九味羌活制劑中揮發(fā)性成分的氣相色譜－質(zhì)譜分析

張幸福，張 煒

（青海省食品藥品檢驗(yàn)所，青海 西寧 810016）

九味羌活系列制劑系從古方九味羌活湯演變而來，由羌活、防風(fēng)、蒼術(shù)、細(xì)辛、川芎、白芷、黃芩、甘草、地黃等藥材組方，有大蜜丸、小蜜丸、濃縮丸、水丸和九味羌活顆粒等劑型，主要功效為疏風(fēng)解表、散寒除濕，用于外感風(fēng)寒所致的感冒。方中羌活、川芎、防風(fēng)、蒼術(shù)、細(xì)辛含有多種揮發(fā)性成分，目前對九味羌活制劑的研究大多限于其中單味藥的成分和藥理活性研究，而對制劑整方的物質(zhì)基礎(chǔ)和配伍效應(yīng)的研究則少有報(bào)道。為探討揮發(fā)性成分在復(fù)方中的作用，尋找九味羌活制劑治療風(fēng)寒感冒疾病的物質(zhì)基礎(chǔ)，筆者采用氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用(GC－MS)法對九味羌活制劑中揮發(fā)性成分進(jìn)行研究，并模擬相同條件對各單味藥材進(jìn)行了與九味羌活制劑的分析比較，為九味羌活制劑的物質(zhì)基礎(chǔ)與配伍機(jī)理研究奠定了基礎(chǔ)。

1 儀器與試藥

賽默飛世爾Triplus GC－DSQⅡ型氣相色譜－質(zhì)譜檢測聯(lián)用儀；賽默飛世爾 TR －1MS－30M 型毛細(xì)管柱（0．25 mm ×0．25 μm）；OHAUS AR5120型電子天平（奧豪斯公司）；HANGPING FA1004型電子天平（上海天平儀器廠）。無水硫酸鈉（分析純，天津市化學(xué)試劑廠）；正己烷（分析純）；羌活、川芎、防風(fēng)、蒼術(shù)、細(xì)辛購自藥材市場，經(jīng)鑒定均為2010年版《中國藥典（一部）》收載品種；九味羌活系列制劑，其中大蜜丸4批，小蜜丸2批，濃縮丸4批，水丸16批，顆粒劑10批。

2 方法與結(jié)果

2．1 GC －MS 件[1－2]

程序升溫：初始溫度為50℃，保持10 min，以 5℃ ／min的速率升溫至80℃，以8℃ ／min的速率升溫至110℃并保持10 min，以 1．8℃ ／min的速率升溫至 160℃，以 2．5℃ ／min的速率升溫至200℃，以5℃ ／min的速率升溫至240℃并保持7 min。載氣為高純氦氣。進(jìn)樣口溫度：250℃；傳輸線溫度：250℃；節(jié)氣模式；真空補(bǔ)償；恒流模式，流量 1．0 mL ／min；分流進(jìn)樣，Split Flow為 150 mL ／min，Split Ratio為 150，Splitless Time為 1．00 min。 離子源溫度：250℃；溶劑延遲時間：3．5 min；電離方式：電子轟擊（EI）源；電離能量：70 eV；掃描模式：全掃描 ／Full scan，掃描范圍m ／z 20～650。

2．2 溶液提取和制備

取羌活、川芎、防風(fēng)、蒼術(shù)、細(xì)辛藥材，粉碎成細(xì)粉。分別稱取約50 g（準(zhǔn)確至 0．01 g），置 1 000 mL 圓底燒瓶中，加純化水 500 mL，加沸石少許，上端加揮發(fā)油測定器，自上端加滿純化水，用移液器加正己烷4 mL至揮發(fā)油測定器上端，與水液分層。調(diào)節(jié)溫度，保持收集餾出液6 h，冷卻，收集正己烷液，用無水硫酸鈉過濾，即得5種對照藥材揮發(fā)油。取九味羌活制劑樣品，稱取約50 g（蜜丸剪碎、濃縮丸和水丸砸碎成顆粒，準(zhǔn)確至0．01 g），置1 000 mL圓底燒瓶中，按對照藥材揮發(fā)油提取方法處理，即得樣品揮發(fā)油。取提取樣品的同批次正己烷，作為空白試劑。

圖1 九味羌活制劑中揮發(fā)油的總離子流圖

2．3 測定法

分別精密吸取空白試劑、5種對照藥材揮發(fā)油、樣品揮發(fā)油各1 μL，注入 GC－MC檢測儀，測定。代表性總離子流圖見圖1。可見，空白試劑無明顯干擾。

2．4 成分鑒定

將GC－MS所得質(zhì)譜信息用質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫NIST08．L計(jì)算機(jī)檢索，同時采用人工圖譜解析，按各色譜峰的質(zhì)譜裂解圖與庫和文獻(xiàn)核對，鑒定出了其中35個化合物，并確定了歸屬，設(shè)定了各藥材的主要特征峰或峰簇。結(jié)果見表1。

表1 16個生產(chǎn)企業(yè)5種劑型的九味羌活制劑揮發(fā)性成分GC－MS特征峰分析

3 討論

對制劑中鑒定出的35個成分進(jìn)行峰檢出數(shù)判斷，蜜丸中檢出28～33個，濃縮丸中檢出26～31個，水丸中檢出0～29個，顆粒劑中檢出0～26個。

根據(jù)設(shè)定的各味藥材的特征峰進(jìn)行了專屬性檢測，發(fā)現(xiàn)九味羌活制劑中存在特征峰缺失的情況。分析5味藥材在蜜丸、顆粒劑、濃縮丸和水丸中特征峰的檢出比例，羌活分別為100%，10%，50%，29%；川芎分別為100%，40%，100%，94%；蒼術(shù)分別為100%，50%，100%，94%；細(xì)辛分別為100%，30%，25%，47%；防風(fēng)分別為 100%，0，100%，88%。

顆粒劑中羌活、川芎、防風(fēng)、蒼術(shù)、細(xì)辛5味藥材的入藥工藝為，將提取揮發(fā)油噴灑在藥物表面，然后封袋包裝，在儲藏和運(yùn)輸過程中可能會造成揮發(fā)油的損失，影響藥物質(zhì)量。應(yīng)考慮從藥材質(zhì)量源頭開始，規(guī)范使用和生產(chǎn)過程及提高制劑的工藝技術(shù)。對于顆粒劑，已有進(jìn)行工藝改進(jìn)的報(bào)道，如采用環(huán)糊精包合技術(shù)等[3－7]。

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