高效液相色譜法測定復方桔梗麻黃堿糖漿中鹽酸麻黃堿的含量

張曉燕，孫 雪

(1.河北省衡水市哈勵遜國際和平醫院藥學部，河北 衡水 053000；2.河北省衡水市食品藥品檢驗檢測中心，河北 衡水 053000)

復方桔梗麻黃堿糖漿收載于《國家藥品標準地標升國標》第七冊，主治咳嗽、多痰，也可用于喘息性支氣管炎引起的咳嗽。其主要成分有鹽酸麻黃堿、遠志流浸膏、紫菀流浸膏、桔梗流浸膏、氯化銨、芳香醑等，其中鹽酸麻黃堿為麻黃中主要有效成分。原標準中未設含量測定項，為更好地控制藥品的質量，對復方桔梗麻黃堿糖漿中鹽酸麻黃堿的含量測定方法進行了研究。經方法學考察及陰性對照試驗，結果試驗中其他組分對鹽酸麻黃堿的測定無干擾，表明該方法簡單、準確、可靠、重復性好、專屬性強，可作為復方桔梗麻黃堿糖漿的質量控制標準。

1 儀器與試藥

AG135型電子天平；PB20型標準酸度計；UV-2401 PC型紫外分光光度計；Agilent 1100型高效液相色譜儀。鹽酸麻黃堿對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號為171241-201007，供含量測定用)；復方桔梗麻黃堿糖漿(河北美圖制藥有限責任公司，批號分別為120302，120407，121205)；乙腈為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱:迪馬公司生產的 C18柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm)；流動相:乙腈-0.1%磷酸溶液-三乙胺(10∶90∶0.1)[1]；柱溫:30 ℃；流速:1.0 mL/min；檢測波長:207 nm；進樣量:20 μL。

2.2 溶液制備

精密稱取鹽酸麻黃堿對照品14.72 mg，置100 mL容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 mL，置50 mL容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液。

精密量取供試品20 mL，置分液漏斗中，加水10 mL，搖勻，用乙醚液提取 3 次(30，30，30 mL)，合并乙醚液，水浴(50 ℃)蒸干，用10 mL甲醇溶解并轉移至50 mL容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，再精密量取1 mL，置10 mL容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液[2]。取按處方比例并以相同工藝制備的不含鹽酸麻黃堿的陰性對照品，按供試品溶液制備方法制得陰性對照品溶液。

2.3 方法學考察

陰性干擾試驗:在擬訂色譜條件下，分別精密吸取2.2項下3種溶液各20 μL，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。見圖1。

線性關系考察:精密稱取鹽酸麻黃堿對照品14.72 mg，置100 mL容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻。分別精密量取 1.0，2.0，3.0，5.0，10.0，20.0 mL，置 50 mL 容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，各取20 μL依法進樣，按擬訂色譜條件測定，以峰面積(Y)為縱坐標、對照品進樣量(X)為橫坐標繪制標準曲線，得回歸方程 Y=7.71×102X+1.018，r=0.999 8(n=6)。結果表明，鹽酸麻黃堿進樣量在0.060 0～1.500 μg范圍內與峰面積呈良好線性關系。

圖1 高效液相色譜圖

精密度試驗:取同一對照品溶液，按擬訂色譜條件依法重復進樣5次，按鹽酸麻黃堿的峰面積計算。結果的 RSD為0.2%(n=5)，表明儀器精密度良好。

重復性試驗:取同一批(批號為120302)樣品6份，按2.2項下供試品溶液制備方法，平行制備6份，依法進樣測定含量。結果的 RSD為0.6%(n=6)，表明該方法重復性良好。

穩定性試驗:將同一供試品溶液于室溫下放置 0，2，4，6，8，12 h測定，按鹽酸麻黃堿的峰面積計算。結果的 RSD為1.2%(n=6)，表明供試品溶液在12 h內穩定。

加樣回收試驗:精密量取供試品20 mL，精密加鹽酸麻黃堿對照品適量，按供試品溶液制備方法制備待測溶液，按擬訂色譜條件進樣測定，并計算回收率。結果見表1。

表1 鹽酸麻黃堿加樣回收試驗結果(n=9)

2.4 樣品含量測定[3-5]

取3批樣品，分別按2.2項下方法制備供試品溶液，按擬訂色譜條件依法進樣測定，用外標法計算樣品中麻黃堿的含量。結果批號為120302，120407，121205的復方桔梗麻黃堿糖漿中每1mL含鹽酸麻黃堿 0.35，0.35，0.36mg。

3 討論

本試驗中曾采用了多種流動相，先后用了甲醇-水、甲醇-0.1%磷酸、乙腈-0.1%磷酸溶液-三乙胺，經試驗比較，以乙腈-0.1%磷酸溶液-三乙胺(10∶90∶0.1)作為流動相，鹽酸麻黃堿的峰形好，分離度好，保留時間適中。試驗中采用了多種試劑對樣品中的麻黃堿進行提取，先后用石油醚、正丁醇、乙醚進行提取，結果表明用乙醚提取完全，并且色譜圖的峰形好。用紫外分光光度計測得供試品溶液中的鹽酸麻黃堿在207 nm波長處吸收最佳。

參考文獻：

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[M].北京:中國醫藥科技出版社，2010:777.

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