不規則抗體血液的處理及應用探討

馮剛麗

[摘要] 無償獻血工作中，隨著免疫血液學技術的發展和長期輸血實踐的積累，檢測技術不斷創新，采集的血液中不規則抗體篩查率不斷提高。不規則抗體血液不經處理，患者輸注后會出現一系列不同程度的輸血反應，危及病人的健康和生命安全。將此類血液報廢，既浪費血液資源又加重了血液的供需矛盾。對此類血液進行科學管理及合理的處理后應用于臨床，不但緩解了血液的緊張供應又提高了輸血的安全性。

[關鍵詞] 不規則抗體； 血液； 處理； 應用

[中圖分類號] R331.1；457.1+1 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2014）17-0082-04

The processing and application of the blood containing irregular antibodies

FENG Gangli

Blood Distribution Department of Xiantao Blood Bank in Hubei Province， Xiantao 433000，China

[Abstract] With the development of immunohematology technology and the experience accumulation of blood transfusion as well as the continuous innovation of detection technology， the screening test rate of irregular antibodies in the collected blood has been improving. Patients transfused with the blood containing irregular antibodies could suffer a series of fatal blood transfusion reactions which often endanger recipients health and life. Dumping such blood containing irregular antibodies is a waste of blood resource. It also increases the contradictions between the blood supply and demand. With a scientific management and appropriate processing， blood containing irregular antibodies can not only ease the blood supply shortage but also ensure the transfusion safety to clinical practice.

[Key words] Irregular antibodies； Blood； Processing； Application

不規則抗體又稱意外抗體，是指血清中抗-A、抗-B以外的其他血型抗體。隨著改革開放步伐的加快、人群流動性加大和醫療技術的提高及大型手術的開展，輸血工作出現新的問題，即用血量增加，大量輸血和反復輸血的病例增多，人群血型差異加大，不規則抗體的重要性凸顯出來。直接輸注此類血液會導致患者出現不同程度的輸血反應，為此，筆者就不規則抗體血液的科學處理及應用進行探討，現報道如下。

1 不規則抗體篩查的重要性

由于血液系統的不規則抗體可能導致輸血反應，輕者引起畏寒、發熱，重者紅細胞受到嚴重破壞，導致溶血性輸血反應，甚至危及受血者的生命。此外對孕婦而言，可引起新生兒溶血病，影響新生兒器官的發育，并抑制他們的智力發育，嚴重危及新生兒生命。衛生部明文規定有輸血史、妊娠史或短期內需要接受多次輸血者必須做抗體篩選試驗。因此，抗體篩查是必要的，其重要性主要有以下三個方面[1，2]。

1.1無償獻血采集的血液進行抗體篩查

無償獻血采集的血液進行抗體篩查可以有效管理不規則抗體血液的捐助，避免由于獻血者血液中不規則抗體引起患者紅細胞破壞而引起溶血性輸血反應，減少不必要的血液浪費，降低血液成本。

1.2 實行患者輸血前不規則抗體篩查

實行患者輸血前不規則抗體篩查可以有足夠的時間選擇不包含針對不規則抗體的相應抗原的血液，從而防止含有抗原的血液輸注含有相應的抗體的患者體內，并引起溶血輸血反應，以確保輸血安全。

1.3孕婦進行不規則抗體篩查

盡早發現不規則抗體，可以在孕期進行新生兒溶血病的預防和治療，減少不規則抗體給胎兒或新生兒帶來的傷害，減輕新生兒溶血病的程度，提高胎兒或新生兒的身體素質[3-9]。

2 不規則抗體血液的處理方法

2.1采用高濃度甘油慢凍法處理

在血液采集2～6 d內，經離心分離出血漿、白細胞及血小板，向剩余濃縮紅細胞內加入57.1%甘油溶液，1U濃縮紅細胞加入甘油160 mL，1.5U濃縮紅細胞加入甘油240mL，2U濃縮紅細胞加入甘油320mL。使甘油最終濃度為40%。在加甘油的同時要不斷振蕩，速度應先慢后快，15～20min加畢。在室溫平衡30min后，放入-80℃低溫冰箱保存，并做好標識。美國FDA允許此法保存期為10年[10]。

