乙酯萃取部位有較強的抗菌作用[3]，玉簪全草中的生物堿可抑制煙草花葉病毒、乙酰膽堿酯酶活性[4]。研究表明，其化學成分主要為黃酮和甾體皂苷兩大類，包括甾體皂苷元及甾體皂苷[5]，黃酮苷類均為山柰酚苷，還有生物堿類和少量脂肪酸類[6-7]。但目前尚未見有其所含神經酰胺類化合物的報道。

1 儀器與材料

RE52CS型旋轉蒸發儀（上海亞榮生化儀器廠）；SHZ-Ⅲ型循環水式多用真空泵（河南鄭州長城科工貿有限公司）。乙醚、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、氯仿、無水硫酸鈉等，所用試劑均為分析純(天津威晨試劑廠)；試驗用水為高純水。薄層硅膠GF254、柱層硅膠（100～200目，200～300目，青島海洋化工集團公司)；Sephadex LH-20（北京慧德易公司）。玉簪花新鮮藥材（10 kg），于2007年8月購于內蒙古藥材公司，經內蒙古醫學院藥學院生藥教研室龐秀生教授鑒定為玉簪 Hosta.plantaginea(Lam.)Aschers的花。

2 方法與結果

2.1 提取與分離

取玉簪花藥材9 kg，用8倍量體積分數為95%的乙醇滲漉提取3次，過濾，合并提取液，減壓濃縮成浸膏。藥渣再用體積分數為50%的乙醇滲漉提取3次，合并提取液回收溶劑，減壓濃縮成浸膏。浸膏加適量水懸浮，分別用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取。95%提取物共得石油醚萃取物191 g，乙酸乙酯萃取物261 g，正丁醇萃取物56 g。其中乙酸乙酯萃取物Ⅲ（261 g）經硅膠柱色譜分離，以氯仿 -甲醇（20∶1～1∶1）梯度洗脫。每100 mL為 1流份，共收集140份，經薄層色譜檢識，合并相同流份，合并為40份（Fr1-40）。其中 Fr.3-8經硅膠柱得到的其他流份，再經Sephadex LH-20柱色譜，氯仿 -甲醇（1∶1）洗脫，得該化合物(50 mg)。

2.2 結構鑒定

化合物為白色無定型粉末（甲醇），熔點（mp）206～209℃，5%香草醛-硫酸乙醇溶液噴霧顯色顯粉紅色斑點。

ESI-MS：m/z 736[M+Na]+，相對分子質量為 713。1H-NMR(C5D5N，300 MHz)中 δ8.38（1 H，d，J＝8.7 Hz，NH）和13C-NMR(C5D5N，75 MHz)中 δ175.7 羰基碳信號表明，分子中存在酰胺片斷 -CO-NH。DEPT 譜 δ78.4，78.3，75.0，72.4，72.2，71.4，70.0表明，分子中存在6個連氧的 CH2和2個連氧的 CH，這些都是神經鞘胺醇的典型結構特征。

DEPT 譜 δ：132.1 和 131.9，131.0 和 129.9 碳信號，表明分子中有2對取代碳碳雙鍵；1H-NMR譜顯示2對烯質子 δ5.48(2 H，brs)和 δ5.93(2 H，t，J＝ 9.0 Hz，14.1 Hz)，氫的偶合常數較大，而且鄰雙鍵的碳信號約為32，表明雙鍵為E構型[7]。

1H-NMR 譜有甲基信號 δ0.83(6 H，t，J＝ 6.1 Hz)和強 CH2信號 δ1.24，結合13C-NMR譜的 1個高場信號 δ14.2和長鏈碳信號 δ29.4～29.9，表明分子中存在著 2條長而無分支的碳鏈。1H-NMR譜還顯示了葡萄糖的端基質子信號 δ4.93(1 H，d，J＝7.5 Hz)，13C-NMR 譜給出 1 個葡萄糖殘基的信號 δ105.5，75.0，78.3，71.4，78.4，62.5，可以判斷葡萄糖為 β 構型。

從化合物的1H-1H COSY圖譜中看到，δ8.35質子信號(N-H)與 δ4.78 質子信號 (H-2)相關，δ4.78 質子信號 (H-2)又與δ5.93 質子信號(H-3)相關，而 δ5.93 質子信號(H-3)和 δ2.12質子信號(H-5)小相關，δ5.48 質子信號(H-7)與 δ 2.00(H-6)相關，同時和 δ2.12質子信號(H-5)有 1個小的相關點，δ2.00(H-9)與δ4.51質子信號(H-10)相關。說明兩個雙鍵之間相隔2個碳，從而確定了2個雙鍵的位置和1～12的連接方式。

質譜碎片峰 m/z 696(M-H2O-H)，534(M-glu+H)也驗證了以上相對分子質量，355(M-glu-C12H18O)是酰胺鍵斷裂同時失去葡萄糖得到，為長鏈堿基產生的碎片離子峰，420(M-C21H43+H)是2-OH脂肪酸鏈的α裂解所得的碎片峰，由此推斷出化合物17的結構是主鏈為21個碳的神經鞘苷類化合物。

13C-NMR譜和1H-NMR譜數據見表1。

根據以上分析及文獻[7]確認，化合物被確定為1-O-β-D- 葡萄糖基 -(2S，3E，7E)-2-[(2′R)-2′- 羥基 - 二十一酰胺基]-3（E），（E）- 十二二烯 -1，-二醇，命名為玉簪神經鞘苷 A。結構式見圖1。

3 討論

近年來，國內外玉簪花的化學成分研究報道主要為甾體皂苷類、黃酮類、生物堿類等，新化合物較多，但未見報道有神經酰胺類化合物。本課題組從玉簪花醇提物的乙酸乙酯萃取部位分離得到2個神經酰胺類化合物，其中一個由于分離得到的量少，沒有將核磁共振譜做完全，故結構不能完全鑒定；另一個通過波譜鑒定了結構，確定為玉簪神經鞘苷A，經檢索為新化合物。

表1 化合物的13C-NMR譜、1H-NMR譜和DEPT譜數據（C5D5N，400 MHz）

圖1 玉簪神經鞘苷A的結構式

參考文獻：

[1]國家中醫藥管理局《中華本草》編委會.中華本草(蒙藥卷)[M].上海：上海科學技術出版社，2004：142.

[2]解紅霞，薛培鳳，周 靜，等.蒙藥玉簪花鎮痛作用的實驗研究[J].內蒙古醫學院學報，2010，32(1)：36-38.

[3]解紅霞，薛培鳳，張宏桂，等.蒙藥玉簪花的體外抑菌活性研究[J].內蒙古醫學院學報，2010，32(6)：689-691.

[4]Wang YH，Gao S，Yang FM，et al.Structure elucidation and biomimetic synthesis of hostasinine A，a new benzylphenethylamine alkaloid from Hosta plantaginea[J].Org Lett，2007，9(25)：2 792-2 811.

[5]薛培鳳，張金花，解紅霞，等.玉簪屬植物化學成分及藥理作用研究進展[J].中藥材，2011，34(4)：647-651.

[6]解紅霞，張金花，張宏桂，等.蒙藥玉簪花的化學成分研究[J].中國藥學雜志，2009，44(10)：733-735.

[7]Wang YH，Zhang ZK，Yang FM，et al.Benzylphenethyl amine alkaloids from Hosta plantaginea with inhibitory activity activity against tobaccomosaic virus and acetylcholineste rase[J].J Nat Prod，2007，70(9)：1 458-1 461.