測(cè)定注射用頭孢哌酮鈉中頭孢哌酮含量的高效液相色譜法

柯紅玲

摘要：

目的：對(duì)高效液相色譜法測(cè)定注射用頭孢哌酮鈉中頭孢哌酮含量的結(jié)果進(jìn)行分析探討，為今后的藥學(xué)研究工作提供可靠的參考依據(jù)。方法： 選用十八烷基硅烷鍵合硅膠作為填充劑，流動(dòng)相為水：乙腈：1N醋酸：三乙胺冰醋酸溶液（876：120：2.8：1.2），檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，進(jìn)樣量為10ul。結(jié)果： 線性關(guān)系考察結(jié)果顯示，頭孢哌酮的濃度在80-320ug/ml的范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，r=0.9999；加樣回收實(shí)驗(yàn)證實(shí)平均回收率為99.87%；RSD值為0.05%。結(jié)論： 經(jīng)高效液相色譜法對(duì)注射用頭孢哌酮鈉中頭孢哌酮含量進(jìn)行測(cè)定的方法準(zhǔn)確可靠，具有較強(qiáng)的專(zhuān)屬性，在注射液質(zhì)控中可發(fā)揮重要作用。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜法；注射用頭孢哌酮鈉；頭孢哌酮 ；含量測(cè)定

【中圖分類(lèi)號(hào)】

R453 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】1002-3763（2014）05-0071-01

目前臨床上應(yīng)用的注射用頭孢哌酮鈉屬于第三代頭孢菌素類(lèi)抗生素，其主要作用機(jī)制為通過(guò)對(duì)細(xì)菌細(xì)胞壁合成進(jìn)行機(jī)制而實(shí)現(xiàn)殺菌的效果。相對(duì)于第一代、第二代頭孢菌素具有更強(qiáng)的殺菌效果，且屬于光譜抗菌藥物，在臨床上的應(yīng)用較為廣泛。《中國(guó)藥典》2010版中規(guī)定采取高效液相色譜法對(duì)注射用頭孢哌酮鈉進(jìn)行質(zhì)量控制^[1]。本次實(shí)驗(yàn)中采取高效液相色譜法對(duì)主要用頭孢哌酮鈉中的頭孢哌酮含量進(jìn)行了測(cè)定，現(xiàn)匯報(bào)結(jié)果如下。

1 實(shí)驗(yàn)儀器與材料

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器：

所用儀器為我實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的安捷倫高效液相色譜儀，以及相配套的高壓輸送泵、紫外檢測(cè)器以及色譜工作站。實(shí)驗(yàn)中還會(huì)用到電子天平。

1.2 實(shí)驗(yàn)材料：

所用試劑包括：注射用頭孢哌酮鈉，頭孢哌酮鈉對(duì)照品，乙腈、1N醋酸、三乙胺冰醋酸均為色譜純，實(shí)驗(yàn)用水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件：

所用色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠填充柱，流動(dòng)相為水：乙腈：1N醋酸：三乙胺冰醋酸溶液（876：120：2.8：1.2），流速為2.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，進(jìn)樣量為10ul，柱溫為40℃。

2.2 溶液制備

2.2.1 對(duì)照品溶液制備：

精稱(chēng)16mg頭孢哌酮對(duì)照品，放置在100ml的容量瓶中，經(jīng)流動(dòng)相溶解并定容至刻度，搖勻備用。

2.2.2 供試品溶液制備：

取注射用頭孢哌酮鈉10支，將其混勻后精密稱(chēng)取1034mg，放置在1000ml的容量瓶中，經(jīng)水溶解后定容至刻度，精密量取該溶液16ml，在100ml的容量瓶中經(jīng)流動(dòng)相溶解并定容至刻度，搖勻后備用。

2.3 系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)

2.3.1 精密度實(shí)驗(yàn)：

取2.2.1配制的對(duì)照品10ul，連續(xù)6次進(jìn)樣檢測(cè)，記錄色譜圖，計(jì)算頭孢哌酮主峰面積的RSD值，結(jié)果得RSD值為0.052%，精密度良好。

2.3.2 線性關(guān)系考察：

精稱(chēng)32.15mg的對(duì)照品，經(jīng)流動(dòng)相溶解后定容至100ml容量瓶中，搖勻后，精取2.5、3.75、5、7.5、10ml，放置在10ml的容量瓶中，經(jīng)流動(dòng)相稀釋定容，而后分別取10ul進(jìn)樣檢測(cè)，記錄色譜圖，以樣品濃度作為橫坐標(biāo)，峰面積作為縱坐標(biāo)做回歸方程，本次實(shí)驗(yàn)中，頭孢哌酮濃度在80-320ug/ml的范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，回歸方程為：Y=6.938X×10-5+1.441×10-4，r=0.9999。

2.3.3 加樣回收實(shí)驗(yàn)：

在已知濃度的樣品中加入一定量的頭孢哌酮對(duì)照品，在2.1所示色譜條件下進(jìn)樣檢測(cè)，計(jì)算回收率。本次加樣回收實(shí)驗(yàn)中，頭孢哌酮的平均回收率為99.87%，RSD值為0.05%。

2.4 不同批次樣品測(cè)定：

取3個(gè)批次的注射用頭孢哌酮鈉各10支，按照2.2.2所示條件配制成供試品溶液，10ul進(jìn)樣檢測(cè)，經(jīng)計(jì)算發(fā)現(xiàn)，3個(gè)批次的注射用頭孢哌酮鈉中頭孢哌酮的百分含量分別為100.9%、101.1%、100.9%，均符合標(biāo)準(zhǔn)，屬于合格品。

3 討論

目前對(duì)于藥品質(zhì)量控制工作而言，高效液相色譜法發(fā)揮了重要的作用，對(duì)流動(dòng)相、色譜柱進(jìn)行合理的選擇，并嚴(yán)格篩選出色譜條件后，可為藥品質(zhì)量控制工作提供可靠的參考依據(jù)^[2]。本次實(shí)驗(yàn)中，出于對(duì)高效液相色譜法測(cè)定注射用頭孢哌酮鈉中頭孢哌酮含量的結(jié)果進(jìn)行分析探討的目的，經(jīng)以下色譜條件（所用色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠填充柱，流動(dòng)相為水：乙腈：1N醋酸：三乙胺冰醋酸溶液（876：120：2.8：1.2），流速為2.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，進(jìn)樣量為10ul，柱溫為40℃）對(duì)注射用頭孢哌酮鈉中的頭孢哌酮含量進(jìn)行了測(cè)定，通過(guò)一系列的系統(tǒng)性實(shí)驗(yàn)證實(shí)，該色譜條件在測(cè)定頭孢哌酮含量時(shí)具有良好的系統(tǒng)適用性，精密度良好，回收率高，且在一定濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系較為理想^[3]。樣品測(cè)定結(jié)果顯示，頭孢哌酮含量較高，符合標(biāo)準(zhǔn)，均為合格品^[4]。

綜上所述，上述高效液相色譜條件適合對(duì)注射用頭孢哌酮鈉中頭孢哌酮含量進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，對(duì)于注射液質(zhì)量控制工作而言意義重大，值得關(guān)注。

參考文獻(xiàn)

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