2.2采用封閉式或開放式洗滌

采用封閉式或開放式洗滌法將不規則抗體血液制備成紅細胞回收率≥70%，血漿蛋白清除率≥98%，白細胞清除率≥80%。外觀無凝塊、溶血、氣泡，上清液澄清透明的洗滌紅細胞（WRC）。endprint

2.2.1封閉式三聯鹽水袋洗滌法 三聯鹽水袋為3個容積為350～400 mL、單袋用塑料管道相連的密閉無菌無熱源系統。每袋內裝有200 mL注射用生理鹽水，主袋連接穿刺針頭1個。三個袋子之間用塑料夾子夾住，彼此不相連。①保存期內的不規則抗體血液用作洗滌紅細胞的原料。②將三聯鹽水袋主袋上的針頭插入紅細胞袋的進針座內，把主袋內200 mL鹽水加入紅細胞袋內，充分混勻后，倒流入三聯袋主袋內。③四個袋子分別裝于離心套桶中配平后，對稱放入賀利離心機內，在轉速3600轉/min、溫度4℃條件下，離心8 min。④離心后將裝有血液的血袋懸掛于支架上，將上清和白膜分入空袋內，熱合切斷與廢液相連的塑料管，棄去廢液袋。⑤重復②～④步驟，依次洗滌紅細胞3次。⑥洗滌紅細胞制品在三聯袋的末袋內，將與末袋相連的塑料管內充滿紅細胞，分段熱合留樣本，用以臨床鑒定血型和交叉配型。

2.2.2集采血與洗滌于一體的洗滌方法 洗滌后增加紅細胞保存時間，減少在洗滌過程中對血液的污染。首先將血液置于母袋中CPD液中分離，將上層血漿移至空袋，將導管密封，血漿備用；再將第三袋中Map液移至母袋中混勻，進行第一次洗滌；將第四袋一部分Map液移至母袋中混勻，進行第二次洗滌；重復操作，進行第三次洗滌；將第四袋中剩余的Map液全部移至母袋中，密封，斷掉第三、四袋，將母袋中紅細胞與Map液混勻即可，此集采血與洗滌于一體，使用方便、安全，可在（4±2）℃保存30d[11]。

2.2.3開放式洗滌法 用普通醫用生理鹽水，在百級超凈臺內連接洗滌：①將有效期內檢測合格不規則抗體血液放入潔凈工作臺，并懸掛于分漿架上。②在超凈臺上用無菌操作將0.9%生理鹽水加入被洗滌的紅細胞袋內（1U紅細胞灌注100 mL，2U紅細胞灌注200 mL），邊灌注邊輕輕混勻。灌注完后，熱合配平。③放入賀利氏離心機，以轉速3600轉/min、溫度4℃離心8min。④在超凈臺上將上清液及白膜分入廢液袋中。⑤如此重復②～④步驟常規反復洗滌3次，最后一次分出上清液和白膜后，將0.9%氯化鈉注射液灌注其中（1U灌注 50mL，1.5U灌注75mL， 2U灌注100 mL），輕搖血袋使其混勻后，熱合并分段留樣。

2.2.4機器洗滌法 按規定的方法在洗滌儀器上安裝配套的耗材，安裝完畢后，將有效期內檢測合格不規則抗體血液通過無菌接管機與安裝好的耗材熱封管連接，連接成功后啟動儀器進行自動洗滌。機器洗滌紅細胞回收率91%，白細胞清除率99.71%，血漿蛋白清除率99.61%，洗滌效果優于手工洗滌的紅細胞回收率81%，白細胞清除率80.85%，血漿蛋白清除率99.16%。同時也避免在洗滌過程中血液污染，保證制備過程的無菌，但成本較手工高。目前國內應用較少[11]。

3 不規則抗體血液的應用

建立Rh（D）不規則抗體獻血者電子檔案，將其捐獻的血液制備成冰凍紅細胞保存，供交叉配血實驗成功的相同血型患者輸注。避免血液中的不規則抗體引起病人紅細胞的破壞導致溶血性輸血反應。輸血治療的患者檢測出不規則抗體，可預先自身儲備血液，用于這類患者的擇期手術。根據輸血治療的患者不規則抗體篩查結果，在不規則抗體獻血者電子檔案中選擇不含有針對某抗體響應抗原的血源，從而防止因輸注含有某抗體相應抗原的血液而引起的溶血性輸血反應，保證輸血安全。

Rh（D）以外的不規則抗體血液以及缺乏同型血時，進行不同型紅細胞相容性輸注，制備成洗滌紅細胞后供交叉配血實驗主側相合的患者使用。將檢測合格的不規則抗體血漿送到血液制品公司。制備成抗體血清，用于稀有血型的檢測。

4 仙桃市血站2011～2013年不規則抗體獻血者獻血人次統計

仙桃市血站2011年總計獻血5 464人次，其中不規則抗體獻血28人次，所占百分比為0.5%；2012年總計獻血5 036人次，其中不規則抗體獻血，23人次，所占百分比為0.4%；2013年總計獻血6 299人次，其中不規則抗體獻血48人次，所占百分比為0.8%。

5 討論

正常情況下，人體血液中不存在不規則抗體，但可通過輸血、母嬰血型不合的妊娠或血液制品的免疫刺激等產生不規則抗體。雖然不規則抗體在國內正常人群中檢出率僅為0.3%～2%，但如果輸注不經處理的不規則抗體血液患者就有致命的危險[12-15]。其中Rh血型系統的不規則抗體比較常見。我國漢族人群Rh血型系統以D抗原陽性最為多見，這是因為與我國將D抗原的檢測作為血液及輸血前的常規檢查有關。將檢測出Rh（D）陰性的血液制備成冰凍紅細胞，實行有效的冷鏈儲存，科學管理，使得大多數Rh（D）陰性受血者可以得到同型Rh（D）陰性紅細胞的有效輸注，降低Rh（D）陰性受血者的輸血風險。如果Rh（D）陰性受血者缺乏同型血時，制備成洗滌紅細胞后可進行不同型紅細胞相容性輸注，如AB型RhD陰性患者在缺乏同型血時，可選擇A型、B型或O型RhD陰性的洗滌紅細胞輸住，但交叉配血實驗主側要相合。

臨床上對于抗-D以外的其他不規則抗體通常是血型鑒定和交叉配血困難時，再做進一步不規則抗體篩查時才發現。紅細胞血型不規則抗體存在與否無規則可循，不規則抗體主要通過妊娠或輸血等途徑接觸到相應抗原的紅細胞后產生。根據人體免疫初級和二級應答反應的原理，機體第1次接觸到外來抗原后，產生特異性抗體并逐漸升高，2周左右達高峰維持一段時期后逐漸下降。如不再受相應抗原刺激，以后終將檢測不出抗體。初級應答后再接受同樣抗原刺激，常誘發二級應答（記憶應答），再一次刺激將加速和增強免疫應答。二級應答產生的抗體以IgG為主，紅細胞血型不規則抗體主要是IgG抗體。在我國最易產生血型不規則抗體的是Rh系統，其次是MNSs系統。Rh系統不規則抗體除抗-D外，抗-E、抗-C、抗-e、抗-c等也較為常見。現在臨床上已開展了Rh（D）抗原的常規檢測，對Rh（D）陰性的受血者進行同型輸血，但Rh（E、C、e、c）陰性患者并沒有同型輸注，因此產生抗-E、抗-C、抗-e、抗-c的概率較大。這些抗體進入人體同樣引發遲發性溶血性輸血反應[15]。如果抗-E、抗-C、抗-e、抗-c等不規則抗體血液制備成洗滌紅細胞使其不規則抗體98%或者全部清除后進行輸注，可避免或減輕不規則抗體引發的輸血反應的發生[16，17]。或對此類需要輸血的患者進行抗體篩查，可及早發現不規則抗體。從而準備不含有針對某抗體響應抗原的血液輸注。也可預先自身儲備血液，待其需要輸血時輸注。endprint

對篩查出有自身抗體的受血者原則上能不輸血，盡量不要輸血。在緊急用血情況下，可考慮輸注相合的洗滌紅細胞。ABO血型定型系統中，堅持正反定型，在正定型試劑中增加抗-A1、抗-AB及抗-H 。抗-AB用來確認弱A和弱B抗原；抗-A1用來鑒定A亞型；抗-H用來鑒定亞型及孟買型。只有正反定型結果相符才能正確判定ABO血型，以防不規則抗體漏檢，增加ABO血型系統不規則抗體檢測率。

但是我國《臨床輸血技術規范》只要求輸注紅細胞需做交叉配血實驗，而血漿和單采血小板只需同型輸注，并沒有要求輸注前需要交叉配血。不規則抗體溶解在血漿中，隨著臨床血漿用量的大幅提高和單采血小板的廣泛應用，獻血者不規則抗體的風險越來越大。輸血前檢查是一項具有高度責任性和技術性的工作，實驗者必須嚴格遵守技術操作規程，熟練和靈活應用現代血清學實驗的原理和技術，對所得的實驗結果給予全面、細致的觀察和分析。因為不規則抗體篩查可出現假陽性結果，應與不規則抗體區別，以免延誤患者的輸血治療。

臨床上急性溶血反應多由ABO血型不相容輸血引起，人為差錯是其主要原因；遲發性溶血反應多由ABO以外血型不相容輸血所致，輸血前檢查不規范是其主要原因。如何規范采血機構和臨床輸血機構對不規則抗體的檢測，對不規則抗體的獻血者和受血者的管理，是我們將要面臨的新問題。筆者呼吁采供血機構、臨床輸血機構以及社會應共同建立多血型已知抗原的血型電子檔案庫。一則可以解決有不規則抗體患者的輸血，二則也可為稀有血型患者提供相合血源。再則也是為容易被忽略的低頻抗原的抗體和以往所產生的抗體已降至難以檢測出的水平的人群提供重要參考資料。除Rh（D）抗原的其他不規則抗原（E、C、e、c）及ABO 血型系統的A1、A2等不規則抗原也應作為輸血前常規的檢測項目之一。臨床輸血機構應提高不相容性的檢測率，有效避免漏檢。臨床輸血前常規檢查中進行抗體篩查和鑒定，可縮短反復交叉配血所耗費的時間，防止緊急用血時找不到相容的獻血者而延誤救治；對抗體篩查陽性并且抗體特異性確定的受血者可選用無相應抗原的血液進行交叉配血和輸注；紅細胞血型不規則抗體的篩查和鑒定對保證輸血安全特別是有輸血史或妊娠史的婦女，可有效避免溶血性輸血反應和新生兒溶血病的發生。

不規則抗體是血型免疫抗體中最主要的抗體，每輸1U血液使受血者致敏的風險為1%～1.6%，多次反復輸血產生同種抗體的概率為15%～20%。因此也提醒醫務工作者在給患者進行輸血治療時權衡利弊，要科學合理地運用血液，避免不必要輸血給受血者造成的傷害。

6結論

不規則抗體血液，大部分血站都直接采用報廢制度。這不僅僅是對血液資源的浪費，也使少數不規則抗體受血者更加難以找到合適的血源，加重了血液供應的緊張程度。在目前情況下，采供血機構應該采取有效的措施提高不規則抗體的檢測率，規范對這類獻血者的管理。仙桃市血站2011～2013年不規則抗體獻血者獻血人次統計情況得出，仙桃市2011～2013年不規則抗體檢測陽性率符合我國的檢出率。對不規則抗體血液采取科學合理的處理應用于臨床后，沒出現一例因不規則抗體引起的輸血反應[18-20]。由此得出結論，雖然是少數血液含不規則抗體，但不規則抗體血液采取科學合理地處理后，應用于臨床既解決了少數不規則抗體人群用血困難，緩解血液緊張的供需矛盾又提高了輸血的安全性，是現代醫療安全值得倡導的措施。

[參考文獻]

[1] 中華人民共和國衛生部. 臨床輸血技術規范 [S].2000.

[2] 程建良，程志，許維濤，等. 血型不規則抗體檢測的臨床重要性[J]. 心理醫生，2011，（9）：1308.

[3] 郝瓊，夏華紅，陳鋒. 湖北省仙桃市無償獻血血液標本檢測情況分析[J]. 中國現代醫生，2012，50（7）：140-141.

[4] 王葆昶. 不規則抗體產生原因淺釋[J]. 北京醫學，2008， 30（12）：743.

[5] 代瓊，劉炳，胡偉，等. 不規則抗體篩查在臨床輸血中的應用[J]. 中國輸血雜志，2011，24（7）：604-605.

[6] 顧紅. 輸血前不規則抗體篩查對輸血安全的影響[J]. 河北醫學，2012，18（8）：1178-1180.

[7] 李文靜，蔣學兵，王燕菊，等. 輸血前不規則抗體篩查與臨床輸血安全[J]. 國際檢驗醫學雜志，2012，33（17）：2065-2066，2068.

[8] 晉向芳. 輸血前進行不規則抗體檢驗的臨床意義與價值分析[J]. 中外醫學研究， 2012，10（31）：52-53.

[9] 符曉玲，馮學冠，鄭三，等. 擇期手術患者輸血前血型不規則抗體檢測的臨床意義[J]. 海南醫學院學報，2011，17（9）：130-131，134.

[10] 鄒文濤，梁兵，田兆蒿. 冰凍紅細胞的制備方法、質量研究及臨床應用[J]. 中國輸血雜志，2006，19（3）：254-257.

[11] 崔英，張慶利，吳立華. 洗滌紅細胞的制備與應用[J]. 中國健康月刊，2011，30（5）：93-95.

[12] 張晨光，姚婧婧，龐桂芝，等. 血型不規則抗體檢測的方法學評價[J]. 檢驗醫學，2010，25（12）：929-932.

[13] 韓梅寧，范乃權，韓鵬. 運用3種方法檢測Rh不規則抗體的臨床應用[J]. 臨床血液學雜志，2009，22（12）：659-661.

[14] 李曉榮，魯思文，詹曉燕. 不規則抗體篩查與臨床安全輸血[J]. 中國醫藥指南，2010，8（3）：77-78.

[15] 高志峰，胡麗華. 不規則抗體篩查在臨床輸血中的分析應用[J]. 臨床血液學雜志，2012，25（10）：636-637.

[16] 陳莉萍. 不規則抗體篩查在臨床輸血中的價值與意義[J]. 白求恩軍醫學院學報，2013，11（4）：371-372.

[17] 王葆昶. 安全輸血的幾點體會[J]. 國際檢驗醫學雜志，2008，29（1）：71-73.

[18] 郝瓊，夏華紅. 流動采血車采血護理安全隱患防范措施探討[J]. 中國當代醫藥，2013，20（11）：163-164.

[19] 陳蕾. 護理安全文化研究新進展[J]. 護理實踐與研究，2012，9（9）：114-116.

[20] 范建萍. 急診科護理安全隱患防范措施[J]. 中國當代醫藥，2012，9（8）：79-81.

（收稿日期：2014-03-07）endprint